A transzverzális sípcsont-transzport klinikai és mechanikai vizsgálata összetett lábfekélyben
2023. január 20. frissítette: Samuel KK Ling, Chinese University of Hong Kong
A TTT egy újszerű műtéti technika, amely potenciálisan megoldhatja a diabéteszes lábfekélyek hatékony kezelésének régóta fennálló hiányát, csökkentve az amputációk szükségességét és enyhítve az ezzel járó társadalmi-gazdasági hatásokat. Ez a vizsgálat lesz a világon az első leendő RCT, amely igazolja a TTT diabéteszes lábfekélyek kezelésében nyújtott klinikai előnyeiről szóló ígéretes klinikai vizsgálatokat. Ezenkívül a vizsgálatból származó vérminták lehetővé teszik számunkra, hogy tanulmányozzuk a különböző szisztémás keringő oldható faktorokat a neovaszkularizációval, az immunmodulációval és az őssejt-mobilizációval kapcsolatban. A vér és a különböző időpontok vételével jobban megértjük a különböző biomarkerek bonyolult kölcsönhatását. Ez a GRF lehetővé teszi számunkra, hogy szövetmintákat nyerjünk a TTT műtét utáni szövettani sejtváltozások elemzéséhez. Ez további betekintést nyújt számunkra a TTT működésébe, valamint potenciálisan segít meghatározni a beavatkozással kapcsolatos fontos változásokat és időkereteket.
A PI, a Co-I-k és az együttműködők erős klinikusokból és tudósokból álló csapatot hoznak létre, szilárd klinikai és alaptudományi múlttal. A csapat irányelveket és sebészeti technikákat tett közzé a TTT-ben, és több holttestű tréninget is működtet, amelyek a TTT sebészeti technikáját tanítják a helyi ortopéd sebészek számára. A csapat egy patkány TTT-modellt is kidolgozott, és közzétett a TTT immunmodulációjáról és neovaszkularizációjáról az egyéb folyamatban lévő állatokon végzett mechanikai kísérletek mellett.
Ez a prospektív többközpontú, randomizált, kontrollált vizsgálat megalapozhatja ezt a költséghatékony TTT-műtétet, amely szabályozza a neovaszkularizációt, a neurogenezist, az immunmodulációt és az MSC-k mobilizálását különböző krónikus állapotok kezelésére. A regeneratív gyógyászat több millió dolláros iparág, és a TTT potenciális alkalmazása számos klinikai alkalmazást eredményezhet, nem korlátozódik a DFU-kra.
A tanulmány áttekintése
Állapot
Még nincs toborzás
Körülmények
Beavatkozás / kezelés
Tanulmány típusa
Beavatkozó
Beiratkozás (Várható)
54
Fázis
- Nem alkalmazható
Részvételi kritériumok
A kutatók olyan embereket keresnek, akik megfelelnek egy bizonyos leírásnak, az úgynevezett jogosultsági kritériumoknak. Néhány példa ezekre a kritériumokra a személy általános egészségi állapota vagy a korábbi kezelések.
Jogosultsági kritériumok
Tanulmányozható életkorok
18 év és régebbi (Felnőtt, Idősebb felnőtt)
Egészséges önkénteseket fogad
Nem
Tanulmányozható nemek
Összes
Leírás
Bevételi kritériumok:
- 18 év feletti felnőttek
- Wagner 4-es stádiumú lábfekélyben (részleges láb gangrénában) szenvedő betegek
- Bakteriális fluoreszcens képalkotással nincs aktív sebfertőzés. (a Moleculight i:X, Smith and Nephew kézi eszköz 405 nm-es lila fénnyel világít, ami arra készteti a baktériumokat, hogy jellegzetes endogén fluoreszcens jeleket bocsátanak ki, amelyek valós időben jelennek meg az eszköz képernyőjén, lehetővé téve a megfelelő sebészeti eltávolítás objektív mérését)
- Biokémiailag igazolt cukorbetegség éhomi plazma glükózszintje ≥ 7,0 mmol/l, vagy véletlenszerűen kiválasztott plazma glükóz ≥ 11,1 mmol/l vagy hemoglobin A1c (HbA1c) szintje ≥ 6,5%
- Az érsebész angioplasztikára/vaszkuláris bypassra próbálta ki
- A mikrovaszkuláris sebész a rekonstrukciós lebenyműtétből hárította el
Kizárási kritériumok:
- Kontrollálatlan szepszis
- Ellenjavallatok külső rögzítő eszköz sípcsonton történő alkalmazására (fedő bőrbetegségek, sebészeti eszközök, például sípcsont köröm, teljes térdprotézis stb.)
- Súlyos orvosi társbetegségek, amelyek kizárják a biztonságos érzéstelenítést (a közelmúltban elszenvedett szívinfarktus, korlátozott tüdőfunkció stb.)
