Новая формула наноносителей с силденафилом для лечения очаговой алопеции

Целью настоящей работы была оптимизация липосом, нагруженных силденафилом, которые могли бы улучшить чрескожную абсорбцию и фолликулярное проникновение силденафила, достигая улучшенной терапевтической эффективности с минимальными ненужными побочными эффектами при пероральном применении.

Кроме того, исследование было направлено на оценку эффективности местного применения липосом, нагруженных силденафилом, по сравнению с местной терапией миноксидилом для лечения очагового АА кожи головы путем изучения его клинических эффектов наряду с данными дерматоскопии.

Материалы Lipoid S75 (фосфатидилхолин (70 %) с обезжиренными фосфолипидами сои) любезно предоставлен компанией Lipoid (Германия). Цитрат силденафила был приобретен у компании Fagron Iberica SAU. Ацетонитриловый реагент для ВЭЖХ был приобретен у Fisher Chemical. Сверхчистая вода была. Холестерин был приобретен у компании Fluka Chemical Co. (Индия). Этанол (абсолютный) был приобретен у El-Nasr Pharmaceuticals (Египет). Все реагенты и химикаты были приобретены у компании (Sigma Aldrich).

Методология. Получение SIL-LIP методом распыления. SIL-LIP готовили методом распыления. Предварительно рассчитанные количества Липоида s75, холестерина и силденафила растворяли в 2 мл абсолютного этанола и приготовленный раствор переносили в распылительный аппарат [20]. В закрытой системе спиртовой раствор силденафила и липидов распыляли (100 мкл распыляли каждые 10 секунд) на поверхность 2 мл дистиллированной воды, содержащей сахарозу (9% мас./об.), при перемешивании со скоростью 1250 об/мин при 25°С. поддерживали до полного испарения этанола. Чтобы гарантировать полный отжиг образовавшихся липосом, SIL-LIP выдерживали в течение ночи при 4°C [21]. Изображения SIL-LIP были получены с использованием (JEM-1400,-Jeol,-Tokyo,-Japan), поддерживаемого при напряжении 80 кВ. SIL-LIP оставляли на десять минут при температуре 25°C перед исследованием на медной сетке с углеродным покрытием.

Измерение размера частиц. Чтобы лучше понять размер и распределение частиц, была использована дифракция лазерного света. Подготовленные SIL-LIP разбавляли деионизированной водой и анализировали с помощью Mastersizer 3000E Malvern Instruments, UK при 25°С. Результатом было среднее из трех повторяющихся значений.

Эффективность захвата (EE) приготовленных липосом

EE% определяли центрифугированием липосомальной суспензии при 1000 об/мин в течение 45 минут при 4°C для выделения незахваченного силденафила в супернатанте для непрямого определения EE%. Количество силденафила в супернатанте определяли с помощью УФ-спектрофотометра (Spectronic Genesys®, Winspec Software, Spectronic, США) при 228 нм. ЭЭ (%) рассчитывали следующим образом:

EE (%) = [(Qi -Qs)/Qt] × 100, где Qi — исходное количество силденафила, добавленного во время приготовления, а Qs — количество силденафила, определенное в супернатанте после центрифугирования. Клиническое исследование. Проспективное рандомизированное контролируемое исследование было проведено в отделение дерматологии Университетской больницы Асьюта, включая пациентов с очаговой АА кожи головы в возрасте от 10 до 40 лет. Из исследования были исключены пациенты с тотальной/универсальной алопецией или офиазом, пациенты с системными и/или другими дерматологическими заболеваниями и те, кто получал лечение по поводу АА в течение предыдущих 3 месяцев.

Данное исследование было проведено в соответствии с руководящими принципами Хельсинкской декларации, а протокол исследования был одобрен Комитетом по этике исследований медицинского факультета Университета Асьюта (IRB №. 17300458). Перед включением в исследование от всех пациентов было получено информированное согласие.

При первом визите всем пациентам был проведен полный сбор анамнеза и тщательное клиническое обследование. Диагноз был установлен на основании клинического и дерматоскопического обследования.

Протокол лечения

Пациенты были рандомизированы для использования либо 5% геля миноксидила для местного применения, либо липосом для местного применения, наполненных 1% силденафилом, два раза в день в течение 8 недель.

Критерии оценки

Клиническую оценку проводили путем сравнения серийных фотографий поражений с исходными. Оценка тяжести алопеции (SALT) рассчитывалась исходно, через 4 и 8 недель, а средний процент повторного роста волос определялся с использованием системы оценки SALT для повторного роста волос и оценивался как A0: отсутствие изменений или дальнейшее появление волос. выпадение волос, A1: возобновление роста волос на 1–24%, A2: возобновление роста волос на 25–49%, A3: возобновление роста волос на 50–74%, A4: возобновление роста волос на 75–99% и A5: 100% волос. повторный рост.

Дерматоскопическое исследование проводилось до лечения, а также через 4 и 8 недель с использованием ручного дерматоскопа (DermLite DL4, 3Gen, Inc., Сан-Хуан-Капистрано, Калифорния 92675). Исходные и посттерапевтические цифровые фотографии дерматоскопических полей были сделаны с помощью камеры смартфона iPhone 6S. Были оценены дерматоскопические признаки АА, включая желтые точки, черные точки, сломанные волосы, волосы с восклицательным знаком, короткие пушковые волосы и вновь отрастающие волосы. Были исследованы два дерматоскопических поля; один из центра, а другой в положении «3 часа» пятна алопеции. Трихоскопические параметры в каждом поле оценивали и количественно определяли.

Анализ данных проводился с использованием программного обеспечения SPSS версии 24 (SPSS Inc., Чикаго, Иллинойс, США). Критерий Хи-квадрат и критерий Манна-Уитни использовались для сравнения качественных и количественных данных соответственно. P <0,05 считалось статистически значимым.