Nowatorska formuła nanonośników zawierających sildenafil do leczenia łysienia plackowatego

Celem niniejszej pracy była optymalizacja liposomów obciążonych sildenafilem, które mogłyby zwiększyć wchłanianie przezskórne i przenikanie syldenafilu do pęcherzyków, uzyskując lepszą skuteczność terapeutyczną przy minimalnych niepotrzebnych skutkach ubocznych związanych z podawaniem doustnym.

Ponadto badanie miało na celu ocenę skuteczności stosowanego miejscowo preparatu liposomów zawierającego sildenafil w porównaniu z miejscową terapią minoksydylem w leczeniu niejednolitego AA skóry głowy, poprzez badanie jego skutków klinicznych wraz z wynikami badań dermoskopowych.

Materiały Lipoid S75 (fosfatydylocholina (70%) z beztłuszczowymi fosfolipidami z soi) został udostępniony dzięki uprzejmości firmy lipoid (Niemcy). Cytrynian sildenafilu zakupiono od Fagron Iberica SAU. Odczynnik HPLC na bazie acetonitrylu zakupiono od Fisher Chemical. Była ultraczysta woda. Cholesterol zakupiono od Fluka Chemical Co. (Indie). Etanol (absolutny) zakupiono od El-Nasr Pharmaceuticals (Egipt). Wszystkie odczynniki i chemikalia zakupiono od (Sigma Aldrich).

Metodologia Wytwarzanie SIL-LIP techniką natryskową SIL-LIP wytworzono metodą natryskową. Wstępnie obliczone ilości Lipoid s75, cholesterolu i sildenafilu rozpuszczono w 2 ml absolutnego etanolu i przygotowany roztwór przeniesiono do aparatury rozpylającej [20]. W układzie zamkniętym alkoholowy roztwór sildenafilu i lipidów natryskiwano (100 ul rozpylano co 10 sekund) na powierzchnię 2 ml wody destylowanej zawierającej sacharozę (9% w/v), mieszając przy 1250 obr/min w temperaturze 25°C. Mieszanie utrzymywano aż do całkowitego odparowania etanolu. Aby zagwarantować całkowite przyłączenie utworzonych liposomów, SIL-LIP trzymano przez noc w temperaturze 4°C [21]. SIL-LIP obrazowano przy użyciu (JEM-1400, -Jeol, -Tokio, -Japonia) utrzymywanego przy 80 kV. SIL-LIP pozostawiono na dziesięć minut w temperaturze 25°C przed badaniem na siatce miedzianej pokrytej węglem.

Pomiar wielkości cząstek Aby uzyskać lepszy wgląd w wielkość i rozkład wielkości cząstek, zastosowano dyfrakcję światła laserowego. Przygotowany SIL-LIP rozcieńczono wodą dejonizowaną i analizowano za pomocą Mastersizer 3000E Malvern Instruments, Wielka Brytania w temperaturze 25°C. Wynik stanowiła średnia z trzech powtarzających się wartości.

Skuteczność uwięzienia (EE) przygotowanych liposomów

Zawartość EE% oznaczono przez wirowanie zawiesiny liposomalnej przy 1000 obr./min przez 45 minut w temperaturze 4°C w celu wyizolowania niezamkniętego sildenafilu w supernatancie w celu pośredniego oznaczenia EE%. Ilość sildenafilu w supernatancie oznaczono za pomocą spektrofotometru UV (Spectronic Genesys®, Winspec Software, Spectronic, USA) przy 228 nm. EE (%) obliczono w następujący sposób:

EE (%) = [(Qi -Qs)/Qt] × 100 gdzie Qi to początkowa ilość syldenafilu dodana podczas przygotowania, a Qs to ilość sildenafilu oznaczona w supernatancie po odwirowaniu. Badanie kliniczne. Prospektywne, randomizowane badanie kontrolowane przeprowadzono w oddział dermatologii Szpitala Uniwersyteckiego w Assiut obejmujący pacjentów z niejednolitym AA skóry głowy, w wieku od 10 do 40 lat. Wykluczono pacjentów cierpiących na łysienie całkowite/uniwersalne lub ophiasis, osoby z chorobami ogólnoustrojowymi i/lub innymi chorobami dermatologicznymi oraz osoby leczone z powodu AA w ciągu ostatnich 3 miesięcy.

Niniejsze badanie przeprowadzono zgodnie z wytycznymi Deklaracji Helsińskiej, a protokół badania został zatwierdzony przez Komisję ds. Etyki Badań Naukowych Wydziału Lekarskiego Uniwersytetu Assiut (IRB nr 1). 17300458). Od wszystkich pacjentów uzyskano świadomą zgodę przed rejestracją.

Podczas pierwszej wizyty u wszystkich pacjentów przeprowadzono pełny wywiad i dokładne badanie kliniczne. Rozpoznanie ustalono na podstawie badania klinicznego i dermoskopowego.

Protokół leczenia

Pacjenci zostali losowo przydzieleni do stosowania miejscowego 5% żelu minoksydylowego lub miejscowych liposomów zawierających 1% sildenafilu dwa razy dziennie przez okres 8 tygodni.

Kryteria oceny

Ocenę kliniczną przeprowadzono poprzez porównanie zdjęć seryjnych zmian z zdjęciami wyjściowymi. Obliczono punktację w skali SALT (ang. Severity of Alopecia Tool) na początku badania, po 4 tygodniach i 8 tygodniach, a średni procent odrostu włosów określono za pomocą systemu punktacji SALT dla odrostu włosów i sklasyfikowano jako A0: brak zmian lub dalsze owłosienie utrata, A1: 1-24% odrost włosów, A2: 25-49% odrost włosów, A3: 50-74% odrost włosów, A4: 75-99% odrost włosów i A5: 100% włosów ponowny wzrost.

Badanie dermoskopowe przeprowadzono przed leczeniem oraz po 4 i 8 tygodniach przy użyciu ręcznego dermoskopu (DermLite DL4, 3Gen, Inc., San Juan Capistrano, CA 92675). Cyfrowe zdjęcia pól dermoskopowych w stanie wyjściowym i po terapii wykonano aparatem w smartfonie iPhone 6S. Oceniono cechy dermoskopowe AA, w tym żółte i czarne kropki, połamane włosy, wykrzykniki, krótkie włosy welusowe i odrastające włosy. Zbadano dwa pola dermoskopowe; jeden od środka, a drugi na godzinie trzeciej płata łysienia. Oceniono i określono ilościowo parametry trichoskopowe w każdym polu.

Analizę danych przeprowadzono przy użyciu oprogramowania SPSS w wersji 24 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA). Do porównania danych jakościowych i ilościowych wykorzystano odpowiednio test Chi-kwadrat i test Manna-Whitneya. Za istotny statystycznie uznano P < 0,05.