- Mentális vagy testi fogyatékosság, amely ronthatja a beavatkozási terv betartásának képességét, pl. súlyos demencia, pszichózis stb.
- Legutóbbi revaszkularizációs eljárás (<12 hét)
- A közelmúltban alkalmazott, sejtproliferációt befolyásoló gyógyszeres kezelés/beavatkozás (pl. kemoterápia, sugárterápia stb.), sugárterápia stb.)
Tanulási terv
Ez a rész a vizsgálati terv részleteit tartalmazza, beleértve a vizsgálat megtervezését és a vizsgálat mérését.
Hogyan készül a tanulmány?
Tervezési részletek
- Elsődleges cél: Kezelés
- Kiosztás: Véletlenszerűsített
- Beavatkozó modell: Párhuzamos hozzárendelés
- Maszkolás: Nincs (Open Label)
Fegyverek és beavatkozások
Résztvevő csoport / kar |
Beavatkozás / kezelés |
|---|---|
|
Egyéb: Ellenőrző csoport
Hagyományos kezelés: öltözködés + negatív nyomású sebterápia
|
Öltözködés + negatív nyomású sebterápia
|
|
Kísérleti: TTT Csoport
Kötözés + negatív nyomású sebterápia + keresztirányú sípcsont transzport
|
A transzverzális tibiális transzport a figyelemelvonás hisztogenezisében használt fogalmak újszerű adaptációja.
Ennek a műtéti elvnek a legáltalánosabb alkalmazása a csonthosszabbító műtét, amely egy jól bevált műtéti eljárás, melynek során külső fixátort helyeznek a csontba, kortikotómiát hoznak létre, és fokozatosan, az optimális 0,5 mm/12 óra sebességgel meghosszabbítják a csontot.
A disztrakciós hisztogenezis biológiai mechanizmusai közé tartoznak az olyan jelátviteli útvonalak aktiválása, mint az Interleukin 1 és Interleukin 6 citokinek, a TNF alfa gyulladást elősegítő markerek, a pro-osteogén TGF-béta, a BMP-k és a pro-angiogén faktorok, a VEGF és az angiopoietin.
A TTT a disztrakció hisztiogenezis fogalmát használja, de a disztrakciót a hosszanti disztrakció helyett a keresztirányú síkban hajtják végre.
Ezen túlmenően, a figyelemelvonás időszaka egy megfelelő kompressziós periódussal párosul, és végül nem eredményez nettó változást a végtaghosszban.
|
Mit mér a tanulmány?
Elsődleges eredményintézkedések
Eredménymérő |
Intézkedés leírása |
Időkeret |
|---|---|---|
|
Seb mérete
Időkeret: 0 hónap
|
A seb méretét digitális fényképezéssel mérik szabványos jelölőpontokkal.
|
0 hónap
|
|
Seb mérete
Időkeret: 1 hónap
|
A seb méretét digitális fényképezéssel mérik szabványos jelölőpontokkal.
|
1 hónap
|
|
Seb mérete
Időkeret: 3 hónap
|
A seb méretét digitális fényképezéssel mérik szabványos jelölőpontokkal.
|
3 hónap
|
|
Seb mérete
Időkeret: 6 hónap
|
A seb méretét digitális fényképezéssel mérik szabványos jelölőpontokkal.
|
6 hónap
|
|
Seb mérete
Időkeret: 12 hónap
|
A seb méretét digitális fényképezéssel mérik szabványos jelölőpontokkal.
|
12 hónap
|
Másodlagos eredményintézkedések
Eredménymérő |
Intézkedés leírása |
Időkeret |
|---|---|---|
|
Lábfunkció
Időkeret: 0 hónap
|
A lábfunkciót objektíven mérjük az érvényes kínai láb és boka eredménypontszámunkkal vagy az eredeti angol verzióval.
|
0 hónap
|
|
Lábfunkció
Időkeret: 1 hónap
|
A lábfunkciót objektíven mérjük az érvényes kínai láb és boka eredménypontszámunkkal vagy az eredeti angol verzióval.
|
1 hónap
|
|
Lábfunkció
Időkeret: 3 hónap
|
A lábfunkciót objektíven mérjük az érvényes kínai láb és boka eredménypontszámunkkal vagy az eredeti angol verzióval.
|
3 hónap
|
|
Lábfunkció
Időkeret: 6 hónap
|
A lábfunkciót objektíven mérjük az érvényes kínai láb és boka eredménypontszámunkkal vagy az eredeti angol verzióval.
|
6 hónap
|
|
Lábfunkció
Időkeret: 12 hónap
|
A lábfunkciót objektíven mérjük az érvényes kínai láb és boka eredménypontszámunkkal vagy az eredeti angol verzióval.
