Das intestinale angeborene Immunsystem bei Neugeborenen. Entwicklung und Entzündung in Gesundheit und Krankheit (INTINE)

1. NEC-Studie 1.1. Einschlusskriterien Frühgeborene, die < GA Woche 32 geboren wurden. Die einzubeziehende Gesamtzahl beträgt 200 1.2. Ausschlusskriterien Frühgeborene mit angeborenen Krankheiten oder anderen schwerwiegenden Erkrankungen können die Teilnahme verzögern.

Situationen, in denen die Gewebeentnahme bei einer Operation unmöglich oder problematisch ist, z. B. aufgrund der Restlänge des lebenswichtigen Darms werden nach Ermessen des Operateurs als zu kurz bewertet.

1.3. Studiendesign: Säuglinge werden unmittelbar nach der Geburt eingeschlossen, nachdem ihre Einwilligung auf der Grundlage schriftlicher und mündlicher Informationen eingeholt wurde. Vom ersten Lebenstag an und wöchentlich bis zur Entlassung werden Stuhlproben entnommen, um die Zusammensetzung des Stuhlmikrobioms im Zusammenhang mit der Entwicklung von NEC und der Wirkung einer medikamentösen Therapie zu untersuchen.

Im Falle der Entwicklung einer NEC mit der Notwendigkeit einer Operation wird der betroffene Darm reseziert und Stomata angelegt. Proben von Stuhlinhalt und Gewebe werden aus dem Darm proximal und distal des geteilten Darms entnommen. Zum Zeitpunkt der Stomaumkehr wird das Gewebe sowohl proximal als auch distal der Teilung entnommen, um die Entwicklung des Darms im frühen Leben sowie mögliche Auswirkungen der Ernährung auf die Darmreife zu untersuchen. Säuglinge, die sich keiner Operation unterziehen, dienen als Kontrollen. Säuglinge, deren NEC nur mit Antibiotika behandelt wird, werden in eine Unteranalyse einbezogen, in der das Mikrobiom von Säuglingen verglichen wird, die operiert werden müssen.

1.4. Probenahme 1.4.1. Stuhlproben: Stuhlproben werden so bald wie möglich nach der Geburt und einmal wöchentlich bis zur Entlassung entnommen. Sobald dieser auftritt, wird der Kot von der Windel abgekratzt. Die Menge muss einem Fingernagel entsprechen. Zu jedem Zeitpunkt werden zwei Proben entnommen. Die Gesichter werden in einem geeigneten Röhrchen aufbewahrt. Nach der Entnahme wird der Inhalt mit einem Puffer (Kochsalzlösung) im Verhältnis 1:2 gemischt, bevor er bei -600 °C eingefroren wird. Der Fäkalieninhalt wird bei der Primäroperation und bei der Stomaumkehr gesammelt und die Proben werden auf ähnliche Weise vorbereitet.

1.4.2. Darmproben Bei der Operation wird eine Gewebeprobe vom proximalen und distalen Ende des resezierten Darms und des Restdarms entnommen und unmittelbar nach der Entnahme eingefroren und bei -800 °C gelagert. Unsere Strategie besteht darin, so viele Gewebeproben wie möglich sammeln zu können besteht darin, mindestens 4 Proben (ca. 1 cm2) des resezierten Gewebes schnell einzufrieren; 2 von der gesunden und 2 von der erkrankten Darmstelle. Eine oder mehrere Proben werden für eine frische Analyse an der DTU vorbereitet (nur von Säuglingen aus dem Rigshospitalet). Bei der Stomaumkehr wird Gewebe aus der Stomastelle und dem proximalen Ende des umgeleiteten Darms entnommen. Das gesamte Gewebe wird an eine von OPEN gehostete Biobank im Universitätskrankenhaus Odense übertragen.

