Una nueva formulación de nanoportadores cargados de sildenafil para el tratamiento de la alopecia areata

El objetivo del presente trabajo fue optimizar los liposomas cargados de sildenafil que podrían mejorar la absorción percutánea y la penetración folicular de sildenafil logrando una mejor eficiencia terapéutica con mínimos efectos secundarios innecesarios debido a la administración oral.

Además, el estudio tuvo como objetivo evaluar la eficacia de la formulación tópica de liposomas cargados con sildenafil en comparación con la terapia tópica con minoxidil para el tratamiento de la AA irregular del cuero cabelludo mediante el examen de sus efectos clínicos junto con los hallazgos dermatoscópicos.

Materiales Lipoid S75 (fosfatidilcolina (70 %) con fosfolípidos de soja sin grasa) fue donado amablemente por la compañía lipoid (Alemania). El citrato de sildenafil se adquirió de Fagron Ibérica SAU. El reactivo de HPLC de acetonitrilo se adquirió de Fisher Chemical. El agua ultrapura lo era. El colesterol se adquirió de Fluka Chemical Co. (India). El etanol (absoluto) se adquirió de El-Nasr Pharmaceuticals (Egipto). Todos los reactivos y productos químicos se adquirieron en (Sigma Aldrich).

Metodología Preparación de SIL-LIP mediante la técnica de pulverización Los SIL-LIP se formularon mediante el método de pulverización. Se disolvieron cantidades previamente calculadas de Lipoid s75, colesterol y sildenafil en 2 ml de etanol absoluto y la solución preparada se transfirió a un aparato de pulverización [20]. En un sistema cerrado, se roció la solución alcohólica de sildenafil y lípidos (se rociaron 100 ul cada 10 segundos) sobre la superficie de 2 ml de agua destilada que contenía sacarosa (9% p/v) con agitación a 1250 rpm a 25ºC. Se mantuvo hasta la completa evaporación del etanol. Para garantizar el recocido completo de los liposomas formados, los SIL-LIP se mantuvieron a 4°C durante la noche [21]. Se tomaron imágenes de SIL-LIP utilizando (JEM-1400, -Jeol, -Tokio, -Japón) mantenido a 80 kV. SIL-LIP se dejó durante diez minutos a 25°C antes de examinarlo en una rejilla de cobre recubierta de carbono.

Medición del tamaño de partículas Para obtener más información sobre el tamaño y la distribución del tamaño, se empleó la difracción de luz láser. Los SIL-LIP preparados se diluyeron con agua desionizada y se analizaron con Mastersizer 3000E Malvern Instruments, Reino Unido a 25°C. El resultado fue el promedio de tres valores repetidos.

Eficiencia de atrapamiento (E.E) de liposomas preparados.

El % de EE se determinó mediante centrifugación de la suspensión liposomal a 1.000 rpm durante 45 minutos a 4 °C para aislar el sildenafil no atrapado en el sobrenadante para la determinación indirecta del % de EE. La cantidad de sildenafil en el sobrenadante se determinó mediante espectrofotómetro UV (Spectronic Genesys®, Winspec Software, Spectronic, EE. UU.) a 228 nm. EE (%) se calculó de la siguiente manera:

EE (%) = [(Qi -Qs)/Qt] × 100 donde Qi es la cantidad inicial de sildenafil añadido durante la preparación y Qs es la cantidad de sildenafil determinada en el sobrenadante después de la centrifugación Estudio clínico Se realizó un estudio prospectivo, aleatorizado y controlado en el departamento de Dermatología del Hospital Universitario de Assiut, incluidos pacientes con AA irregular en el cuero cabelludo, con edades comprendidas entre 10 y 40 años. Se excluyeron los pacientes con alopecia total/universal u ofiasis, aquellos con enfermedades sistémicas y/u otras enfermedades dermatológicas y aquellos que recibieron tratamiento para AA en los 3 meses anteriores.

Este estudio se realizó de conformidad con las directrices de la Declaración de Helsinki y el protocolo del estudio fue aprobado por el Comité de Ética en Investigación de la Facultad de Medicina de la Universidad de Assiut (IRB no. 17300458). Se obtuvo el consentimiento informado de todos los pacientes antes de la inscripción.

En la visita inicial, se realizó una historia clínica completa y un examen clínico exhaustivo a todos los pacientes. El diagnóstico se estableció basándose tanto en el examen clínico como en el dermatoscópico.

Protocolo de tratamiento

Los pacientes fueron asignados aleatoriamente para usar gel de minoxidil tópico al 5% o liposomas cargados de sildenafil al 1% dos veces al día durante un período de 8 semanas.

Criterios de evaluación

La evaluación clínica se realizó mediante la comparación de fotografías seriadas de las lesiones con las iniciales. La puntuación de la herramienta de gravedad de la alopecia (SALT) se calculó al inicio del estudio, a las 4 semanas y a las 8 semanas, y el porcentaje promedio de crecimiento del cabello se determinó utilizando el sistema de puntuación SALT para el crecimiento del cabello y se calificó como A0: sin cambios o más cabello. pérdida, A1: 1-24 % de nuevo crecimiento del cabello, A2: 25-49 % de nuevo crecimiento del cabello, A3: 50-74 % de nuevo crecimiento del cabello, A4: 75-99 % de nuevo crecimiento del cabello, y A5: 100 % de cabello recrecimiento.

El examen dermatoscópico se realizó antes del tratamiento y a las 4 y 8 semanas, utilizando el dermoscopio portátil (DermLite DL4, 3Gen, Inc., San Juan Capistrano, CA 92675). Se tomaron fotografías digitales iniciales y posteriores a la terapia de los campos dermatoscópicos utilizando la cámara de un teléfono inteligente iPhone 6S. Se evaluaron las características dermatoscópicas de AA, incluidos puntos amarillos, puntos negros, cabello roto, pelos con signos de exclamación, pelo velloso corto y pelo que vuelve a crecer. Se examinaron dos campos dermatoscópicos; uno desde el centro y el otro en la posición de las 3 en punto del parche de alopecia. Se evaluaron y cuantificaron los parámetros tricoscópicos en cada campo.

El análisis de los datos se realizó utilizando el software SPSS versión 24 (SPSS Inc., Chicago, IL, EE. UU.). Se utilizaron la prueba de Chi-cuadrado y la prueba de Mann-Whitney para comparar datos cualitativos y cuantitativos, respectivamente. P <0,05 se consideró estadísticamente significativo.