Det intestinale medfødte immunsystem hos nyfødte. Udvikling og betændelse i sundhed og sygdom (INTINE)

1. NEC-undersøgelse 1.1. Inklusionskriterier For tidligt fødte børn født < GA uge 32. Det samlede antal, der skal inkluderes, vil være 200 1.2. Eksklusionskriterier For tidligt fødte med medfødte sygdomme eller andre alvorlige tilstande kan udsætte deltagelse.

Situationer, hvor opsamling af væv ved operation er umulig eller problematisk f.eks. på grund af den resterende længde af den vitale tarm vurderes at være for kort i henhold til operationskirurgens skøn.

1.3. Undersøgelsesdesign Spædbørn vil blive inkluderet lige efter fødslen efter indhentet samtykke baseret på skriftlig og mundtlig information. Der vil blive indsamlet fæcesprøver fra dag 1 i livet og ugentligt i de følgende uger frem til udskrivelsen for at undersøge fæcesmikrobiomets sammensætning i forhold til udviklingen af ​​NEC og effekten af ​​medicinsk terapi.

I tilfælde af udvikling af NEC med behov for operation, vil den berørte tarm blive resekeret, og stomier vil blive etableret. Prøver af fækalt indhold og væv opsamles fra tarmen proksimalt og distalt for den delte tarm. På tidspunktet for reversering af stomier vil vævet blive opsamlet både proksimalt og distalt fra deling for at undersøge tarmens udvikling i det tidlige liv samt potentielle ernæringsmæssige effekter på tarmens modenhed. Spædbørn, der ikke bliver opereret, fungerer som kontroller, de, der kun behandles for NEC med antibiotika, vil blive inkluderet i en delanalyse, der sammenligner mikrobiomet hos spædbørn, der skal opereres.

1.4. Prøveudtagning 1.4.1. Fækalprøver Fækale prøver udtages hurtigst muligt efter fødslen og en gang ugentligt indtil udskrivelsen. Afføring skrabes af bleen, så snart denne viser sig. Mængden skal svare til en negl. Der udtages to prøver på hvert tidspunkt. Ansigter vil blive opbevaret i et passende rør, efter opsamling blandes indholdet med en buffer (saltvand) 1:2 før frysning ved -600 grader C. Fækalt indhold opsamlet ved primær operation og ved stomivending, prøver fremstilles tilsvarende.

1.4.2. Tarmprøver Ved operation tages en vævsprøve fra den proksimale og distale ende af den resekerede tarm og resttarm, som lynfryses umiddelbart efter opsamling og opbevares ved -800 C. For at kunne opsamle så mange vævsprøver som muligt, er vores strategi vil være at snapfryse mindst 4 prøver (ca. 1 cm2) af det resekerede væv; 2 fra det raske sted og 2 fra det syge sted i tarmen. En eller flere prøver vil blive klargjort til frisk analyse på DTU (kun fra spædbørn fra Rigshospitalet). Ved stomivending vil der blive taget væv fra stomistedet og den proksimale ende af den afledte tarm. Alt væv vil blive overført til en biobank hos OPEN på Odense Universitetshospital.

1.5. Resultater 1.5.1. Primær At undersøge mikrobiotas rolle i udviklingen af ​​NEC og associerede ændringer i tarmens immunsystem hos dem, der skal opereres 1.5.2. Sekundært: Demografi som GA, BW, fødselstype og Apgar-score Klinisk: Vækst, ernæringstype, antal dage på TPN, antal dage med centralt venekateter og medicinsk behandling. 1.6. Information og samtykke For tidligt fødte spædbørn indlagt på enten Intensivafdeling for spædbørn og småbørn, Rigshospitalet eller Neonatologisk afdeling, OUH vil blive screenet for berettigelse. Den nødvendige information vil blive udleveret til forskerne. For børn, der opfylder inklusionskriterierne, vil forældrene blive kontaktet og informeret om projektet og bedt om deltagelse i undersøgelsen og deres informerede skriftlige samtykke. Forældrenes samtykke til deltagelse i undersøgelsen skal dokumenteres i patientens elektroniske journal. Informeret samtykke skal indhentes før indsamling af prøver til projektet. Hvis forældrene ønsker det, kan de få adgang til en tilskuer blandt personalet uden direkte relation til forskningsprojektet, ligesom de får mulighed for at medbringe en bedømmer. Udover skriftlig og mundtlig information om undersøgelsen vil pjecen "Før du beslutter dig: Om at være forsøgsperson i sundhedsvidenskabelige forsøg" fra VEK, sammen med pjecen "Forsøgspersonens rettigheder i et sundhedsvidenskabeligt forskningsprojekt" blive leveret til forældrene. Hvis forældrene giver samtykke, vil de modtage en kopi af samtykkeerklæringen.

