Suoliston synnynnäinen immuunijärjestelmä vastasyntyneillä. Kehitys ja tulehdus terveydessä ja sairaudessa (INTINE)

1. NEC-tutkimus 1.1. Sisällyttämiskriteerit Ennenaikaiset lapset, jotka ovat syntyneet < GA viikolla 32. Mukaan otettava kokonaismäärä on 200 1.2. Poissulkemiskriteerit Ennenaikaiset synnynnäiset sairaudet tai muut vakavat sairaudet voivat viivästyttää osallistumista.

Tilanteet, joissa kudoksen kerääminen leikkauksessa on mahdotonta tai ongelmallista esim. elintärkeän suolen jäljellä olevan pituuden vuoksi arvioidaan liian lyhyiksi leikkauskirurgin harkinnan mukaan.

1.3. Tutkimuksen suunnittelu Vauvat otetaan mukaan heti syntymän jälkeen saatuaan suostumuksen kirjallisen ja suullisen tiedon perusteella. Ulostenäytteitä kerätään ensimmäisestä elämänpäivästä alkaen ja viikoittain seuraavien viikkojen ajan kotiuttamiseen saakka ulosteen mikrobiomin koostumuksen tutkimiseksi suhteessa NEC:n kehittymiseen ja lääkehoidon vaikutukseen.

Jos NEC kehittyy ja vaatii leikkausta, sairastunut suolisto leikataan ja perustetaan avanne. Näytteitä ulostesisällöstä ja kudoksesta kerätään suolesta proksimaalisesta ja distaalisesta jakautuneesta suolesta. Avanneen käänteessä kudosta kerätään sekä proksimaalisesta että distaalisesta jakautumisesta, jotta voidaan tutkia suolen kehitystä varhaisessa iässä sekä mahdollisia ravitsemuksellisia vaikutuksia suolen kypsyyteen. Verrokkina toimivat lapset, joille ei tehdä leikkausta, ja ne, joita hoidetaan NEC:n takia vain antibiooteilla, sisällytetään osa-analyysiin, jossa verrataan leikkausta tarvitsevien pikkulasten mikrobiomia.

1.4. Näytteenotto 1.4.1. Ulostenäytteet Ulostenäytteet otetaan mahdollisimman pian syntymän jälkeen ja kerran viikossa kotiutumiseen saakka. Ulosteet kaavitaan pois vaipasta heti, kun tämä ilmaantuu. Määrän tulee vastata kynttä. Kussakin vaiheessa otetaan kaksi näytettä. Kasvot säilytetään sopivassa putkessa, keräyksen jälkeen sisältö sekoitetaan puskurin (suolaliuoksen) kanssa 1:2 ennen jäädyttämistä -600 asteeseen. Ulostepitoisuus kerätään primaarisessa leikkauksessa ja avanneen käänteessä, näytteet valmistetaan samalla tavalla.

1.4.2. Suolistonäytteet Leikkauksessa otetaan kudosnäyte resektoidun suolen proksimaalisesta ja distaalisesta päästä sekä jäännössuolesta ja pakastetaan välittömästi keräyksen jälkeen ja säilytetään -800 C:ssa. Jotta voimme kerätä mahdollisimman monta kudosnäytteitä, strategiamme on pikapakastettava vähintään 4 näytettä (noin 1 cm2) resektoidusta kudoksesta; 2 terveestä kohdasta ja 2 sairaasta suolen kohdasta. Yksi tai useampi näyte valmistetaan tuoretta analyysiä varten DTU:ssa (vain Rigshospitaletin pikkulapsilta). Avannetta käytettäessä kudos otetaan avanteen kohdasta ja poikkeavan suolen proksimaalisesta päästä. Kaikki kudokset siirretään OPENin isännöimään biopankkiin Odensen yliopistollisessa sairaalassa.