|
12 hónap
|
|
Az amputáció előfordulása
Időkeret: Akár 52 hétig
|
Az amputáció előfordulása
|
Akár 52 hétig
|
|
Boka brachiális nyomásindex
Időkeret: 0 hónap
|
A boka brachiális nyomásindex (API) a perifériás vaszkuláris perfúzió klinikai mérése.
|
0 hónap
|
|
Boka brachiális nyomásindex
Időkeret: 1 hónap
|
A boka brachiális nyomásindex (API) a perifériás vaszkuláris perfúzió klinikai mérése.
|
1 hónap
|
|
Boka brachiális nyomásindex
Időkeret: 3 hónap
|
A boka brachiális nyomásindex (API) a perifériás vaszkuláris perfúzió klinikai mérése.
|
3 hónap
|
|
Boka brachiális nyomásindex
Időkeret: 6 hónap
|
A boka brachiális nyomásindex (API) a perifériás vaszkuláris perfúzió klinikai mérése.
|
6 hónap
|
|
Boka brachiális nyomásindex
Időkeret: 12 hónap
|
A boka brachiális nyomásindex (API) a perifériás vaszkuláris perfúzió klinikai mérése.
|
12 hónap
|
|
Az angiogén faktorok ELISA-ja
Időkeret: 0 hónap
|
Több időpontban 10 ml-es perifériás vérmintát vesznek, és a humán szérum vaszkuláris endoteliális növekedési faktort (VEGF), az alapvető fibroblaszt növekedési faktort (bFGF), az epidermális növekedési faktort (EGF) és a vérlemezke-eredetű növekedési faktort (PDGF) elemzik. egy ELISA készletet dolgoztunk fel a protokollja szerint.
|
0 hónap
|
|
Az angiogén faktorok ELISA-ja
Időkeret: 1 hónap
|
Több időpontban 10 ml-es perifériás vérmintát vesznek, és a humán szérum vaszkuláris endoteliális növekedési faktort (VEGF), az alapvető fibroblaszt növekedési faktort (bFGF), az epidermális növekedési faktort (EGF) és a vérlemezke-eredetű növekedési faktort (PDGF) elemzik. egy ELISA készletet dolgoztunk fel a protokollja szerint.
|
1 hónap
|
|
Az angiogén faktorok ELISA-ja
Időkeret: 3 hónap
|
Több időpontban 10 ml-es perifériás vérmintát vesznek, és a humán szérum vaszkuláris endoteliális növekedési faktort (VEGF), az alapvető fibroblaszt növekedési faktort (bFGF), az epidermális növekedési faktort (EGF) és a vérlemezke-eredetű növekedési faktort (PDGF) elemzik. egy ELISA készletet dolgoztunk fel a protokollja szerint.
|
3 hónap
|
|
Az angiogén faktorok ELISA-ja
Időkeret: 6 hónap
|
Több időpontban 10 ml-es perifériás vérmintát vesznek, és a humán szérum vaszkuláris endoteliális növekedési faktort (VEGF), az alapvető fibroblaszt növekedési faktort (bFGF), az epidermális növekedési faktort (EGF) és a vérlemezke-eredetű növekedési faktort (PDGF) elemzik. egy ELISA készletet dolgoztunk fel a protokollja szerint.
|
6 hónap
|
|
Az angiogén faktorok ELISA-ja
Időkeret: 12 hónap
|
Több időpontban 10 ml-es perifériás vérmintát vesznek, és a humán szérum vaszkuláris endoteliális növekedési faktort (VEGF), az alapvető fibroblaszt növekedési faktort (bFGF), az epidermális növekedési faktort (EGF) és a vérlemezke-eredetű növekedési faktort (PDGF) elemzik. egy ELISA készletet dolgoztunk fel a protokollja szerint.
|
12 hónap
|
|
Az angiogén markerek immunfestése
Időkeret: 0 hónap
|
A 3 mm-es ütési biopsziát (RazorMed) a seb széléről több időpontban veszik.
A mintákat paraffin beágyazáshoz dolgozzák fel, és 7 μm-es soros vékony metszeteket vágnak.
Az angiogenezis (CD31, alfa-SMA) és sejtproliferáció (Ki-67) antitestek markerei a paraffin metszet immunfestésére szolgálnak a korábban publikált protokoll szerint.
A pozitívan festődött sejtszámot a DFU zónában minden egyes páciensnél képalkotó szoftverrel, a közzétett protokoll szerint számszerűsítik.
A párosított T-tesztet az MSC-k arányának, az angiogenezisnek és a sejtproliferációnak a különbségének összehasonlítására alkalmazzák az egyes betegeknél az SPSS 18.0 szoftverrel Windowshoz (SPSS, Chicago, IL, USA).
Nem paraméteres tesztet használunk a statisztikailag szignifikánsnak tekintett p<0,05 átlagértékek összehasonlítására.
|
0 hónap
|
|
Az angiogén markerek immunfestése
Időkeret: 1 hónap
|
A 3 mm-es ütési biopsziát (RazorMed) a seb széléről több időpontban veszik.
