En ny formulering af sildenafilfyldte nanobærere til behandling af alopecia areata

Formålet med dette arbejde var at optimere sildenafil-fyldte liposomer, som kunne forbedre perkutan absorption og follikulær penetration af sildenafil, hvilket opnåede forbedret terapeutisk effektivitet med minimale unødvendige bivirkninger på grund af oral administration.

Derudover havde undersøgelsen til formål at vurdere effektiviteten af ​​topisk sildenafil-fyldte liposomer formulering sammenlignet med topisk minoxidil-terapi til behandling af pletvis AA i hovedbunden gennem undersøgelse af dens kliniske virkninger sammen med dermoskopiske fund.

Materialer Lipoid S75 (phosphatidylcholin (70 %) med fedtfri sojabønnephospholipider) blev venligst doneret af lipoidfirmaet (Tyskland). Sildenafilcitrat blev købt fra Fagron Iberica SAU. Acetonitril HPLC-reagens blev købt fra Fisher Chemical. Ultrarent vand var. Kolesterol blev købt fra Fluka Chemical Co. (Indien). Ethanol (absolut) blev købt fra El-Nasr Pharmaceuticals, (Egypten). Alle reagenser og kemikalier blev købt fra (Sigma Aldrich).

Metode Fremstilling af SIL-LIP ved brug af sprøjteteknik SIL-LIP blev formuleret ved anvendelse af sprøjtemetode. Forudberegnede mængder af Lipoid s75, kolesterol og sildenafil blev opløst i 2 ml absolut ethanol, og den fremstillede opløsning blev overført til et sprøjteapparat [20]. I et lukket system blev den alkoholiske opløsning af sildenafil og lipider sprøjtet (100 ul blev sprøjtet hvert 10. sekund) på overfladen af ​​2 ml destilleret vand indeholdende saccharose (9 % w/v) under omrøring ved 1250 rpm ved 25º C. Omrøring blev opretholdt indtil fuldstændig afdampning af ethanol. For at garantere fuldstændig annealing af de dannede liposomer blev SIL-LIP holdt ved 4°C natten over [21]. SIL-LIP blev afbildet under anvendelse af (JEM-1400,-Jeol,-Tokyo,-Japan) holdt ved 80 kV. SIL-LIP blev efterladt i ti minutter ved 25°C før undersøgelse på kulstofbelagt kobbergitter.

Partikelstørrelsesmåling For at få mere indsigt i størrelse og størrelsesfordeling blev laserlysdiffraktion anvendt. den fremstillede SIL-LIP blev fortyndet med deioniseret vand og blev analyseret med Mastersizer 3000E Malvern Instruments, UK ved 25°C. Resultatet var gennemsnittet af tre gentagne værdier.

Indfangningseffektivitet (E.E) af præparerede liposomer

EE% blev bestemt ved centrifugering af liposomal suspension ved 1.000 rpm i 45 minutter ved 4°C for at isolere den uindesluttede sildenafil i supernatanten til indirekte bestemmelse af EE%. Mængden af ​​sildenafil i supernatanten blev bestemt ved hjælp af UV-spektrofotometer (Spectronic Genesys®, Winspec Software, Spectronic, USA) ved 228 nm. EE (%) blev beregnet som følger:

EE (%) = [(Qi -Qs)/Qt] × 100, hvor Qi er den initiale mængde af sildenafilen tilsat under tilberedning, og Qs er sildenafilmængden bestemt i supernatanten efter centrifugering Klinisk undersøgelse En prospektiv randomiseret kontrolleret undersøgelse blev udført i Dermatologisk afdeling, Assiut Universitetshospital inklusive patienter med pletvis AA i hovedbunden, i alderen mellem 10 og 40 år. Patienter med alopecia totalis/universalis eller ophiasis, dem med systemiske og/eller andre dermatologiske sygdomme og dem, der modtog behandling for AA i de foregående 3 måneder, blev udelukket.

Denne undersøgelse blev udført i overensstemmelse med retningslinjerne i Helsinki-erklæringen, og undersøgelsesprotokollen blev godkendt af Forskningsetisk Komité for Det Medicinske Fakultet, Assiut University (IRB-nr. 17300458). Informeret samtykke blev indhentet fra alle patienter før tilmelding.

Ved det indledende besøg blev der foretaget fuld anamnese og en grundig klinisk undersøgelse for alle patienter. Diagnosen blev stillet ud fra både klinisk og dermoskopisk undersøgelse.

Behandlingsprotokol

Patienterne blev tilfældigt tildelt til at bruge enten topiske 5 % minoxidil gel eller topiske 1 % sildenafil-fyldte liposomer to gange dagligt i en periode på 8 uger.

Vurderingskriterier

Klinisk evaluering blev udført ved sammenligning af seriefotografier af læsionerne med baseline. Sværhedsgraden af ​​Alopecia Tool (SALT)-score blev beregnet ved baseline, 4 uger og 8 uger, og den gennemsnitlige procentdel af hårgenvækst blev bestemt ved hjælp af SALT-scoringssystemet for hårgenvækst og klassificeret som A0: ingen ændring eller yderligere hår tab, A1: 1-24% hårgenvækst, A2: 25-49% hårgenvækst, A3: 50-74% hårgenvækst, A4: 75-99% hårgenvækst og A5: 100% hår genvækst.

Dermoskopisk undersøgelse blev udført før behandling og efter 4 og 8 uger under anvendelse af det håndholdte dermoskop (DermLite DL4, 3Gen, Inc., San Juan Capistrano, CA 92675). Baseline og post-terapi digitale fotografier af dermoskopiske felter blev taget med et iPhone 6S smartphone kamera. Dermoskopiske træk ved AA blev evalueret, herunder gule prikker, sorte prikker, knækket hår, udråbstegnshår, kort vellushår og genvækst hår. To dermoskopiske felter blev undersøgt; den ene fra midten og den anden ved 3-tidens position af alopeciplasteret. Trikoskopiske parametre i hvert felt blev evalueret og kvantificeret.

Dataanalyse blev udført ved hjælp af SPSS-softwareversion 24 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA). Chi-square testen og Mann-Whitney testen blev brugt til sammenligning af henholdsvis kvalitative data og kvantitative data. P < 0,05 blev betragtet som statistisk signifikant.