Система врожденного иммунитета кишечника у новорожденных. Развитие и воспаление в здоровье и болезни (INTINE)

1. Исследование NEC 1.1. Критерии включения: Недоношенные дети, рожденные < 32-й недели беременности. Общее количество участников составит 200 1.2. Критерии исключения Недоношенные дети с врожденными заболеваниями или другими серьезными заболеваниями могут отложить участие.

Ситуации, когда сбор ткани во время операции невозможен или проблематичен, например: из-за оставшейся длины жизненно важной кишки оцениваются как слишком короткие по усмотрению оперирующего хирурга.

1.3. Дизайн исследования Младенцы будут включены сразу после рождения после получения согласия на основании письменной и устной информации. Образцы фекалий будут собираться с первого дня жизни и еженедельно в течение следующих недель до выписки, чтобы исследовать состав фекального микробиома в связи с развитием НЭК и эффектом медикаментозной терапии.

В случае развития НЭК с необходимостью хирургического вмешательства пораженную кишку резецируют и устанавливают стомы. Образцы фекального содержимого и тканей собираются из кишечника проксимальнее и дистальнее разделенной кишки. Во время реверсирования стомы ткань будет собираться как проксимальнее, так и дистальнее отделения, чтобы исследовать развитие кишечника в раннем возрасте, а также потенциальное влияние питания на зрелость кишечника. Младенцы, не подвергавшиеся хирургическому вмешательству, служат контрольной группой, а те, кого лечат от НЭК только антибиотиками, будут включены в субанализ, сравнивающий микробиом младенцев, нуждающихся в хирургическом вмешательстве.

1.4. Выборка 1.4.1. Образцы кала Образцы кала собираются как можно скорее после рождения и один раз в неделю до выписки. Фекалии соскабливают с подгузника, как только они появляются. Сумма должна соответствовать ногтю. В каждый момент времени отбирают две пробы. Лица будут храниться в соответствующей пробирке, после сбора содержимое смешивается с буфером (физраствором) 1:2 перед замораживанием при -600 градусах Цельсия. Содержимое кала, собираемое при первичной операции и при переворачивании стомы, образцы готовятся аналогично.

1.4.2. Образцы кишечника. Во время операции берутся образцы тканей из проксимального и дистального концов резецированной кишки и остатка кишки, которые сразу же после сбора замораживаются и хранятся при температуре -800 C. Чтобы иметь возможность собрать как можно больше образцов тканей, наша стратегия будет мгновенно замораживать не менее 4 образцов (около 1 см2) резецированной ткани; 2 со здорового участка и 2 с больного участка кишечника. Для свежего анализа в DTU будет подготовлен один или несколько образцов (только от младенцев из Rigshospitalet). При реверсировании стомы ткань будет взята из места стомы и проксимального конца отведенной кишки. Все ткани будут переданы в биобанк, размещенный OPEN в университетской больнице Оденсе.

1,5. Результаты 1.5.1. Первичное. Изучить роль микробиоты в развитии НЭК и связанных с ней изменений иммунной системы кишечника у оперированных 1.5.2. Вторичные: демографические данные, такие как общий возраст, масса тела, тип рождения и оценка по шкале Апгар. Клинические: рост, тип питания, количество дней на парентеральном питании, количество дней с центральным венозным катетером и медикаментозным лечением. 1.6. Информация и согласие Недоношенные дети, поступившие в отделение интенсивной терапии младенцев и детей ясельного возраста Rigshospitalet или отделение неонатологии OUH, будут проверены на соответствие требованиям. Необходимая информация будет передана исследователям. Для детей, которые соответствуют критериям включения, к родителям свяжутся и проинформируют о проекте, а также попросят их участвовать в исследовании и получить их информированное письменное согласие. Согласие родителей на участие в исследовании должно быть задокументировано в электронной медицинской карте пациента. Информированное согласие должно быть получено до сбора каких-либо образцов для проекта. При желании родители могут получить доступ к стороннему лицу из числа персонала, не имеющему прямого отношения к исследовательскому проекту, а также им будет предоставлена ​​возможность привести с собой эксперта. Помимо письменной и устной информации об исследовании, родителям будет вручена брошюра «Før du beslutter dig: Om at være forsøgsperson i sundhedsvidenskabelige forsøg» от VEK, а также брошюра «Forsøgspersonens rettigheder i et sundhedsvidenskabeligt forskningsprojekt». Если родители согласны, они получат копию формы информированного согласия.