A mintákat paraffin beágyazáshoz dolgozzák fel, és 7 μm-es soros vékony metszeteket vágnak.
Az angiogenezis (CD31, alfa-SMA) és sejtproliferáció (Ki-67) antitestek markerei a paraffin metszet immunfestésére szolgálnak a korábban publikált protokoll szerint.
A pozitívan festődött sejtszámot a DFU zónában minden egyes páciensnél képalkotó szoftverrel, a közzétett protokoll szerint számszerűsítik.
A párosított T-tesztet az MSC-k arányának, az angiogenezisnek és a sejtproliferációnak a különbségének összehasonlítására alkalmazzák az egyes betegeknél az SPSS 18.0 szoftverrel Windowshoz (SPSS, Chicago, IL, USA).
Nem paraméteres tesztet használunk a statisztikailag szignifikánsnak tekintett p<0,05 átlagértékek összehasonlítására.
|
1 hónap
|
|
Az angiogén markerek immunfestése
Időkeret: 3 hónap
|
A 3 mm-es ütési biopsziát (RazorMed) a seb széléről több időpontban veszik.
A mintákat paraffin beágyazáshoz dolgozzák fel, és 7 μm-es soros vékony metszeteket vágnak.
Az angiogenezis (CD31, alfa-SMA) és sejtproliferáció (Ki-67) antitestek markerei a paraffin metszet immunfestésére szolgálnak a korábban publikált protokoll szerint.
A pozitívan festődött sejtszámot a DFU zónában minden egyes betegnél képalkotó szoftverrel, a közzétett protokoll szerint számszerűsítik.
A párosított T-tesztet az MSC-k arányának, az angiogenezisnek és a sejtproliferációnak a különbségének összehasonlítására alkalmazzák az egyes betegeknél az SPSS 18.0 szoftverrel Windowshoz (SPSS, Chicago, IL, USA).
A statisztikailag szignifikánsnak tekintett p<0,05 átlagértékek összehasonlítására nem paraméteres tesztet használunk.
|
3 hónap
|
|
Az angiogén markerek immunfestése
Időkeret: 6 hónap
|
A 3 mm-es ütési biopsziát (RazorMed) a seb széléről több időpontban veszik.
A mintákat paraffin beágyazáshoz dolgozzák fel, és 7 μm-es soros vékony metszeteket vágnak.
Az angiogenezis (CD31, alfa-SMA) és sejtproliferáció (Ki-67) antitestek markerei a paraffin metszet immunfestésére szolgálnak a korábban publikált protokoll szerint.
A pozitívan festődött sejtszámot a DFU zónában minden egyes páciensnél képalkotó szoftverrel, a közzétett protokoll szerint számszerűsítik.
A párosított T-tesztet az MSC-k arányának, az angiogenezisnek és a sejtproliferációnak a különbségének összehasonlítására alkalmazzák az egyes betegeknél az SPSS 18.0 szoftverrel Windowshoz (SPSS, Chicago, IL, USA).
Nem paraméteres tesztet használunk a statisztikailag szignifikánsnak tekintett p<0,05 átlagértékek összehasonlítására.
|
6 hónap
|
|
Az angiogén markerek immunfestése
Időkeret: 12 hónap
|
A 3 mm-es ütési biopsziát (RazorMed) a seb széléről több időpontban veszik.
A mintákat paraffin beágyazáshoz dolgozzák fel, és 7 μm-es soros vékony metszeteket vágnak.
Az angiogenezis (CD31, alfa-SMA) és sejtproliferáció (Ki-67) antitestek markerei a paraffin metszet immunfestésére szolgálnak a korábban publikált protokoll szerint.
A pozitívan festődött sejtszámot a DFU zónában minden egyes páciensnél képalkotó szoftverrel, a közzétett protokoll szerint számszerűsítik.
A párosított T-tesztet az MSC-k arányának, az angiogenezisnek és a sejtproliferációnak a különbségének összehasonlítására alkalmazzák az egyes betegeknél az SPSS 18.0 szoftverrel Windowshoz (SPSS, Chicago, IL, USA).
Nem paraméteres tesztet használunk a statisztikailag szignifikánsnak tekintett p<0,05 átlagértékek összehasonlítására.
|
12 hónap
|
|
Semmes Weinstein monofil teszt
Időkeret: 0 hónap
|
a 0,57-es méretű monofil 10 g-os kihajlási erővel a klinikailag elfogadott határérték a védőérzet jelenlétére vagy hiányára.
A méréseket 3 helyszínen szabványosítják; az 1. lábközépcsont, 3. lábközépcsont és 5. lábközépcsont.
|
0 hónap
|
|
Semmes Weinstein monofil teszt
Időkeret: 1 hónap
|
a 0,57-es méretű monofil 10 g-os kihajlási erővel a klinikailag elfogadott határérték a védőérzet jelenlétére vagy hiányára.