1.5. Ergebnisse 1.5.1. Primäre Untersuchung der Rolle der Mikrobiota bei der Entwicklung von NEC und den damit verbundenen Veränderungen im Darmimmunsystem bei Patienten, die operiert werden 1.5.2. Sekundär: Demografische Daten wie GA, BW, Art der Geburt und Apgar-Score. Klinisch: Wachstum, Art der Ernährung, Anzahl der Tage mit TPN, Anzahl der Tage mit zentralem Venenkatheter und medizinische Behandlung. 1.6. Informationen und Einwilligung Frühgeborene, die entweder in der Abteilung für Intensivpflege für Säuglinge und Kleinkinder des Rigshospitalet oder in der Abteilung für Neonatologie der OUH aufgenommen werden, werden auf ihre Eignung überprüft. Die notwendigen Informationen werden den Forschern übergeben. Für Kinder, die die Einschlusskriterien erfüllen, werden die Eltern angesprochen und über das Projekt informiert und um Teilnahme an der Studie und ihre schriftliche Einwilligung gebeten. Das Einverständnis der Eltern zur Teilnahme an der Studie muss in der elektronischen Krankenakte des Patienten dokumentiert werden. Vor der Entnahme von Proben für das Projekt muss eine Einverständniserklärung eingeholt werden. Auf Wunsch der Eltern steht ihnen eine Begleitperson aus dem Personalbereich zur Verfügung, die keinen direkten Bezug zum Forschungsprojekt hat, und es besteht die Möglichkeit, einen Gutachter mitzubringen. Neben schriftlichen und mündlichen Informationen über die Studie wird den Eltern die Broschüre „Før du beslutter dig: Om at være forsøgsperson i sundhedsvidenskabelige forsøg“ von VEK zusammen mit der Broschüre „Forsøgspersonens rettigheder i et sundhedsvidenskabeligt forskningsprojekt“ ausgehändigt. Wenn die Eltern einverstanden sind, erhalten sie eine Kopie der Einverständniserklärung.

Wenn möglich, wird vor der Unterzeichnung der Einverständniserklärung eine Bedenkzeit von 24 Stunden angeboten. In diesem Fall wird ein neues Treffen (das Screening) vereinbart. Wenn die Teilnehmer keine Bedenkzeit benötigen, kann die Einverständniserklärung unmittelbar nach dem Informationsgespräch von der Mutter des Teilnehmers oder den Eltern des Teilnehmers und des Prüfers (oder des Forschungsteams, dem diese Verantwortung vom Prüfer übertragen wurde) unterzeichnet werden. . Wenn die Einverständniserklärung unterzeichnet ist, wird dem Teilnehmer eine Kopie angeboten. Eine unterschriebene Einverständniserklärung ist Voraussetzung für den Beginn des Screenings oder studienbezogener Verfahren.

1. Atresie-Studie 1.1. Einschluss Alle Neugeborenen und Kinder bis zu einem Jahr müssen sich aufgrund einer Atresie an einer beliebigen Stelle des Darms einer Darmoperation unterziehen. Es wird mit einem Einschluss von insgesamt 75 Patienten gerechnet.

1.2. Ausschluss Bei Säuglingen und Kindern würde die Entnahme von Darmgewebe die Operation und die Gesundheit des Patienten gefährden.

1.3. Studiendesign Säuglinge mit angeborenen Fehlbildungen müssen sich einer geplanten Operation unterziehen, um den betroffenen Darmbereich zu resezieren und/oder zu anastomosieren, und einige erhalten ein Stoma, das später entfernt werden muss. Bei der primären Operation werden Stuhlproben und Darmgewebe proximal und distal der Pathologie entnommen. In Fällen mit einem Stoma und wenn sich das Kind später einer Umkehroperation unterziehen muss, werden Gewebeproben vom proximalen und distalen Ende des Darms zusammen mit Stuhlproben entnommen.

1.4. Probenahme 1.4.1. Stuhlproben: Stuhlproben werden so schnell wie möglich nach der ersten Operation und einmal wöchentlich bis zur Entlassung entnommen. Sobald dieser auftritt, wird der Kot von der Windel abgekratzt. Die Menge muss einem Fingernagel entsprechen. Zu jedem Zeitpunkt werden zwei Proben entnommen. Der Kot wird in einem geeigneten Röhrchen aufbewahrt. Nach der Entnahme wird der Inhalt mit einem Puffer (Kochsalzlösung) im Verhältnis 1:2 gemischt, bevor er bei -600 °C eingefroren wird. Der Kotinhalt wird bei der Erstoperation und bei der Stomaumkehr gesammelt und die Proben werden auf ähnliche Weise vorbereitet.

