新生児の腸の自然免疫システム。健康と病気における発生と炎症 (INTINE)

1. NEC の調査 1.1. 対象基準 GA 32 週目未満で生まれた未熟児。 含まれる総数は 200 1.2 になります。 除外基準 先天性疾患またはその他の重篤な疾患を抱えた早生まれの場合、参加が延期される場合があります。

手術時に組織を採取することが不可能または問題となる状況。 重要な腸の残りの長さにより、執刀医の裁量によって短すぎると評価される場合があります。

1.3. 研究デザイン 書面および口頭情報に基づいて同意を得た後、出生直後の乳児を対象とする。 糞便サンプルは生後1日目から収集され、その後退院までの数週間毎週収集され、NECの発症および薬物療法の効果と関連した糞便マイクロバイオームの組成を調査します。

手術が必要なNECが発症した場合は、罹患した腸が切除され、ストーマが設置されます。 糞便内容物および組織のサンプルは、分割された腸の近位および遠位の腸から収集されます。 ストーマの反転時に、組織は分割の近位側と遠位側の両方で収集され、幼少期の腸の発達と腸の成熟に対する潜在的な栄養効果を調査します。 手術を受けない乳児は対照として機能し、抗生物質のみでNECの治療を受けている乳児は、手術が必要な乳児のマイクロバイオームを比較するサブ分析に含まれる。

1.4. サンプリング 1.4.1. 糞便サンプル 糞便サンプルは、出生後できるだけ早く、退院まで週に 1 回採取されます。 これが出たらすぐにおむつから便を掻き取ります。 量は爪に匹敵する量でなければなりません。 各時点で 2 つのサンプルを収集します。 顔は適切なチューブに保管され、収集後、内容物は緩衝液（生理食塩水）と 1:2 で混合され、その後 -600 度で凍結されます。初回手術時およびストーマ反転時に収集された糞便内容物は、同様に調製されます。

1.4.2. 腸サンプル 手術では、切除された腸と残りの腸の近位端と遠位端から組織サンプルが採取され、収集後すぐに急速冷凍され、-800℃で保存されます。できるだけ多くの組織サンプルを収集できるようにするために、私たちの戦略は次のとおりです。切除組織の少なくとも 4 つのサンプル (約 1 cm2) を瞬間凍結します。 2 つは腸の健康な部位から、もう 2 つは病気の部位から採取されます。 DTU での新たな分析のために 1 つ以上のサンプルが準備されます (リグショスピタレットの乳児のみ)。 ストーマ反転では、ストーマ部位および迂回された腸の近位端から組織が採取されます。 すべての組織は、オーデンセ大学病院にある OPEN が主催するバイオバンクに移送されます。

1.5. 結果 1.5.1. 一次 NEC の発症における微生物叢の役割と、手術を受ける患者の腸免疫系の関連する変化を調査すること。 二次: GA、BW、出生の種類、アプガースコアなどの人口統計 臨床: 成長、栄養の種類、TPN の日数、中心静脈カテーテルの日数、および医療処置。 1.6. 情報と同意 Rigshospitalet の乳児集中治療部または OUH の新生児科のいずれかに入院した未熟児は、資格があるかどうかの検査を受けます。 必要な情報は研究者に引き渡されます。 対象基準を満たす子どもの場合、保護者に連絡してプロジェクトについて説明し、研究への参加と書面による同意を求めます。 研究に参加するための両親の同意は、患者の電子医療記録に文書化されなければなりません。 プロジェクトのサンプルを収集する前に、インフォームドコンセントを取得する必要があります。 保護者が希望すれば、研究プロジェクトに直接関係のない職員の中から傍観者に面会することもできるし、評価者を同伴することもできる。 研究に関する書面および口頭情報に加えて、VEK からのパンフレット「Før du beslutter dig:Om at være forsøgsperson i sundhedsvidenskabeligt forskningsprojekt」とパンフレット「Forsøgspersonens rettigheder i et sundhedsvidenskabeligt forskningsprojekt」が保護者に届けられます。 保護者が同意した場合は、インフォームドコンセントフォームのコピーを受け取ります。