A méréseket 3 helyszínen szabványosítják; az 1. lábközépcsont, 3. lábközépcsont és 5. lábközépcsont.
|
1 hónap
|
|
Semmes Weinstein monofil teszt
Időkeret: 3 hónap
|
a 0,57-es méretű monofil 10 g-os kihajlási erővel a klinikailag elfogadott határérték a védőérzet jelenlétére vagy hiányára.
A méréseket 3 helyszínen szabványosítják; az 1. lábközépcsont, 3. lábközépcsont és 5. lábközépcsont.
|
3 hónap
|
|
Semmes Weinstein monofil teszt
Időkeret: 6 hónap
|
a 0,57-es méretű monofil 10 g-os kihajlási erővel a klinikailag elfogadott határérték a védőérzet jelenlétére vagy hiányára.
A méréseket 3 helyszínen szabványosítják; az 1. lábközépcsont, 3. lábközépcsont és 5. lábközépcsont.
|
6 hónap
|
|
Semmes Weinstein monofil teszt
Időkeret: 12 hónap
|
a 0,57-es méretű monofil 10 g-os kihajlási erővel a klinikailag elfogadott határérték a védőérzet jelenlétére vagy hiányára.
A méréseket 3 helyszínen szabványosítják; az 1. lábközépcsont, 3. lábközépcsont és 5. lábközépcsont.
|
12 hónap
|
|
A neurogén markerek szekciója
Időkeret: 0 hónap
|
A 3 mm-es ütési biopsziát (RazorMed) a seb széléről több időpontban veszik.
A mintákat paraffin beágyazáshoz dolgozzák fel, és 7 μm-es soros vékony metszeteket vágnak.
A mintákat viaszmentesítjük és rehidratáljuk.
Az antigén visszanyerése (citrát antigén visszanyerési oldattal, ~30 perc, 65 ℃) és permeabilizálás (Triton™ X-100) után az axon (béta-tubulin 3) markereit (38) egy éjszakán át inkubáljuk, és a megfelelő másodlagos antitestet inkubáljuk. 1 órán keresztül.
A DFU zónában lévő pozitívan festett területet minden egyes betegnél képalkotó szoftverrel, a közzétett protokoll szerint számszerűsítik.
A párosított T-tesztet az SPSS 18.0 Windows-szoftverrel (SPSS, Chicago, IL, USA) alkalmazzák az egyes betegek axonterületeinek különbségének összehasonlítására.
A statisztikailag szignifikánsnak tekintett p<0,05 átlagértékek összehasonlítására nem paraméteres tesztet használunk.
|
0 hónap
|
|
A neurogén markerek szekciója
Időkeret: 1 hónap
|
A 3 mm-es ütési biopsziát (RazorMed) a seb széléről több időpontban veszik.
A mintákat paraffin beágyazáshoz dolgozzák fel, és 7 μm-es soros vékony metszeteket vágnak.
A mintákat viaszmentesítjük és rehidratáljuk.
Az antigén visszanyerése (citrát antigén visszanyerési oldattal, ~30 perc, 65 ℃) és permeabilizálás (Triton™ X-100) után az axon (béta-tubulin 3) markereit (38) egy éjszakán át inkubáljuk, és a megfelelő másodlagos antitestet inkubáljuk. 1 órán keresztül.
A DFU zónában lévő pozitívan festett területet minden egyes betegnél képalkotó szoftverrel, a közzétett protokoll szerint számszerűsítik.
A párosított T-tesztet az SPSS 18.0 Windows-szoftverrel (SPSS, Chicago, IL, USA) alkalmazzák az egyes betegek axonterületeinek különbségének összehasonlítására.
A statisztikailag szignifikánsnak tekintett p<0,05 átlagértékek összehasonlítására nem paraméteres tesztet használunk.
|
1 hónap
|
|
A neurogén markerek szekciója
Időkeret: 3 hónap
|
A 3 mm-es ütési biopsziát (RazorMed) a seb széléről több időpontban veszik.
A mintákat paraffin beágyazáshoz dolgozzák fel, és 7 μm-es soros vékony metszeteket vágnak.
A mintákat viaszmentesítjük és rehidratáljuk.
Az antigén visszanyerése (citrát antigén visszanyerési oldattal, ~30 perc, 65 ℃) és permeabilizálás (Triton™ X-100) után az axon (béta-tubulin 3) markereit (38) egy éjszakán át inkubáljuk, és a megfelelő másodlagos antitestet inkubáljuk. 1 órán keresztül.
A DFU zónában lévő pozitívan festett területet minden egyes betegnél képalkotó szoftverrel, a közzétett protokoll szerint számszerűsítik.
A párosított T-tesztet az SPSS 18.0 Windows-szoftverrel (SPSS, Chicago, IL, USA) alkalmazzák az egyes betegek axonterületeinek különbségének összehasonlítására.