Hvis det er muligt, vil der blive tilbudt en overvejelsestid på 24 timer før underskrivelse af det informerede samtykke, i hvilket tilfælde et nyt møde (screeningen) vil blive planlagt. Hvis deltagerne ikke kræver tid til overvejelse, kan erklæringen om informeret samtykke underskrives umiddelbart efter informationsmødet af deltagerens mor eller forældrene til deltageren og investigator (eller det forskerhold, der har fået tildelt dette ansvar af investigator) . Når det informerede samtykke er underskrevet, vil deltageren blive tilbudt en kopi. Underskrevet informeret samtykke er en forudsætning for, at screening eller eventuelle undersøgelsesrelaterede procedurer kan starte.

1. Atresiundersøgelse 1.1. Inklusion Alle nyfødte og børn op til 1 år skal gennemgå en tarmoperation på grund af atresi på et hvilket som helst sted i tarmen. Der forventes en inklusion på i alt 75 patienter.

1.2. Udelukkelse For spædbørn og børn ville prøvetagning af tarmvæv kompromittere kirurgi og patientens helbred.

1.3. Undersøgelsesdesign Spædbørn med medfødte misdannelser skal gennemgå en planlagt operation for at resektere og/eller anastomere det berørte område af tarmen, og nogle vil modtage en stomi, der skal vendes senere. Ved primær operation udtages fæcesprøver og tarmvæv proksimalt og distalt i forhold til patologien. I tilfælde med stomi, og når barnet skal gennemgå senere vendeoperation, vil der blive indsamlet vævsprøver fra den proksimale og distale ende af tarmen sammen med fæcesprøver.

1.4. Prøveudtagning 1.4.1. Fækalprøver Fækale prøver udtages hurtigst muligt efter primær operation og en gang ugentligt indtil udskrivelsen. Afføring skrabes af bleen, så snart denne viser sig. Mængden skal svare til en negl. Der udtages to prøver på hvert tidspunkt. Fæces vil blive opbevaret i et passende rør, efter opsamling blandes indholdet med en buffer (saltvand) 1:2 før frysning ved -600 grader C. Fækalt indhold opsamlet ved primær kirurgi og ved stomivending, prøver fremstilles tilsvarende.

1.4.2. Tarmprøver Ved operationen vil der blive indsamlet 2 eller flere vævsprøver fra proksimale og distale tarme. For at kunne indsamle så mange vævsprøver som muligt, vil vores strategi være at snapfryse mindst 4 prøver (ca. 1 cm2) af det resekerede væv; 2 fra henholdsvis den proksimale og distale del. En eller flere prøver vil blive klargjort til frisk analyse på DTU (kun fra spædbørn på Rigshospitalet). Den samme procedure vil blive udført ved stomivending. Alt væv vil efter afslutning af studiet blive overført til en biobank hos OPEN på Odense Universitetshospital.

1.5. Resultater: 1.5.1. Primær opbygning og udvikling af tarmens immunsystem og tarmbakteriekolonisering over tid 1.5.2. Sekundær demografi såsom GA, BW, fødselstype og Apgar-score Klinisk: Vækst, ernæringstype, medicinsk behandling og sygdomsforløb. 1.6. Information og samtykke Spædbørn født med en medfødt misdannelse i mave-tarmkanalen, som skal opereres, vil blive screenet for berettigelse. Den nødvendige information vil blive udleveret til forskerne. For børn, der opfylder inklusionskriterierne, vil forældrene blive kontaktet og informeret om projektet og bedt om deltagelse i undersøgelsen og deres informerede skriftlige samtykke. Forældrenes samtykke til deltagelse i undersøgelsen skal dokumenteres i patientens elektroniske journal. Der skal indhentes informeret samtykke forud for indsamling af prøver til projektet. Skriftlig og mundtlig information vil blive udført af personale fra enten Intensivafdelingen for Spædbørn og Småbørn, Rigshospitalet, Pædiatrisk Afdeling, Rigshospitalet, Pædiatrisk Afdeling, OUH eller Neonatologisk Afdeling, OUH. Hvis familien ønsker det, kan de få adgang til en tilskuer blandt personalet uden direkte relation til forskningsprojektet, ligesom de får mulighed for at medbringe en bedømmer. Udover skriftlig og mundtlig information om undersøgelsen, vil pjecen "Før du beslutter dig: Om at være forsøgsperson i sundhedsvidenskabelige forsøg" fra VEK, sammen med pjecen "Forsøgspersonens rettigheder i et sundhedsvidenskabeligt forskningsprojekt'' blive leveret til forældrene. Hvis forældrene giver samtykke, vil de modtage en kopi af samtykkeerklæringen.

Hvis det er muligt, vil der blive tilbudt en overvejelsestid på nogle timer i venteperioden for operation, inden det informerede samtykke underskrives. Hvis deltagerne ikke kræver tid til overvejelse, kan erklæringen om informeret samtykke underskrives umiddelbart efter informationsmødet af deltagerens mor eller forældrene til deltageren og investigator (eller det forskerhold, der har fået tildelt dette ansvar af investigator) . Når det informerede samtykke er underskrevet, vil deltageren blive tilbudt en kopi. Underskrevet informeret samtykke er en forudsætning for, at eventuelle undersøgelsesrelaterede procedurer kan starte.