Det intestinale medfødte immunsystemet hos nyfødte. Utvikling og betennelse i helse og sykdom (INTINE)

1. NEC-studie 1.1. Inklusjonskriterier For tidlig fødte barn < GA uke 32. Det totale antallet som skal inkluderes vil være 200 1.2. Eksklusjonskriterier For tidlig fødte med medfødte sykdommer eller andre alvorlige tilstander kan utsette deltakelsen.

Situasjoner hvor innsamling av vev ved operasjon er umulig eller problematisk f.eks. på grunn av den gjenværende lengden av den vitale tarmen vurderes til å være for kort i henhold til skjønn fra operasjonskirurgen.

1.3. Studiedesign Spedbarn vil inkluderes like etter fødsel etter innhentet samtykke basert på skriftlig og muntlig informasjon. Avføringsprøver vil bli tatt fra dag 1 i livet og ukentlig i de påfølgende ukene frem til utskrivning for å undersøke sammensetningen av avføringsmikrobiomet i forhold til utviklingen av NEC og effekten av medisinsk terapi.

Ved utvikling av NEC med behov for kirurgi vil den berørte tarmen bli resektert, og stomier etableres. Prøver av avføringsinnhold og vev tas fra tarmen proksimalt og distalt til den delte tarmen. På tidspunktet for reversering av stomier vil vevet samles både proksimalt og distalt fra deling for å undersøke utviklingen av tarmen i løpet av tidlig liv, samt potensielle ernæringsmessige effekter på tarmens modenhet. Spedbarn som ikke gjennomgår kirurgi fungerer som kontroller, de som behandles for NEC kun med antibiotika, vil bli inkludert i en delanalyse som sammenligner mikrobiomet til spedbarn som trenger kirurgi.

1.4. Prøvetaking 1.4.1. Avføringsprøver Avføringsprøver tas så raskt som mulig etter fødsel og en gang i uken frem til utskrivning. Avføring skrapes av bleien så fort dette viser seg. Mengden må samsvare med en negl. To prøver blir samlet inn på hvert tidspunkt. Ansikter vil bli lagret i et passende rør, etter oppsamling blandes innholdet med en buffer (saltvann) 1:2 før frysing ved -600 grader C. Fekalt innhold samlet ved primær kirurgi og ved stomi-reversering, prøver tilberedes tilsvarende.

1.4.2. Tarmprøver Ved operasjon tas en vevsprøve fra den proksimale og distale enden av reseksjonert tarm og resttarm som hurtigfryses umiddelbart etter innsamling og oppbevares ved -800 C. For å kunne samle så mange vevsprøver som mulig, er vår strategi. vil være å snapfryse minst 4 prøver (ca. 1 cm2) av det resekerte vevet; 2 fra det friske stedet og 2 fra det syke stedet i tarmen. En eller flere prøver vil bli klargjort for fersk analyse ved DTU (kun fra spedbarn fra Rigshospitalet). Ved stomi-reversering vil vev bli tatt fra stomistedet og den proksimale enden av den avledede tarmen. Alt vev vil bli overført til en biobank hos OPEN ved Odense Universitetssykehus.

1.5. Utfall 1.5.1. Primær Å undersøke mikrobiotas rolle i utviklingen av NEC og tilhørende endringer i tarmens immunsystem hos de som skal opereres 1.5.2. Sekundært: Demografi som GA, BW, fødselstype og Apgar-score Klinisk: Vekst, type ernæring, antall dager på TPN, antall dager med sentralt venekateter og medisinsk behandling. 1.6. Informasjon og samtykke Premature spedbarn innlagt enten ved Intensivavdeling for sped- og småbarn, Rigshospitalet eller Neonatologisk avdeling, OUH vil bli screenet for valgbarhet. Nødvendig informasjon vil bli overlevert til forskerne. For barn som oppfyller inklusjonskriteriene, vil foreldrene bli kontaktet og informert om prosjektet og bedt om deltakelse i studien og deres informerte skriftlige samtykke. Foreldrenes samtykke til å delta i studien skal dokumenteres i pasientens elektroniske journal. Informert samtykke må innhentes før innsamling av prøver for prosjektet. Dersom foreldrene ønsker det, kan de få tilgang til en tilskuer blant personellet uten direkte tilknytning til forskningsprosjektet, og de vil også få mulighet til å ha med seg en bedømmer. Foruten skriftlig og muntlig informasjon om studien vil brosjyren "Før du beslutter dig: Om at være forsøgsperson i sundhedsvidenskabelige forsøk" fra VEK, sammen med brosjyren "Forsøgspersonens rettigheder i et sundhedsvidenskabeligt forskningsprojekt" bli levert til foreldrene. Dersom foreldrene samtykker, vil de motta en kopi av samtykkeerklæringen.