A statisztikailag szignifikánsnak tekintett p<0,05 átlagértékek összehasonlítására nem paraméteres tesztet használunk.
|
3 hónap
|
|
A neurogén markerek szekciója
Időkeret: 6 hónap
|
A 3 mm-es ütési biopsziát (RazorMed) a seb széléről több időpontban veszik.
A mintákat paraffin beágyazáshoz dolgozzák fel, és 7 μm-es soros vékony metszeteket vágnak.
A mintákat viaszmentesítjük és rehidratáljuk.
Az antigén visszanyerése (citrát antigén visszanyerési oldattal, ~30 perc, 65 ℃) és permeabilizálás (Triton™ X-100) után az axon (béta-tubulin 3) markereit (38) egy éjszakán át inkubáljuk, és a megfelelő másodlagos antitestet inkubáljuk. 1 órán keresztül.
A DFU zónában lévő pozitívan festett területet minden egyes betegnél képalkotó szoftverrel, a közzétett protokoll szerint számszerűsítik.
A párosított T-tesztet az SPSS 18.0 Windows-szoftverrel (SPSS, Chicago, IL, USA) alkalmazzák az egyes betegek axonterületeinek különbségének összehasonlítására.
A statisztikailag szignifikánsnak tekintett p<0,05 átlagértékek összehasonlítására nem paraméteres tesztet használunk.
|
6 hónap
|
|
A neurogén markerek szekciója
Időkeret: 12 hónap
|
A 3 mm-es ütési biopsziát (RazorMed) a seb széléről több időpontban veszik.
A mintákat paraffin beágyazáshoz dolgozzák fel, és 7 μm-es soros vékony metszeteket vágnak.
A mintákat viaszmentesítjük és rehidratáljuk.
Az antigén visszanyerése (citrát antigén-visszanyerő oldattal, ~30 perc, 65 ℃) és a permeabilizálás (Triton™ X-100) után az axon (béta-tubulin 3) (38) markereit egy éjszakán át inkubáljuk, és a megfelelő másodlagos antitestet inkubáljuk. 1 órán keresztül.
A DFU zónában lévő pozitívan festett területet minden egyes betegnél képalkotó szoftverrel, a közzétett protokoll szerint számszerűsítik.
A párosított T-tesztet az SPSS 18.0 Windows-szoftverrel (SPSS, Chicago, IL, USA) alkalmazzák az egyes betegek axonterületeinek különbségének összehasonlítására.
A statisztikailag szignifikánsnak tekintett p<0,05 átlagértékek összehasonlítására nem paraméteres tesztet használunk.
|
12 hónap
|
|
Gyulladásos sejtáramlási citometria
Időkeret: 0 hónap
|
10 ml perifériás vért veszünk.
A mononukleáris sejteket Ficoll-Paque sűrűséggradiens centrifugálással gyűjtjük össze.
A klasszikus és nem klasszikus monociták populációit áramlási citometriával elemezzük, és a CD172a+ és CD43+ sejtek arányából azonosítjuk.
|
0 hónap
|
|
Gyulladásos sejtáramlási citometria
Időkeret: 1 hónap
|
10 ml perifériás vért veszünk.
A mononukleáris sejteket Ficoll-Paque sűrűséggradiens centrifugálással gyűjtjük össze.
A klasszikus és nem klasszikus monociták populációit áramlási citometriával elemezzük, és a CD172a+ és CD43+ sejtek arányából azonosítjuk.
|
1 hónap
|
|
Gyulladásos sejtáramlási citometria
Időkeret: 3 hónap
|
10 ml perifériás vért veszünk.
A mononukleáris sejteket Ficoll-Paque sűrűséggradiens centrifugálással gyűjtjük össze.
A klasszikus és nem klasszikus monociták populációit áramlási citometriával elemezzük, és a CD172a+ és CD43+ sejtek arányából azonosítjuk.
|
3 hónap
|
|
Gyulladásos sejtáramlási citometria
Időkeret: 6 hónap
|
10 ml perifériás vért veszünk.
A mononukleáris sejteket Ficoll-Paque sűrűséggradiens centrifugálással gyűjtjük össze.
A klasszikus és nem klasszikus monociták populációit áramlási citometriával elemezzük, és a CD172a+ és CD43+ sejtek arányából azonosítjuk.
|
6 hónap
|
|
Gyulladásos sejtáramlási citometria
Időkeret: 12 hónap
|
10 ml perifériás vért veszünk.
A mononukleáris sejteket Ficoll-Paque sűrűséggradiens centrifugálással gyűjtjük össze.
