Wrodzony układ odpornościowy jelit u noworodków. Rozwój i zapalenie w zdrowiu i chorobie (INTINE)

1. Badanie NEC 1.1. Kryteria włączenia Wcześniaki urodzone < 32. tygodnia GA. Łączna liczba, która zostanie uwzględniona, wyniesie 200. 1.2. Kryteria wykluczenia Wcześniaki z chorobami wrodzonymi lub innymi poważnymi schorzeniami mogą odłożyć udział w badaniu.

Sytuacje, w których pobranie tkanki podczas zabiegu operacyjnego jest niemożliwe lub problematyczne, np.: ze względu na pozostałą długość jelita żywego, według uznania chirurga operującego, są one zbyt krótkie.

1.3. Projekt badania Niemowlęta zostaną włączone do badania zaraz po urodzeniu, po uzyskaniu zgody na podstawie informacji pisemnych i ustnych. Próbki kału będą pobierane od 1. dnia życia oraz co tydzień przez kolejne tygodnie aż do wypisu ze szpitala w celu zbadania składu mikrobiomu kału pod kątem rozwoju NEC i wpływu terapii medycznej.

W przypadku rozwinięcia się NEC wymagającego operacji, zajęte jelito zostanie wycięte i założone zostaną stomiki. Próbki treści kałowej i tkanki pobiera się z jelita bliższego i dalszego od jelita podzielonego. W momencie odwracania stomii pobrana zostanie tkanka zarówno z części proksymalnej, jak i dalszej od podziału, aby zbadać rozwój jelita we wczesnym okresie życia oraz potencjalny wpływ składników odżywczych na dojrzałość jelit. Niemowlęta, które nie zostaną poddane operacji, służą jako kontrola, a te, które są leczone z powodu NEC wyłącznie antybiotykami, zostaną uwzględnione w analizie cząstkowej porównującej mikrobiom niemowląt wymagających operacji.

1.4. Pobieranie próbek 1.4.1. Próbki kału Próbki kału pobiera się możliwie jak najszybciej po urodzeniu i raz w tygodniu aż do wypisu ze szpitala. Gdy tylko się pojawi, zdrapuje się kał z pieluszki. Ilość musi odpowiadać paznokciowi. W każdym punkcie czasowym pobiera się dwie próbki. Twarze będą przechowywane w odpowiedniej probówce, po pobraniu zawartość miesza się z buforem (solą fizjologiczną) 1:2 przed zamrożeniem w temperaturze -600 st. C. W podobny sposób pobiera się zawartość kału podczas zabiegu pierwotnego oraz przy odwracaniu stomii.

1.4.2. Próbki jelit Podczas operacji pobiera się próbkę tkanki z bliższego i dalszego końca usuniętego jelita oraz pozostałości jelita, natychmiast po pobraniu zamraża i przechowuje w temperaturze -800°C. Naszą strategią jest umożliwienie pobrania jak największej liczby próbek tkanek. będzie szybkie zamrożenie co najmniej 4 próbek (około 1 cm2) wyciętej tkanki; 2 ze zdrowego miejsca jelita i 2 z chorego miejsca jelita. Jedna lub więcej próbek zostanie przygotowanych do świeżej analizy w DTU (wyłącznie od niemowląt z Rigshospitalet). Podczas odwracania stomii pobierana jest tkanka z miejsca stomii i bliższego końca odchylonego jelita. Cała tkanka zostanie przeniesiona do biobanku prowadzonego przez OPEN w Szpitalu Uniwersyteckim w Odense.

1,5. Wyniki 1.5.1. Podstawowy Badanie roli mikroflory w rozwoju NEC i związanych z tym zmian w jelitowym układzie odpornościowym u osób poddawanych operacji 1.5.2. Drugorzędne: Dane demograficzne, takie jak GA, BW, rodzaj urodzenia i liczba punktów w skali Apgar Kliniczne: Wzrost, rodzaj odżywiania, liczba dni na TPN, liczba dni z cewnikiem do żyły centralnej i leczeniem. 1.6. Informacje i zgoda Wcześniaki przyjęte na Oddział Intensywnej Terapii Niemowląt i Małych Dzieci w Rigshospitalet lub na Oddział Neonatologii w OUH zostaną poddane badaniu kwalifikacyjnemu. Niezbędne informacje zostaną przekazane badaczom. W przypadku dzieci, które spełniają kryteria włączenia, skontaktujemy się z rodzicami i poinformujemy ich o projekcie oraz poprosimy o udział w badaniu i ich świadomą pisemną zgodę. Zgoda rodziców na udział w badaniu musi być udokumentowana w elektronicznej dokumentacji medycznej pacjenta. Przed pobraniem jakichkolwiek próbek do projektu należy uzyskać świadomą zgodę. Na życzenie rodziców istnieje możliwość kontaktu z osobą postronną spośród personelu niezwiązanego bezpośrednio z projektem badawczym, a także możliwość przyprowadzenia ze sobą asesora. Oprócz pisemnych i ustnych informacji na temat badania, rodzicom zostanie dostarczona broszura „Før du beslutter dig: Om at være forsøgsperson i sundhedsvidenskabelige forsøg” wydana przez VEK wraz z broszurą „Forsøgspersonens rettigheder i et sundhedsvidenskabeligt forskningsprojekt”. Jeśli rodzice wyrażą zgodę, otrzymają kopię formularza świadomej zgody.