1.5. Tulokset 1.5.1. Ensisijainen Tutkia mikrobiotan roolia NEC:n kehittymisessä ja siihen liittyviä muutoksia suoliston immuunijärjestelmässä leikattavilla 1.5.2. Toissijainen: Demografiset tiedot, kuten GA, BW, syntymätyyppi ja Apgar-pisteet Kliiniset: Kasvu, ravitsemustyyppi, TPN-päivien lukumäärä, keskuslaskimokatetrilla käytettyjen päivien lukumäärä ja lääkehoito. 1.6. Tiedot ja suostumus Joko imeväisten ja pikkulasten teho-osastolle, Rigshospitaletille tai OUH:n neonatologian osastolle, otetut keskoset tutkitaan kelpoisuusseulonnan varalta. Tarvittavat tiedot luovutetaan tutkijoille. Osallistumiskriteerit täyttävien lasten vanhempia lähestytään ja heille kerrotaan hankkeesta ja pyydetään osallistumaan tutkimukseen ja heidän tietoon perustuvaa kirjallista suostumustaan. Vanhempien suostumus tutkimukseen osallistumiseen on dokumentoitava potilaan sähköiseen potilaskertomukseen. Tietoinen suostumus on hankittava ennen näytteiden keräämistä projektia varten. Vanhemmat voivat halutessaan ottaa käyttöön sivullisen henkilökunnan joukosta, jolla ei ole suoraa yhteyttä tutkimusprojektiin, ja heillä on myös mahdollisuus ottaa mukaan arvioija. Tutkimusta koskevien kirjallisten ja suullisten tietojen lisäksi VEK:n kirjanen "Før du beslutter dig: Om at være forsøgsperson i sundhedsvidenskabelige forsøg" sekä esite "Forsøgspersonens rettigheder i et sundhedsvidenskabeligt forsøg" toimitetaan vanhemmille. Jos vanhemmat suostuvat, he saavat kopion tietoon perustuvasta suostumuslomakkeesta.

Mikäli mahdollista, tarjotaan 24 tunnin harkinta-aikaa ennen tietoisen suostumuksen allekirjoittamista, jolloin sovitaan uusi tapaaminen (seulonta). Jos osallistujat eivät vaadi harkinta-aikaa, tietoon perustuvan suostumusilmoituksen voi allekirjoittaa välittömästi tiedotustilaisuuden jälkeen osallistujan äiti tai osallistujan ja tutkijan vanhemmat (tai tutkimusryhmä, jolle tutkija on antanut tämän vastuun) . Kun tietoinen suostumus on allekirjoitettu, osallistujalle tarjotaan kopio. Allekirjoitettu tietoinen suostumus on edellytys seulonnan tai tutkimukseen liittyvien toimenpiteiden aloittamiselle.

1. Atresia-tutkimus 1.1. Inkluusio Kaikille vastasyntyneille ja alle 1-vuotiaille lapsille on tehtävä suolistoleikkaus atresian vuoksi missä tahansa suolen kohdassa. Mukaan odotetaan yhteensä 75 potilasta.

1.2. Poissulkeminen Imeväisille ja lapsille suoliston kudosnäytteiden otto vaarantaisi leikkauksen ja potilaan terveyden.

1.3. Study Design Vauvoille, joilla on synnynnäisiä epämuodostumia, on tehtävä määräaikainen leikkaus suolen vahingoittuneen alueen resektioon ja/tai anastomointiin, ja jotkut saavat avanneen, joka on myöhemmin korjattava. Primaarisessa leikkauksessa ulostenäytteet ja suolistokudos kerätään patologian proksimaalisesta ja distaalisesta kohdasta. Avannetapauksissa ja kun lapselle tehdään myöhempi palautusleikkaus, suolen proksimaalisista ja distaalisista päistä otetaan kudosnäytteitä yhdessä ulostenäytteiden kanssa.