A klasszikus és nem klasszikus monociták populációit áramlási citometriával elemezzük, és a CD172a+ és CD43+ sejtek arányából azonosítjuk.
|
12 hónap
|
|
Makrofág Immunfluoreszcens festés
Időkeret: 0 hónap
|
3 mm-es lyukasztásos biopsziát (RazorMed) veszünk és előkészítünk a paraffinos metszetekhez.
Mind a monociták (klasszikus és nem klasszikus fenotípusok), mind a makrofágok (M1 és M2 fenotípus) populációit és lokalizációját a bőrsérülés helyén a CD68 (makrofág általános markere), anti-iNOS elleni specifikus antitestekkel végzett immunfluoreszcens festéssel határozzuk meg. M1 makrofág), CD206 (M2 makrofág) [32] CD172a (monocita általános markere) és CD43 (nem klasszikus monocita specifikus marker).
|
0 hónap
|
|
Makrofág Immunfluoreszcens festés
Időkeret: 1 hónap
|
3 mm-es lyukasztásos biopsziát (RazorMed) veszünk és előkészítünk a paraffinos metszetekhez.
Mind a monociták (klasszikus és nem klasszikus fenotípusok), mind a makrofágok (M1 és M2 fenotípus) populációit és lokalizációját a bőrsérülés helyén a CD68 (makrofág általános markere), anti-iNOS elleni specifikus antitestekkel végzett immunfluoreszcens festéssel határozzuk meg. M1 makrofág), CD206 (M2 makrofág) [32] CD172a (monocita általános markere) és CD43 (nem klasszikus monocita specifikus marker).
|
1 hónap
|
|
Makrofág Immunfluoreszcens festés
Időkeret: 3 hónap
|
3 mm-es lyukasztásos biopsziát (RazorMed) veszünk és előkészítünk a paraffinos metszetekhez.
Mind a monociták (klasszikus és nem klasszikus fenotípusok), mind a makrofágok (M1 és M2 fenotípus) populációit és lokalizációját a bőrsérülés helyén a CD68 (makrofág általános markere), anti-iNOS elleni specifikus antitestekkel végzett immunfluoreszcens festéssel határozzuk meg. M1 makrofág), CD206 (M2 makrofág) [32] CD172a (monocita általános markere) és CD43 (nem klasszikus monocita specifikus marker).
|
3 hónap
|
|
Makrofág Immunfluoreszcens festés
Időkeret: 6 hónap
|
3 mm-es lyukasztásos biopsziát (RazorMed) veszünk és előkészítünk a paraffinos metszetekhez.
Mind a monociták (klasszikus és nem klasszikus fenotípusok), mind a makrofágok (M1 és M2 fenotípus) populációit és lokalizációját a bőrsérülés helyén a CD68 (makrofág általános markere), anti-iNOS elleni specifikus antitestekkel végzett immunfluoreszcens festéssel határozzuk meg. M1 makrofág), CD206 (M2 makrofág) [32] CD172a (monocita általános markere) és CD43 (nem klasszikus monocita specifikus marker).
|
6 hónap
|
|
Makrofág Immunfluoreszcens festés
Időkeret: 12 hónap
|
3 mm-es lyukasztásos biopsziát (RazorMed) veszünk és előkészítünk a paraffinos metszetekhez.
Mind a monociták (klasszikus és nem klasszikus fenotípusok), mind a makrofágok (M1 és M2 fenotípus) populációit és lokalizációját a bőrsérülés helyén a CD68 (makrofág általános markere), anti-iNOS elleni specifikus antitestekkel végzett immunfluoreszcens festéssel határozzuk meg. M1 makrofág), CD206 (M2 makrofág) [32] CD172a (monocita általános markere) és CD43 (nem klasszikus monocita specifikus marker).
|
12 hónap
|
|
Szabályozó citokinek azonosítása perifériás vér mezenchimális őssejtek (PB-MSC) mobilizálásához
Időkeret: 0 hónap
|
Több időpontban 10 ml perifériás vért gyűjtenek.
Minden perifériás vérmintát K2-EDTA-t tartalmazó csövek segítségével gyűjtenek.
A vérmintákat 1800 g-vel centrifugáljuk 6 percig 4 °C-on, hogy plazmát kapjunk, majd 1 ml-es alikvot részekre osztjuk, és -80 °C-on tároljuk.
A differenciális fehérje expressziót 8-plex izobár címkékkel határozzuk meg a relatív és abszolút kvantitatív (iTRAQ) alapú kvantitatív proteomikai analízishez.
|
0 hónap
|
|
Szabályozó citokinek azonosítása perifériás vér mezenchimális őssejtek (PB-MSC) mobilizálásához
Időkeret: 1 hónap
|
Több időpontban 10 ml perifériás vért gyűjtenek.
Minden perifériás vérmintát K2-EDTA-t tartalmazó csövek segítségével gyűjtenek.
A vérmintákat 1800 g-vel centrifugáljuk 6 percig 4 °C-on, hogy plazmát kapjunk, és 1 ml-es alikvot részekre osztjuk, és -80 °C-on tároljuk.