1.4.2. Darmproben Bei der Operation werden 2 oder mehr Gewebeproben aus dem proximalen und distalen Darm entnommen. Um so viele Gewebeproben wie möglich sammeln zu können, besteht unsere Strategie darin, mindestens 4 Proben (ungefähr 1 cm2) des resezierten Gewebes schnell einzufrieren; 2 vom proximalen bzw. distalen Teil. Eine oder mehrere Proben werden für eine frische Analyse an der DTU vorbereitet (nur von Säuglingen im Rigshospitalet). Das gleiche Verfahren wird bei der Stomaumkehr durchgeführt. Das gesamte Gewebe wird nach Abschluss der Studie an eine von OPEN im Universitätskrankenhaus Odense gehostete Biobank übertragen.

1.5. Ergebnisse: 1.5.1. Primärer Aufbau und Entwicklung des intestinalen Immunsystems und Darmbakterienbesiedlung im Laufe der Zeit 1.5.2. Sekundäre demografische Daten wie GA, BW, Geburtsart und Apgar-Score. Klinisch: Wachstum, Art der Ernährung, medizinische Behandlung und Krankheitsverlauf. 1.6. Informationen und Einwilligung Säuglinge, die mit einer angeborenen Fehlbildung im Magen-Darm-Trakt geboren wurden, die operiert werden muss, werden auf ihre Eignung untersucht. Die notwendigen Informationen werden den Forschern übergeben. Für Kinder, die die Einschlusskriterien erfüllen, werden die Eltern angesprochen und über das Projekt informiert und um Teilnahme an der Studie und ihre schriftliche Einwilligung gebeten. Das Einverständnis der Eltern zur Teilnahme an der Studie muss in der elektronischen Krankenakte des Patienten dokumentiert werden. Vor der Entnahme von Proben für das Projekt muss eine Einverständniserklärung eingeholt werden. Die schriftliche und mündliche Aufklärung erfolgt durch Mitarbeiter der Abteilung für Intensivpflege für Säuglinge und Kleinkinder, Rigshospitalet, Abteilung für Kinderchirurgie, Rigshospitalet, Abteilung für Kinderchirurgie, OUH oder die Abteilung für Neonatologie, OUH. Wenn die Familie dies wünscht, kann sie Zugang zu einer Begleitperson aus dem Personalbereich erhalten, die keinen direkten Bezug zum Forschungsprojekt hat, und es wird ihr auch die Möglichkeit gegeben, einen Gutachter mitzubringen. Neben schriftlichen und mündlichen Informationen über die Studie wird den Eltern die Broschüre „Før du beslutter dig: Om at være forsøgsperson i sundhedsvidenskabelige forsøg“ von VEK zusammen mit der Broschüre „Forsøgspersonens rettigheder i et sundhedsvidenskabeligt forskningsprojekt“ ausgehändigt. Wenn die Eltern einverstanden sind, erhalten sie eine Kopie der Einverständniserklärung.

Wenn möglich, wird vor der Unterzeichnung der Einverständniserklärung eine Bedenkzeit von einigen Stunden während der Wartezeit auf die Operation angeboten. Wenn die Teilnehmer keine Bedenkzeit benötigen, kann die Einverständniserklärung unmittelbar nach dem Informationsgespräch von der Mutter des Teilnehmers oder den Eltern des Teilnehmers und des Prüfers (oder des Forschungsteams, dem diese Verantwortung vom Prüfer übertragen wurde) unterzeichnet werden. . Wenn die Einverständniserklärung unterzeichnet ist, wird dem Teilnehmer eine Kopie angeboten. Die unterschriebene Einverständniserklärung ist Voraussetzung für den Beginn aller studienbezogenen Verfahren.