Hvis det er mulig, vil det bli tilbudt en vurderingstid på 24 timer før det informerte samtykket signeres, i så fall vil et nytt møte (fremvisningen) planlegges. Dersom deltakerne ikke trenger tid til vurdering, kan erklæringen om informert samtykke signeres umiddelbart etter informasjonsmøtet av deltakerens mor eller foreldrene til deltakeren og etterforskeren (eller forskerteamet som har fått dette ansvaret tildelt av etterforskeren) . Når det informerte samtykket er signert, vil deltakeren bli tilbudt en kopi. Signert informert samtykke er en forutsetning for at screening eller eventuelle studierelaterte prosedyrer skal starte.

1. Atresistudie 1.1. Inkludering Alle nyfødte og barn opp til 1 år må gjennomgå tarmkirurgi på grunn av atresi på et hvilket som helst sted i tarmen. Det forventes en inkludering av totalt 75 pasienter.

1.2. Utelukkelse For spedbarn og barn vil prøvetaking av tarmvev kompromittere kirurgi og pasientens helse.

1.3. Studiedesign Spedbarn med medfødte misdannelser vil måtte gjennomgå planlagt operasjon for å resektere og/eller anastomere det berørte området av tarmen, og noen vil få en stomi som trenger senere reversering. Ved primærkirurgi vil avføringsprøver og tarmvev tas proksimalt og distalt for patologien. I tilfeller med stomi, og når barnet skal gjennomgå senere reverseringsoperasjon, vil vevsprøver fra proksimale og distale ende av tarmen tas sammen med avføringsprøver.

1.4. Prøvetaking 1.4.1. Avføringsprøver Avføringsprøver tas så raskt som mulig etter primæroperasjon og en gang ukentlig frem til utskrivning. Avføring skrapes av bleien så snart dette viser seg. Mengden må samsvare med en negl. To prøver blir samlet inn på hvert tidspunkt. Avføring vil bli lagret i et passende rør, etter oppsamling blandes innholdet med en buffer (saltvann) 1:2 før frysing ved -600 grader C. Avføringsinnhold samlet ved primærkirurgi og ved stomi-reversering, prøver tilberedes tilsvarende.

1.4.2. Tarmprøver Ved operasjon vil det bli tatt 2 eller flere vevsprøver fra proksimale og distale tarmer. For å kunne samle så mange vevsprøver som mulig, vil vår strategi være å snapfryse minst 4 prøver (ca. 1 cm2) av det resekerte vevet; 2 fra henholdsvis den proksimale og distale delen. En eller flere prøver vil bli klargjort for fersk analyse ved DTU (kun fra spedbarn ved Rigshospitalet). Den samme prosedyren vil bli utført ved stomi-reversering. Alt vev vil etter avsluttet studie bli overført til en biobank hos OPEN ved Odense Universitetssykehus.

1.5. Utfall: 1.5.1. Primær konstitusjon og utvikling av tarmens immunsystem og tarmbakteriekolonisering over tid 1.5.2. Sekundær demografi som GA, BW, type fødsel og Apgar-score Klinisk: Vekst, type ernæring, medisinsk behandling og sykdomsforløp. 1.6. Informasjon og samtykke Spedbarn født med en medfødt misdannelse i mage-tarmkanalen som trenger kirurgi vil bli screenet for kvalifisering. Nødvendig informasjon vil bli overlevert til forskerne. For barn som oppfyller inklusjonskriteriene, vil foreldrene bli kontaktet og informert om prosjektet og bedt om deltakelse i studien og deres informerte skriftlige samtykke. Foreldrenes samtykke til å delta i studien skal dokumenteres i pasientens elektroniske journal. Informert samtykke må innhentes før innhenting av eventuelle prøver til prosjektet Skriftlig og muntlig informasjon vil bli utført av ansatte fra enten Intensivavdeling for sped- og småbarn, Rigshospitalet, Barnekirurgisk avdeling, Rigshospitalet, Barnekirurgisk avdeling, OUH eller Neonatologisk avdeling, OUH. Dersom familien ønsker det, kan de få tilgang til en tilskuer blant personalet uten direkte tilknytning til forskningsprosjektet, og de vil også få mulighet til å ha med seg en bedømmer. Foruten skriftlig og muntlig informasjon om studien, vil brosjyren "Før du beslutter dig: Om at være forsøgsperson i sundhedsvidenskabelige forsøk" fra VEK, sammen med brosjyren "Forsøgspersonens rettigheder i et sundhedsvidenskabeligt forskningsprojekt'' bli levert til foreldrene. Dersom foreldrene samtykker, vil de motta en kopi av samtykkeerklæringen.

Dersom det er mulig, vil det bli tilbudt en vurderingstid på noen timer i ventetiden for operasjon før det informerte samtykket signeres. Dersom deltakerne ikke trenger tid til vurdering, kan erklæringen om informert samtykke signeres umiddelbart etter informasjonsmøtet av deltakerens mor eller foreldrene til deltakeren og etterforskeren (eller forskerteamet som har fått dette ansvaret tildelt av etterforskeren) . Når det informerte samtykket er signert, vil deltakeren bli tilbudt en kopi. Signert informert samtykke er en forutsetning for at eventuelle studierelaterte prosedyrer kan starte.