A differenciális fehérje expressziót 8-plex izobár címkékkel határozzuk meg a relatív és abszolút kvantitatív (iTRAQ) alapú kvantitatív proteomikai analízishez.
|
1 hónap
|
|
Szabályozó citokinek azonosítása perifériás vér mezenchimális őssejtek (PB-MSC) mobilizálásához
Időkeret: 3 hónap
|
Több időpontban 10 ml perifériás vért gyűjtenek.
Minden perifériás vérmintát K2-EDTA-t tartalmazó csövek segítségével gyűjtenek.
A vérmintákat 1800 g-vel centrifugáljuk 6 percig 4 °C-on, hogy plazmát kapjunk, és 1 ml-es alikvot részekre osztjuk, és -80 °C-on tároljuk.
A differenciális fehérje expressziót 8-plex izobár címkékkel határozzuk meg a relatív és abszolút kvantitatív (iTRAQ) alapú kvantitatív proteomikai analízishez.
|
3 hónap
|
|
Szabályozó citokinek azonosítása perifériás vér mezenchimális őssejtek (PB-MSC) mobilizálásához
Időkeret: 6 hónap
|
Több időpontban 10 ml perifériás vért gyűjtenek.
Minden perifériás vérmintát K2-EDTA-t tartalmazó csövek segítségével gyűjtenek.
A vérmintákat 1800 g-vel centrifugáljuk 6 percig 4 °C-on, hogy plazmát kapjunk, majd 1 ml-es alikvot részekre osztjuk, és -80 °C-on tároljuk.
A differenciális fehérje expressziót 8-plex izobár címkékkel határozzuk meg a relatív és abszolút kvantitatív (iTRAQ) alapú kvantitatív proteomikai analízishez.
|
6 hónap
|
|
Szabályozó citokinek azonosítása perifériás vér mezenchimális őssejtek (PB-MSC) mobilizálásához
Időkeret: 12 hónap
|
Több időpontban 10 ml perifériás vért gyűjtenek.
Minden perifériás vérmintát K2-EDTA-t tartalmazó csövek segítségével gyűjtenek.
A vérmintákat 1800 g-vel centrifugáljuk 6 percig 4 °C-on, hogy plazmát kapjunk, majd 1 ml-es alikvot részekre osztjuk, és -80 °C-on tároljuk.
A differenciális fehérje expressziót 8-plex izobár címkékkel határozzuk meg a relatív és abszolút kvantitatív (iTRAQ) alapú kvantitatív proteomikai analízishez.
|
12 hónap
|
Együttműködők és nyomozók
Itt találhatja meg a tanulmányban érintett személyeket és szervezeteket.
Szponzor
Tanulmányi rekorddátumok
Ezek a dátumok nyomon követik a ClinicalTrials.gov webhelyre benyújtott vizsgálati rekordok és összefoglaló eredmények benyújtásának folyamatát. A vizsgálati feljegyzéseket és a jelentett eredményeket a Nemzeti Orvostudományi Könyvtár (NLM) felülvizsgálja, hogy megbizonyosodjon arról, hogy megfelelnek-e az adott minőség-ellenőrzési szabványoknak, mielőtt közzéteszik őket a nyilvános weboldalon.
Tanulmány főbb dátumok
Tanulmány kezdete (Várható)
2023. december 1.
Elsődleges befejezés (Várható)
2026. január 31.
A tanulmány befejezése (Várható)
2026. január 31.
Tanulmányi regisztráció dátumai
Először benyújtva
2022. október 13.
Először nyújtották be, amely megfelel a minőségbiztosítási kritériumoknak
2023. január 20.
Első közzététel (Becslés)
2023. január 30.
Tanulmányi rekordok frissítései
Utolsó frissítés közzétéve (Becslés)
2023. január 30.
Az utolsó frissítés elküldve, amely megfelel a minőségbiztosítási kritériumoknak
2023. január 20.
Utolsó ellenőrzés
2023. január 1.
Több információ
A tanulmányhoz kapcsolódó kifejezések
További vonatkozó MeSH feltételek
Egyéb vizsgálati azonosító számok
- TTTFootUlcers
Gyógyszer- és eszközinformációk, tanulmányi dokumentumok
Egy amerikai FDA által szabályozott gyógyszerkészítményt tanulmányoz
Nem
Egy amerikai FDA által szabályozott eszközterméket tanulmányoz
Nem
Ezt az információt közvetlenül a clinicaltrials.gov webhelyről szereztük be, változtatás nélkül. Ha bármilyen kérése van vizsgálati adatainak módosítására, eltávolítására vagy frissítésére, kérjük, írjon a következő címre: register@clinicaltrials.gov. Amint a változás bevezetésre kerül a clinicaltrials.gov oldalon, ez a webhelyünkön is automatikusan frissül. .