Eine neuartige Formulierung von Sildenafil-beladenen Nanoträgern zur Behandlung von Alopecia Areata

Das Ziel der vorliegenden Arbeit bestand darin, mit Sildenafil beladene Liposomen zu optimieren, die die perkutane Absorption und follikuläre Penetration von Sildenafil verbessern und eine verbesserte therapeutische Effizienz bei minimalen unnötigen Nebenwirkungen aufgrund der oralen Verabreichung erreichen könnten.

Darüber hinaus zielte die Studie darauf ab, die Wirksamkeit einer topischen Sildenafil-beladenen Liposomenformulierung im Vergleich zur topischen Minoxidil-Therapie zur Behandlung von fleckiger AA der Kopfhaut durch Untersuchung ihrer klinischen Wirkungen zusammen mit dermatoskopischen Befunden zu bewerten.

Materialien Lipoid S75 (Phosphatidylcholin (70 %) mit fettfreien Sojabohnen-Phospholipiden) wurde freundlicherweise von der Lipoid-Firma (Deutschland) gespendet. Sildenafilcitrat wurde von Fagron Iberica SAU bezogen. Acetonitril-HPLC-Reagenz wurde von Fisher Chemical gekauft. Reinstwasser war. Cholesterin wurde von Fluka Chemical Co. bezogen. (Indien). Ethanol (absolut) wurde von El-Nasr Pharmaceuticals (Ägypten) bezogen. Alle Reagenzien und Chemikalien wurden von (Sigma Aldrich) bezogen.

Methodik: Herstellung von SIL-LIP mithilfe der Sprühtechnik. SIL-LIP wurde mithilfe der Sprühmethode formuliert. Vorberechnete Mengen an Lipoid s75, Cholesterin und Sildenafil wurden in 2 ml absolutem Ethanol gelöst und die vorbereitete Lösung in ein Sprühgerät überführt [20]. In einem geschlossenen System wurde die alkoholische Lösung von Sildenafil und Lipiden unter Rühren bei 1250 U/min bei 25 °C auf die Oberfläche von 2 ml destilliertem Wasser, das Saccharose (9 % w/v) enthielt, gesprüht (100 μl wurden alle 10 Sekunden gesprüht). wurde bis zur vollständigen Verdampfung des Ethanols beibehalten. Um ein vollständiges Annealing der gebildeten Liposomen zu gewährleisten, wurden SIL-LIP über Nacht bei 4 °C gehalten [21]. SIL-LIP wurden mit (JEM-1400,-Jeol,-Tokio,-Japan) abgebildet, das bei 80 kV gehalten wurde. SIL-LIP wurde vor der Untersuchung auf einem kohlenstoffbeschichteten Kupfergitter zehn Minuten lang bei 25 °C belassen.

Partikelgrößenmessung Um mehr Einblick in Größe und Größenverteilung zu erhalten, wurde Laserlichtbeugung eingesetzt. Die vorbereiteten SIL-LIP wurden mit entionisiertem Wasser verdünnt und mit dem Mastersizer 3000E Malvern Instruments, UK, bei 25 °C analysiert. Das Ergebnis war der Durchschnitt aus drei wiederholten Werten.

Einschlusseffizienz (E.E) von vorbereiteten Liposomen

Der EE-Prozentsatz wurde durch 45-minütige Zentrifugation der Liposomensuspension bei 1.000 U/min und 4 °C bestimmt, um das nicht eingeschlossene Sildenafil im Überstand für die indirekte Bestimmung des EE-Prozentsatzes zu isolieren. Die Menge an Sildenafil im Überstand wurde mit einem UV-Spektrophotometer (Spectronic Genesys®, Winspec Software, Spectronic, USA) bei 228 nm bestimmt. EE (%) wurde wie folgt berechnet:

EE (%) = [(Qi -Qs)/Qt] × 100 wobei Qi die Anfangsmenge des während der Zubereitung hinzugefügten Sildenafils und Qs die im Überstand nach der Zentrifugation bestimmte Sildenafilmenge ist. Klinische Studie Eine prospektive, randomisierte, kontrollierte Studie wurde durchgeführt die Abteilung für Dermatologie des Universitätskrankenhauses Assiut, einschließlich Patienten mit fleckiger AA der Kopfhaut im Alter zwischen 10 und 40 Jahren. Patienten mit Alopecia totalis/universalis oder Ophiasis, Patienten mit systemischen und/oder anderen dermatologischen Erkrankungen und Patienten, die in den letzten drei Monaten wegen AA behandelt wurden, wurden ausgeschlossen.

Diese Studie wurde in Übereinstimmung mit den Richtlinien der Deklaration von Helsinki durchgeführt und das Studienprotokoll wurde von der Forschungsethikkommission der medizinischen Fakultät der Assiut-Universität genehmigt (IRB-Nr. 17300458). Vor der Einschreibung wurde von allen Patienten eine Einverständniserklärung eingeholt.

Beim ersten Besuch wurden für alle Patienten eine vollständige Anamnese und eine gründliche klinische Untersuchung durchgeführt. Die Diagnose wurde sowohl auf der Grundlage einer klinischen als auch einer dermatoskopischen Untersuchung gestellt.

Behandlungsprotokoll

Den Patienten wurde nach dem Zufallsprinzip zugewiesen, dass sie über einen Zeitraum von 8 Wochen zweimal täglich entweder topisches 5 %iges Minoxidil-Gel oder topische 1 %ige mit Sildenafil beladene Liposomen verwenden sollten.

Bewertungskriterien

Die klinische Bewertung erfolgte durch den Vergleich von Serienfotos der Läsionen mit den Ausgangsfotos. Der SALT-Score (Severity of Alopecia Tool) wurde zu Studienbeginn, nach 4 und 8 Wochen berechnet und der durchschnittliche Prozentsatz des Haarnachwuchses mithilfe des SALT-Bewertungssystems für Haarnachwuchs bestimmt und mit A0 bewertet: keine Veränderung oder weitere Haare Haarausfall, A1: 1–24 % Haarwachstum, A2: 25–49 % Haarwachstum, A3: 50–74 % Haarwachstum, A4: 75–99 % Haarwachstum und A5: 100 % Haarwachstum erneutes Wachstum.

Die dermatoskopische Untersuchung wurde vor der Behandlung sowie nach 4 und 8 Wochen mit dem Handdermoskop (DermLite DL4, 3Gen, Inc., San Juan Capistrano, CA 92675) durchgeführt. Mit einer Smartphone-Kamera des iPhone 6S wurden zu Beginn und nach der Therapie digitale Fotos von dermatoskopischen Feldern aufgenommen. Die dermatoskopischen Merkmale von AA wurden bewertet, darunter gelbe Punkte, schwarze Punkte, gebrochenes Haar, Ausrufezeichen-Haare, kurzes Vellushaar und nachwachsendes Haar. Es wurden zwei dermatoskopische Felder untersucht; einer von der Mitte und der andere an der 3-Uhr-Position des Alopezie-Pflasters. Trichoskopische Parameter in jedem Feld wurden ausgewertet und quantifiziert.

Die Datenanalyse wurde mit der SPSS-Software Version 24 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA) durchgeführt. Der Chi-Quadrat-Test und der Mann-Whitney-Test wurden zum Vergleich qualitativer Daten bzw. quantitativer Daten verwendet. P < 0,05 wurde als statistisch signifikant angesehen.