Effetti delle nanoparticelle che mimano le piastrine in pazienti con cirrosi (HEMCITAP)

La cirrosi epatica è accompagnata da un'alterazione dell'equilibrio emostatico (emostasi primaria, coagulazione, fibrinolisi). Per quanto riguarda l'emostasi primaria, la trombocitopenia è solitamente moderata, dovuta al sequestro splenico o epatico associato all'ipertensione portale. Anche la sintesi piastrinica è ridotta. Esistono anche trombocitopenie autoimmuni dovute alla presenza di autoanticorpi antipiastrinici. Inoltre è presente una trombopatia con alterazioni funzionali dell'adesione e dell'aggregazione piastrinica. Parallelamente a queste anomalie nell'adesione e nell'aggregazione piastrinica, l'aumento quantitativo del livello del fattore di Von Willebrand (VWF) preserva la capacità di aggregazione piastrinica, anche in condizioni di flusso circolante, nonostante la riduzione della capacità funzionale intrinseca del VWF. Questo aumento può essere spiegato da un aumento della sintesi epatica, da una maggiore superficie endoteliale in presenza di circoli collaterali e da ripetute aggressioni endoteliali da parte di endotossimia durante le infezioni, nonché da una diminuzione della clearance dovuta a una diminuzione della sintesi di ADAMTS13.

L'indagine di routine delle anomalie nell'emostasi primaria si basa quasi esclusivamente sulla conta piastrinica, nonché sui test plasmatici del VWF e dell'ADAMTS13. I test funzionali piastrinici (PFA®, impedenziometria, aggregazione della trasmissione luminosa) sono più difficili da eseguire, soprattutto in caso di trombocitopenia, e non vengono eseguiti in condizioni di flusso circolatorio. Il sistema di analisi della formazione di trombi totali (T-TAS®01) consente l'analisi della capacità emostatica nel sangue intero e in condizioni di flusso. Il sangue intero viene depositato in un serbatoio e quindi perfuso su un chip rivestito di collagene di tipo I (chip PL) a una velocità di taglio di 1500 s-1, imitando il flusso sanguigno nelle piccole arterie. Man mano che si forma il coagulo, la pressione nella camera di perfusione aumenta fino all'occlusione totale. I parametri misurati sono:

• il tempo necessario per raggiungere una pressione all'interno della camera di perfusione pari a 10 kilopascal (kPa) al di sopra della pressione basale,
• il tempo necessario per raggiungere una pressione di 60 kPa superiore alla pressione di base nella camera di infusione (tempo di occlusione)
• l'area sotto la curva a 10 min. La gestione perioperatoria dei pazienti cirrotici porta il medico a porsi la questione della trasfusione profilattica di piastrine in caso di trombocitopenia inferiore a 30-50 G/L. Sebbene questo valore soglia sia basato su un basso livello di evidenza, la trasfusione di piastrine ha una scarsa performance nei pazienti cirrotici e non è priva di effetti collaterali. Pertanto, la trasfusione piastrinica preventiva non è raccomandata. In caso di sanguinamento, la gestione dovrebbe consistere nella trasfusione di piastrine, combinata con la somministrazione di fibrinogeno e antifibrinolitici. Le particelle sintetiche che mimano le piastrine (SP) sono costituite da una membrana liposomiale e "decorate" con 3 diversi peptidi: peptide legante il collagene (CBP), che si lega al collagene fibrillare esposto nel subendotelio, peptide mimetico del fibrinogeno (FMP), che può legarsi alla forma attiva dell'integrina piastrinica αIIbβ3 e del peptide legante il VWF (VBP), che deriva dal dominio C2 del fattore VIII e può legarsi al dominio D'-D3 del VWF.

Ex vivo, in assenza di danno endoteliale, questi SP non inducono aggregazione piastrinica in assenza di agonista ma migliorano l'aggregazione in presenza di agonista. Questi SP non innescano di per sé la formazione di trombina ma, in presenza di SP, i fattori tissutali aumentano la generazione di trombina e la formazione di fibrina. Nelle camere di perfusione, queste nanoparticelle consentono alle piastrine di aderire ad una superficie rivestita di collagene e di aggregarsi tra loro. In vivo, gli SP collaborano con le piastrine per ripristinare un'emostasi efficace nei topi trombocitopenici sottoposti a taglio della coda. La loro efficacia emostatica è stata dimostrata anche in vari modelli animali di lesioni traumatiche, tra cui un modello murino di lacerazione epatica, un modello suino di emorragia arteriosa traumatica e un modello di roditore di resezione epatica.

Il presupposto di questo studio è che le caratteristiche delle infusioni con il sistema T-TAS®01 saranno alterate nei pazienti cirrotici, riflettendo la compromissione dell'emostasi primaria, rispetto ai pazienti di controllo e che le nanoparticelle mimanti piastriniche (PMN) correggeranno queste alterazioni.