Verihiutaleita jäljittelevien nanohiukkasten vaikutukset potilailla, joilla on kirroosi (HEMCITAP)

Maksakirroosiin liittyy hemostaattisen tasapainon muutos (primaarinen hemostaasi, koagulaatio, fibrinolyysi). Mitä tulee primaariseen hemostaasiin, trombosytopenia on yleensä kohtalainen, mikä johtuu portaalihypertensioon liittyvästä pernan tai maksan sekvestraatiosta. Myös verihiutaleiden synteesi vähenee. On myös autoimmuunista trombosytopeniaa, joka johtuu verihiutaleiden vastaisten autovasta-aineiden esiintymisestä. Lisäksi esiintyy trombopatiaa, johon liittyy toiminnallisia muutoksia verihiutaleiden kiinnittymisessä ja aggregaatiossa. Samanaikaisesti näiden verihiutaleiden adheesion ja aggregaation poikkeavuuksien kanssa Von Willebrand -tekijän (VWF) tason määrällinen nousu säilyttää verihiutaleiden aggregaatiokapasiteetin jopa kiertovirtauksen olosuhteissa huolimatta VWF:n sisäisen toimintakapasiteetin vähenemisestä. Tämä lisääntyminen voidaan selittää maksan lisääntyneellä synteesillä, suuremmalla endoteelin pinta-alalla kollateraalisen verenkierron läsnä ollessa ja toistuvalla endoteelin aggressiolla endotoksimian vuoksi infektioiden aikana sekä puhdistuman vähenemisellä, joka johtuu ADAMTS13:n synteesin vähenemisestä.

Primaarisen hemostaasin poikkeavuuksien rutiinitutkimus perustuu lähes yksinomaan verihiutaleiden määrään sekä plasman VWF- ja ADAMTS13-määrityksiin. Funktionaaliset verihiutaletestit (PFA®, impedanssiaggregometria, valonläpäisyaggregaatio) ovat vaikeampia suorittaa, erityisesti trombosytopenian tapauksessa, eikä niitä tehdä kiertovirtausolosuhteissa. Total Thrombus Formation Analysis System (T-TAS®01) mahdollistaa hemostaattisen kapasiteetin analysoinnin kokoveressä ja virtausolosuhteissa. Kokoveri talletetaan säiliöön ja perfusoidaan sitten tyypin I kollageenipäällysteiselle sirulle (PL-siru) leikkausnopeudella 1500 s-1, mikä jäljittelee veren virtausta pienissä valtimoissa. Kun hyytymä muodostuu, paine perfuusiokammiossa kasvaa, kunnes tapahtuu täydellinen okkluusio. Mitatut parametrit ovat:

• aika, joka tarvitaan paineen saavuttamiseen perfuusiokammiossa, joka on 10 kilopascalia (kPa) peruspaineen yläpuolella,
• aika, joka tarvitaan saavuttamaan 60 kPa peruspaine infuusiokammiossa (okkluusioaika)
• käyrän alla oleva pinta-ala 10 min kohdalla. Kirroosipotilaiden perioperatiivinen hoito saa kliinikon esittämään kysymyksen profylaktisesta verihiutaleiden siirrosta, jos trombosytopenia on alle 30-50 G/l. Vaikka tämä kynnysarvo perustuu vähäiseen näyttöön, verihiutaleiden siirrolla on huono suorituskyky kirroosipotilailla, eikä se ole ilman sivuvaikutuksia. Siksi ennaltaehkäisevää verihiutaleiden siirtoa ei suositella. Verenvuototapauksissa hoidon tulee koostua verihiutaleiden siirrosta, johon on yhdistetty fibrinogeenia ja antifibrinolyyttistä antoa. Synteettiset verihiutaleita jäljittelevät hiukkaset (SP:t) on valmistettu liposomaalisesta kalvosta ja "koristeltu" kolmella eri peptidillä: kollageenia sitova peptidi (CBP), joka sitoutuu subendoteelissa paljastettuun fibrillaariseen kollageeniin, fibrinogeeniä jäljittelevä peptidi (FMP), joka voi sitoutua. verihiutaleintegriinin aIIbp3 aktiiviseen muotoon ja VWF:ää sitovaan peptidiin (VBP), joka on peräisin tekijä VIII:n C2-domeenista ja voi sitoutua VWF:n D'-D3-domeeniin.

Ex vivo, endoteelivaurion puuttuessa, nämä SP:t eivät indusoi verihiutaleiden aggregaatiota agonistin puuttuessa, vaan tehostavat aggregaatiota agonistin läsnä ollessa. Nämä SP:t eivät laukaise trombiinin muodostumista itsestään, mutta kudostekijän läsnä ollessa SP:t lisäävät trombiinin muodostumista ja fibriinin muodostumista. Perfuusiokammioissa nämä nanopartikkelit mahdollistavat verihiutaleiden kiinnittymisen kollageenilla päällystettyyn pintaan ja aggregoitua keskenään. In vivo SP:t tekevät yhteistyötä verihiutaleiden kanssa tehokkaan hemostaasin palauttamiseksi trombosytopeenisissa hiirissä, joille tehdään häntäleikkaus. Niiden hemostaattinen teho on myös osoitettu erilaisissa traumaattisten vaurioiden eläinmalleissa, mukaan lukien maksan repeämän hiirimalli, traumaattisen valtimoverenvuotojen sian malli ja maksan resektion jyrsijämalli.

Tämän tutkimuksen oletuksena on, että T-TAS®01-järjestelmän infuusioiden ominaisuudet muuttuvat kirroosipotilailla, mikä heijastaa primaarisen hemostaasin heikkenemistä, verrattuna kontrollipotilaisiin, ja että verihiutaleita jäljittelevät nanohiukkaset (PMN:t) korjaavat nämä muutokset.