可能であれば、インフォームド・コンセントに署名する前に 24 時間の検討期間が設けられ、その場合は新たな会議 (スクリーニング) が予定されます。 参加者が検討する時間を必要としない場合は、説明会の直後に、参加者の母親、または参加者の両親と研究者（または研究者からこの責任を割り当てられた研究チーム）がインフォームド・コンセントの宣言書に署名することができます。 。 インフォームドコンセントに署名すると、参加者にはコピーが提供されます。 署名されたインフォームドコンセントは、スクリーニングまたは研究関連の手順を開始するための前提条件です。

1. 閉鎖研究 1.1. 包含すべての新生児と 1 歳までの小児は、腸のどの部位でも閉鎖があるため、腸の手術を受ける必要があります。 合計 75 人の患者が含まれることが予想されます。

1.2. 除外事項 乳児や小児の場合、腸組織の採取は手術や患者の健康を損なう可能性があります。

1.3. 研究デザイン 先天奇形のある乳児は、腸の患部を切除および/または吻合するための計画的な手術を受けなければならず、一部の乳児は後で元に戻す必要があるストーマを受けることになる。 最初の手術では、糞便サンプルと腸組織が病状の近位および遠位で収集されます。 ストーマがある場合、および子供が後で反転手術を受ける場合、腸の近位端と遠位端からの組織サンプルが糞便サンプルと一緒に収集されます。

1.4. サンプリング 1.4.1. 糞便サンプル 糞便サンプルは、初回手術後できるだけ早く、退院まで週に 1 回収集されます。 この症状が出たらすぐにおむつから便を掻き取ります。 量は爪に匹敵する量でなければなりません。 各時点で 2 つのサンプルを収集します。 糞便は適切なチューブに保管され、収集後、内容物は緩衝液（生理食塩水）と 1:2 で混合され、その後 -600 度で凍結されます。初回手術時およびストーマ反転時に収集された糞便内容物は、同様に調製されます。

1.4.2. 腸サンプル 手術では、近位腸と遠位腸から 2 つ以上の組織サンプルが収集されます。 できるだけ多くの組織サンプルを収集できるようにするために、私たちの戦略は、切除組織の少なくとも 4 つのサンプル (約 1 cm2) を瞬間凍結することです。 ２はそれぞれ近位部と遠位部から見た図である。 DTU での新鮮な分析のために 1 つ以上のサンプルが準備されます (Rigshospitalet の乳児のみ)。 ストーマ反転時にも同じ手順が実行されます。 研究終了後、すべての組織はオーデンセ大学病院にあるOPENが主催するバイオバンクに移送される。

1.5. 結果: 1.5.1。 腸管免疫系の主要な構成と発達、および経時的な腸内細菌の定着 １．５．２． GA、BW、出生の種類、アプガースコアなどの二次人口統計 臨床: 成長、栄養の種類、医療処置、疾患の経過。 1.6. 情報と同意 手術が必要な消化管の先天奇形を持って生まれた乳児は、資格があるかどうかの検査を受けます。 必要な情報は研究者に引き渡されます。 対象基準を満たす子どもの場合、保護者に連絡してプロジェクトについて説明し、研究への参加と書面による同意を求めます。 研究に参加するための両親の同意は、患者の電子医療記録に文書化されなければなりません。 プロジェクトのサンプルを収集する前に、インフォームドコンセントを取得する必要があります。書面および口頭による情報提供は、乳児集中治療部、リグショスピタレット、小児外科、リグショスピタレット、小児外科、 OUH または新生児科、OUH。 家族が希望すれば、研究プロジェクトに直接関係のないスタッフの中から傍観者に面会することもできるし、評価者を同伴することもできる。 研究に関する書面および口頭情報に加えて、VEK からのパンフレット「Før du beslutter dig: Om at være forsøgsperson i sundhedsvidenskabeligt forskningsprojekt」とパンフレット「Forsøgspersonens rettigheder i et sundhedsvidenskabeligt forskningsprojekt」が保護者に届けられます。 保護者が同意した場合は、インフォームドコンセントフォームのコピーを受け取ります。

可能であれば、インフォームドコンセントに署名する前に、手術の待機期間中に数時間の検討期間が設けられます。 参加者が検討する時間を必要としない場合は、説明会の直後に、参加者の母親、または参加者の両親と研究者（または研究者からこの責任を割り当てられた研究チーム）がインフォームド・コンセントの宣言書に署名することができます。 。 インフォームドコンセントに署名すると、参加者にはコピーが提供されます。 署名されたインフォームドコンセントは、研究関連の手順を開始するための前提条件です。