Если возможно, перед подписанием информированного согласия будет предложен 24-часовой период рассмотрения, и в этом случае будет назначена новая встреча (скрининг). Если участникам не требуется время для рассмотрения, заявление об информированном согласии может быть подписано сразу после информационной встречи матерью участника или родителями участника и исследователя (или исследовательской группы, на которую следователь возложил эту ответственность). . После подписания информированного согласия участнику будет предложена копия. Подписанное информированное согласие является обязательным условием для начала скрининга или любых процедур, связанных с исследованием.

1. Исследование атрезии 1.1. Включение Всем новорожденным и детям до 1 года необходима операция на кишечнике по поводу атрезии любого участка кишечника. Ожидается, что в исследование примут в общей сложности 75 пациентов.

1.2. Исключение. У младенцев и детей забор тканей кишечника может поставить под угрозу хирургическое вмешательство и здоровье пациента.

1.3. Дизайн исследования Младенцам с врожденными пороками развития придется пройти плановое хирургическое вмешательство по резекции и/или анастомозированию пораженного участка кишечника, а некоторым из них будет наложена стома, которую впоследствии потребуется отменить. При первичной операции образцы фекалий и ткани кишечника будут собраны проксимальнее и дистальнее патологии. В случаях со стомой и в случае, когда ребенку позднее предстоит реверсивная операция, образцы тканей из проксимального и дистального концов кишечника будут взяты вместе с образцами кала.

1.4. Выборка 1.4.1. Образцы кала Пробы кала собираются как можно скорее после первичной операции и один раз в неделю до выписки. Фекалии соскабливают с подгузника, как только они появляются. Сумма должна соответствовать ногтю. В каждый момент времени отбирают две пробы. Фекалии хранятся в соответствующей пробирке, после сбора содержимое смешивается с буфером (физраствором) 1:2 перед замораживанием при -600 градусах Цельсия. Содержимое кала, собираемое при первичной операции и при переворачивании стомы, образцы готовятся аналогично.

1.4.2. Образцы кишечника. Во время операции будут взяты 2 или более образца ткани из проксимального и дистального отделов кишечника. Чтобы иметь возможность собрать как можно больше образцов тканей, наша стратегия будет заключаться в мгновенном замораживании как минимум 4 образцов (приблизительно 1 см2) резецированной ткани; 2 с проксимальной и дистальной части соответственно. Один или несколько образцов будут подготовлены для свежего анализа в DTU (только от младенцев в Rigshospitalet). Та же процедура будет выполнена при развороте стомы. После завершения исследования все ткани будут переданы в биобанк, размещенный OPEN в университетской больнице Оденсе.

1,5. Результаты: 1.5.1. Первичная конституция и развитие иммунной системы кишечника и колонизация кишечных бактерий с течением времени 1.5.2. Вторичные демографические данные, такие как общий возраст, масса тела, тип рождения и оценка по шкале Апгар. Клинические: рост, тип питания, медицинское лечение и течение заболевания. 1.6. Информация и согласие Младенцы, рожденные с врожденным пороком развития желудочно-кишечного тракта, требующим хирургического вмешательства, будут проверены на предмет соответствия требованиям. Необходимая информация будет передана исследователям. Для детей, которые соответствуют критериям включения, к родителям свяжутся и проинформируют о проекте, а также попросят их участвовать в исследовании и получить их информированное письменное согласие. Согласие родителей на участие в исследовании должно быть задокументировано в электронной медицинской карте пациента. Перед сбором любых образцов для проекта необходимо получить информированное согласие. Письменное и устное информирование будет осуществляться сотрудниками отделения интенсивной терапии младенцев и детей ясельного возраста, Rigshospitalet, отделения детской хирургии, Rigshospitalet, отделения детской хирургии, OUH или кафедра неонатологии OUH. По желанию семьи им может быть предоставлен доступ к свидетелю из числа сотрудников, не имеющему прямого отношения к исследовательскому проекту, а также им будет предоставлена ​​возможность пригласить с собой эксперта. Помимо письменной и устной информации об исследовании, родителям будет вручена брошюра «Før du beslutter dig: Om at være forsøgsperson i sundhedsvidenskabelige forsøg» от VEK, а также брошюра «Forsøgspersonens rettigheder i et sundhedsvidenskabeligt forskningsprojekt». Если родители согласны, они получат копию формы информированного согласия.

Если возможно, перед подписанием информированного согласия будет предложен период рассмотрения в несколько часов в период ожидания операции. Если участникам не требуется время для рассмотрения, заявление об информированном согласии может быть подписано сразу после информационной встречи матерью участника или родителями участника и исследователя (или исследовательской группы, на которую следователь возложил эту ответственность). . После подписания информированного согласия участнику будет предложена копия. Подписанное информированное согласие является обязательным условием для начала любых процедур, связанных с исследованием.