Jeśli to możliwe, przed podpisaniem świadomej zgody zostanie zaproponowany 24-godzinny okres do namysłu, w którym to przypadku zostanie zaplanowane nowe spotkanie (pokaz). Jeżeli uczestnicy nie wymagają czasu na namysł, oświadczenie świadomej zgody może zostać podpisane bezpośrednio po spotkaniu informacyjnym przez matkę uczestnika lub rodziców uczestnika i badacza (lub zespół badawczy, któremu badacz zlecił tę odpowiedzialność) . Po podpisaniu świadomej zgody uczestnik otrzyma kopię. Podpisana świadoma zgoda jest warunkiem wstępnym rozpoczęcia badań przesiewowych lub jakichkolwiek procedur związanych z badaniem.

1. Badanie atrezji 1.1. Włączenie Wszystkie noworodki i dzieci do 1 roku życia muszą zostać poddane operacji jelitowej z powodu atrezji w dowolnym miejscu jelita. Przewiduje się, że do badania zostanie włączonych ogółem 75 pacjentów.

1.2. Wyłączenie W przypadku niemowląt i dzieci pobieranie próbek tkanki jelitowej zagrażałoby operacji i zdrowiu pacjenta.

1.3. Projekt badania Niemowlęta z wrodzonymi wadami rozwojowymi będą musiały przejść zaplanowaną operację w celu wycięcia i/lub zespolenia zajętego obszaru jelita, a niektórym pacjentom zostanie wszczepiona stomia, którą należy później odwrócić. Podczas pierwotnej operacji pobierane są próbki kału i tkanki jelitowej z części proksymalnej i dystalnej patologii. W przypadku posiadania stomii oraz gdy dziecko będzie poddawane późniejszej operacji odwrotnej, wraz z próbkami kału zostaną pobrane próbki tkanek z bliższego i dalszego końca jelita.

1.4. Pobieranie próbek 1.4.1. Próbki kału Próbki kału pobiera się możliwie jak najszybciej po podstawowej operacji i raz w tygodniu aż do wypisu ze szpitala. Gdy tylko się pojawią, z pieluszki zeskrobuje się kał. Ilość musi odpowiadać paznokciowi. W każdym punkcie czasowym pobiera się dwie próbki. Kał będzie przechowywany w odpowiedniej probówce, po pobraniu zawartość miesza się z buforem (solą fizjologiczną) 1:2 przed zamrożeniem w temperaturze -600 st. C. W podobny sposób pobiera się zawartość kału podczas zabiegu pierwotnego oraz przy odwracaniu stomii.

1.4.2. Próbki jelit Podczas zabiegu zostaną pobrane 2 lub więcej próbek tkanek z bliższego i dalszego odcinka jelita. Aby móc zebrać jak najwięcej próbek tkanek, naszą strategią będzie szybkie zamrożenie co najmniej 4 próbek (około 1 cm2) wyciętej tkanki; 2 odpowiednio z części bliższej i dalszej. Jedna lub więcej próbek zostanie przygotowanych do świeżej analizy w DTU (tylko od niemowląt w Rigshospitalet). Ta sama procedura zostanie wykonana przy odwróceniu stomii. Po zakończeniu badania cała tkanka zostanie przeniesiona do biobanku prowadzonego przez OPEN w szpitalu uniwersyteckim w Odense.

1,5. Wyniki: 1.5.1. Pierwotna budowa i rozwój jelitowego układu odpornościowego oraz kolonizacja bakteryjna jelit w czasie 1.5.2. Drugorzędne dane demograficzne, takie jak waga ciała, masa ciała, rodzaj urodzenia i liczba punktów w skali Apgar. Kliniczne: wzrost, rodzaj odżywiania, leczenie i przebieg choroby. 1.6. Informacje i zgoda Niemowlęta urodzone z wrodzoną wadą rozwojową przewodu pokarmowego wymagające operacji zostaną poddane badaniu przesiewowemu pod kątem kwalifikowalności. Niezbędne informacje zostaną przekazane badaczom. W przypadku dzieci, które spełniają kryteria włączenia, skontaktujemy się z rodzicami i poinformujemy ich o projekcie oraz poprosimy o udział w badaniu i ich świadomą pisemną zgodę. Zgoda rodziców na udział w badaniu musi być udokumentowana w elektronicznej dokumentacji medycznej pacjenta. Przed pobraniem jakichkolwiek próbek do projektu należy uzyskać świadomą zgodę. Informacje pisemne i ustne zostaną udzielone przez personel Oddziału Intensywnej Opieki nad Niemowląt i Małych Dzieci, Rigshospitalet, Oddział Chirurgii Dziecięcej, Rigshospitalet, Oddział Chirurgii Dziecięcej, OUH lub Oddział Neonatologii OUH. Jeśli rodzina sobie tego życzy, będzie mogła uzyskać dostęp do osoby postronnej spośród pracowników niezwiązanych bezpośrednio z projektem badawczym, a także będzie miała możliwość przyprowadzenia ze sobą asesora. Oprócz pisemnych i ustnych informacji na temat badania, rodzicom zostanie dostarczona broszura „Før du beslutter dig: Om at være forsøgsperson i sundhedsvidenskabelige forsøg” wydana przez VEK wraz z broszurą „Forsøgspersonens rettigheder i et sundhedsvidenskabeligt forskningsprojekt”. Jeśli rodzice wyrażą zgodę, otrzymają kopię formularza świadomej zgody.

Jeśli to możliwe, przed podpisaniem świadomej zgody zostanie zaproponowany kilkugodzinny okres rozpatrzenia w okresie oczekiwania na operację. Jeżeli uczestnicy nie wymagają czasu na namysł, oświadczenie świadomej zgody może zostać podpisane bezpośrednio po spotkaniu informacyjnym przez matkę uczestnika lub rodziców uczestnika i badacza (lub zespół badawczy, któremu badacz zlecił tę odpowiedzialność) . Po podpisaniu świadomej zgody uczestnik otrzyma kopię. Podpisana świadoma zgoda jest warunkiem wstępnym rozpoczęcia wszelkich procedur związanych z badaniem.