1.4. Näytteenotto 1.4.1. Ulostenäytteet Ulostenäytteet otetaan mahdollisimman pian perusleikkauksen jälkeen ja kerran viikossa kotiutukseen saakka. Ulosteet kaavitaan vaipasta heti, kun se ilmenee. Määrän tulee vastata kynttä. Kussakin vaiheessa otetaan kaksi näytettä. Ulosteet varastoidaan sopivaan putkeen, keräyksen jälkeen sisältö sekoitetaan puskurin (suolaliuos) kanssa 1:2 ennen jäädyttämistä -600 astetta C. Ulostepitoisuus kerätään primaarisessa leikkauksessa ja avanneen käänteessä, näytteet valmistetaan samalla tavalla.

1.4.2. Suolistonäytteet Leikkauksessa otetaan 2 tai useampi kudosnäytettä proksimaalisesta ja distaalisesta suolesta. Jotta voisimme kerätä mahdollisimman monta kudosnäytettä, strategiamme on snap-jäädyttää vähintään 4 näytettä (noin 1 cm2) leikatusta kudoksesta. 2 proksimaalisesta ja distaalisesta osasta, vastaavasti. Yksi tai useampi näyte valmistetaan tuoretta analyysiä varten DTU:ssa (vain vauvoista Rigshospitaletissa). Sama toimenpide suoritetaan avanneen käänteessä. Kaikki kudokset siirretään tutkimuksen päätyttyä OPENin isännöimään biopankkiin Odensen yliopistollisessa sairaalassa.

1.5. Tulokset: 1.5.1. Suoliston immuunijärjestelmän primaarinen muodostuminen ja kehittyminen sekä suoliston bakteerien kolonisaatio ajan myötä 1.5.2. Toissijaiset demografiset tiedot, kuten GA, BW, syntymätyyppi ja Apgar-pisteet Kliiniset: kasvu, ravitsemustyyppi, lääkehoito ja taudin kulku. 1.6. Tiedot ja suostumus Lapsille, joilla on synnynnäinen maha-suolikanavan epämuodostuma, joka tarvitsee leikkausta, tutkitaan kelpoisuus. Tarvittavat tiedot luovutetaan tutkijoille. Osallistumiskriteerit täyttävien lasten vanhempia lähestytään ja heille kerrotaan hankkeesta ja pyydetään osallistumaan tutkimukseen ja heidän tietoon perustuvaa kirjallista suostumustaan. Vanhempien suostumus tutkimukseen osallistumiseen on dokumentoitava potilaan sähköiseen potilaskertomukseen. Tietoinen suostumus on hankittava ennen näytteiden keräämistä projektia varten. Kirjalliset ja suulliset tiedot antavat joko Imeväisten ja pikkulasten tehohoidon osasto, Rigshospitalet, Lastenkirurgian laitos, Rigshospitalet, Lastenkirurgian osasto, OUH tai neonatologian laitos, OUH. Perhe voi halutessaan ottaa käyttöön sivullisen henkilökunnan joukosta, jolla ei ole suoraa yhteyttä tutkimusprojektiin, ja heille tarjotaan myös mahdollisuus ottaa mukaan arvioija. Tutkimukseen liittyvien kirjallisten ja suullisten tietojen lisäksi pyydetään VEK:n pamfletti "Før du beslutter dig: Om at være forsøgsperson i sundhedsvidenskabelige forsøg" sekä esite "Forsøgspersonens rettigheder i et sundhedsvidenskabeligt toimitetaan vanhemmille". Jos vanhemmat suostuvat, he saavat kopion tietoon perustuvasta suostumuslomakkeesta.

Leikkauksen odotusaikana tarjotaan mahdollisuuksien mukaan muutaman tunnin harkinta-aikaa ennen tietoisen suostumuksen allekirjoittamista. Jos osallistujat eivät vaadi harkinta-aikaa, tietoon perustuvan suostumusilmoituksen voi allekirjoittaa välittömästi tiedotustilaisuuden jälkeen osallistujan äiti tai osallistujan ja tutkijan vanhemmat (tai tutkimusryhmä, jolle tutkija on antanut tämän vastuun) . Kun tietoinen suostumus on allekirjoitettu, osallistujalle tarjotaan kopio. Allekirjoitettu tietoinen suostumus on edellytys tutkimukseen liittyvien toimenpiteiden alkamiselle.