Uusi sildenafiilia sisältävien nanokantajien formulaatio alopecia Areatan hoitoon

Tämän työn tavoitteena oli optimoida sildenafiililla ladattuja liposomeja, jotka voisivat tehostaa sildenafiilin ihon kautta imeytymistä ja follikkelien tunkeutumista saavuttaen parantuneen terapeuttisen tehokkuuden minimaalisilla tarpeettomilla sivuvaikutuksilla suun kautta antamisen vuoksi.

Lisäksi tutkimuksessa pyrittiin arvioimaan paikallisen sildenafiilia sisältävän liposomiformulaation tehokkuutta paikalliseen minoksidiilihoitoon verrattuna päänahan hajanaisen AA:n hoidossa tutkimalla sen kliinisiä vaikutuksia sekä dermoskooppisia löydöksiä.

Materiaalit Lipoid S75 (fosfatidyylikoliini (70 %) rasvattomilla soijapavun fosfolipideillä) lahjoitti ystävällisesti lipoidiyhtiöltä (Saksa). Sildenafiilisitraatti ostettiin Fagron Iberica SAU:lta. Asetonitriili-HPLC-reagenssi ostettiin Fisher Chemicalilta. Ultrapuhdas vesi oli. Kolesteroli ostettiin Fluka Chemical Co.:lta. (Intia). Etanoli (absoluuttinen) ostettiin El-Nasr Pharmaceuticalsilta (Egypti). Kaikki reagenssit ja kemikaalit ostettiin yhtiöltä (Sigma Aldrich).

Metodologia SIL-LIP:n valmistus ruiskutustekniikalla SIL-LIP formuloitiin ruiskutusmenetelmällä. Ennalta lasketut määrät Lipoid s75:tä, kolesterolia ja sildenafiilia liuotettiin 2 ml:aan absoluuttista etanolia ja valmistettu liuos siirrettiin suihkutuslaitteeseen [20]. Suljetussa järjestelmässä sildenafiilin ja lipidien alkoholiliuos ruiskutettiin (100 ul ruiskutettiin 10 sekunnin välein) 2 ml:n sakkaroosia sisältävän tislatun veden pinnalle (9 % w/v) sekoittaen nopeudella 1250 rpm 25 ºC:ssa. pidettiin, kunnes etanoli oli haihtunut täydellisesti. Muodostuneiden liposomien täydellisen pariutumisen takaamiseksi SIL-LIP pidettiin 4 °C:ssa yön yli [21]. SIL-LIP kuvattiin käyttämällä (JEM-1400,-Jeol,-Tokio,-Japani) 80 kV:ssa. SIL-LIP jätettiin 10 minuutiksi 25 °C:seen ennen tutkimusta hiilipinnoitetulla kupariverkolla.

Hiukkaskoon mittaus Jotta saataisiin enemmän käsitystä koosta ja kokojakaumasta, käytettiin laservalodiffraktiota. Valmistetut SIL-LIP laimennettiin deionisoidulla vedellä ja analysoitiin Mastersizer 3000E Malvern Instrumentsilla, UK 25 °C:ssa. Tuloksena oli kolmen toistetun arvon keskiarvo.

Valmistettujen liposomien kiinniottotehokkuus (E.E).

EE-prosentti määritettiin sentrifugoimalla liposomisuspensiota nopeudella 1 000 rpm 45 minuuttia 4 °C:ssa suljetun sildenafiilin eristämiseksi supernatantista EE-prosentin epäsuoraa määritystä varten. Sildenafiilin määrä supernatantissa määritettiin UV-spektrofotometrillä (Spectronic Genesys®, Winspec Software, Spectronic, USA) 228 nm:ssä. EE (%) laskettiin seuraavasti:

EE (%) = [(Qi -Qs)/Qt] × 100 missä Qi on valmistuksen aikana lisätyn sildenafiilin alkuperäinen määrä ja Qs on sildenafiilin määrä, joka on määritetty supernatantista sentrifugoinnin jälkeen. Kliininen tutkimus Prospektiivinen satunnaistettu kontrolloitu tutkimus suoritettiin Assiutin yliopistollisen sairaalan ihotautiosasto, mukaan lukien 10–40-vuotiaat potilaat, joilla on hajanainen päänahan AA. Potilaat, joilla oli alopecia totalis/universalis tai ophiasis, systeemisiä ja/tai muita dermatologisia sairauksia sekä potilaat, jotka olivat saaneet AA-hoitoa edellisten 3 kuukauden aikana, suljettiin pois.

Tämä tutkimus tehtiin Helsingin julistuksen ohjeiden mukaisesti ja tutkimussuunnitelman hyväksyi Assiut-yliopiston lääketieteellisen tiedekunnan tutkimuseettinen toimikunta (IRB no. 17300458). Kaikilta potilailta hankittiin tietoinen suostumus ennen ilmoittautumista.

Ensimmäisellä käynnillä kaikille potilaille tehtiin täydellinen historia ja perusteellinen kliininen tutkimus. Diagnoosi tehtiin sekä kliinisen että dermoskooppisen tutkimuksen perusteella.

Hoitoprotokolla

Potilaat jaettiin satunnaisesti käyttämään joko paikallisesti 5 % minoksidiiligeeliä tai paikallisesti 1 % sildenafiilia sisältäviä liposomeja kahdesti päivässä 8 viikon ajan.

Arviointikriteerit

Kliininen arviointi suoritettiin vertaamalla leesioista otettuja sarjakuvia perustilanteisiin. Alopecia Tool (SALT) -pistemäärä laskettiin lähtötilanteessa, 4 viikon ja 8 viikon kohdalla, ja hiusten uudelleenkasvun keskimääräinen prosenttiosuus määritettiin käyttämällä hiusten uudelleenkasvun SALT-pisteytysjärjestelmää ja arvosanaksi A0: ei muutosta tai lisää hiuksia hiustenlähtö, A1: 1-24% hiusten uudelleenkasvu, A2: 25-49% hiusten uudelleenkasvu, A3: 50-74% hiusten uudelleenkasvu, A4: 75-99% hiusten uudelleenkasvu ja A5: 100% hiukset uudelleen kasvua.

Dermoskooppinen tutkimus suoritettiin ennen hoitoa ja 4. ja 8. viikon kohdalla käyttäen kädessä pidettävää dermoskooppia (DermLite DL4, 3Gen, Inc., San Juan Capistrano, CA 92675). Perustilan ja hoidon jälkeiset digitaaliset valokuvat dermoskooppisista kentistä otettiin iPhone 6S -älypuhelinkameralla. AA:n dermoskooppisia ominaisuuksia arvioitiin mukaan lukien keltaiset pisteet, mustat pisteet, katkenneet hiukset, huutomerkkikarvat, lyhyet velluskarvat ja uudelleen kasvavat hiukset. Kaksi dermoskooppista kenttää tutkittiin; toinen keskeltä ja toinen kaljuuntuman laastarin kello 3 kohdalla. Trikoskooppiset parametrit kussakin kentässä arvioitiin ja kvantifioitiin.

Data-analyysi suoritettiin käyttämällä SPSS-ohjelmistoversiota 24 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA). Kvalitatiivisten ja kvantitatiivisten tietojen vertailuun käytettiin Chi-neliö-testiä ja Mann-Whitney-testiä. P < 0,05 katsottiin tilastollisesti merkitseväksi.