Een nieuwe formulering van met sildenafil geladen nanodragers voor de behandeling van Alopecia Areata

Het doel van het huidige werk was het optimaliseren van met sildenafil geladen liposomen die de percutane absorptie en folliculaire penetratie van sildenafil zouden kunnen verbeteren, waardoor een verbeterde therapeutische efficiëntie zou worden bereikt met minimale onnodige bijwerkingen als gevolg van orale toediening.

Bovendien was het onderzoek bedoeld om de werkzaamheid van de topische met sildenafil geladen liposomen te beoordelen in vergelijking met topische minoxidiltherapie voor de behandeling van fragmentarische AA van de hoofdhuid door onderzoek van de klinische effecten ervan samen met dermoscopische bevindingen.

Materialen Lipoid S75 (fosfatidylcholine (70%) met vetvrije sojafosfolipiden) werd vriendelijk gedoneerd door lipoid company (Duitsland). Sildenafilcitraat werd gekocht bij Fagron Iberica SAU. Acetonitril-HPLC-reagens werd gekocht bij Fisher Chemical. Ultrapuur water was dat. Cholesterol werd gekocht bij Fluka Chemical Co. (India). Ethanol (absoluut) werd gekocht bij El-Nasr Pharmaceuticals, (Egypte). Alle reagentia en chemicaliën zijn gekocht bij (Sigma Aldrich).

Methodologie Bereiding van SIL-LIP met behulp van de spuittechniek SIL-LIP werd geformuleerd met behulp van de spuitmethode. Vooraf berekende hoeveelheden Lipoid s75, cholesterol en sildenafil werden opgelost in 2 ml absolute ethanol en de bereide oplossing werd overgebracht naar een spuitapparaat [20]. In een gesloten systeem werd de alcoholische oplossing van sildenafil en lipiden onder roeren bij 1250 rpm en 25ºC op het oppervlak van 2 ml gedestilleerd water dat sucrose (9% w/v) bevatte, gesproeid (elke 10 seconden werd 100 µl gesproeid). werd gehandhaafd totdat de ethanol volledig was verdampt. Om volledige gloeien van de gevormde liposomen te garanderen, werd SIL-LIP een nacht bij 4°C gehouden [21]. SIL-LIP werd afgebeeld met behulp van (JEM-1400, -Jeol, -Tokyo, -Japan) gehandhaafd op 80 kV. SIL-LIP werd gedurende tien minuten bij 25°C bewaard vóór onderzoek op een met koolstof gecoat koperrooster.

Deeltjesgroottemeting Om meer inzicht te krijgen in de grootte en de grootteverdeling werd gebruik gemaakt van laserlichtdiffractie. de bereide SIL-LIP werd verdund met gedeïoniseerd water en werd geanalyseerd met Mastersizer 3000E Malvern Instruments, VK bij 25°C. Het resultaat was het gemiddelde van drie herhaalde waarden.

Invangefficiëntie (E.E) van bereide liposomen

Het EE% werd bepaald door centrifugatie van de liposomale suspensie bij 1.000 rpm gedurende 45 minuten bij 4 °C om het niet-ingevangen sildenafil in het supernatant te isoleren voor indirecte bepaling van EE%. De hoeveelheid sildenafil in het supernatant werd bepaald met een UV-spectrofotometer (Spectronic Genesys®, Winspec Software, Spectronic, VS) bij 228 nm. EE (%) werd als volgt berekend:

EE (%) = [(Qi -Qs)/Qt] × 100 waarbij Qi de aanvankelijke hoeveelheid sildenafil is die tijdens de bereiding is toegevoegd en Qs de hoeveelheid sildenafil is die na centrifugatie in het supernatant is bepaald. Klinisch onderzoek Een prospectief gerandomiseerd gecontroleerd onderzoek werd uitgevoerd in de afdeling Dermatologie van het Assiut Universitair Ziekenhuis, inclusief patiënten met fragmentarische AA op de hoofdhuid, tussen 10 en 40 jaar oud. Patiënten met alopecia totalis/universalis of ophiase, patiënten met systemische en/of andere dermatologische ziekten en patiënten die in de voorafgaande drie maanden voor AA werden behandeld, werden uitgesloten.

Dit onderzoek werd uitgevoerd in overeenstemming met de richtlijnen van de Verklaring van Helsinki en het onderzoeksprotocol werd goedgekeurd door de Onderzoeksethische Commissie van de Faculteit der Geneeskunde, Assiut Universiteit (IRB nr. 17300458). Voorafgaand aan de inschrijving werd van alle patiënten geïnformeerde toestemming verkregen.

Bij het eerste bezoek werd bij alle patiënten een volledige anamnese afgenomen en een grondig klinisch onderzoek uitgevoerd. De diagnose werd gesteld op basis van zowel klinisch als dermoscopisch onderzoek.

Behandelingsprotocol

Patiënten werden willekeurig toegewezen om ofwel topische 5% minoxidil-gel ofwel topische 1% sildenafil-geladen liposomen tweemaal daags te gebruiken gedurende een periode van 8 weken.

Beoordelingscriteria

Klinische evaluatie werd uitgevoerd door seriële foto's van de laesies te vergelijken met de basisfoto's. De Severity of Alopecia Tool (SALT)-score werd berekend op basis van 4 weken en 8 weken en het gemiddelde percentage haargroei werd bepaald met behulp van het SALT-scoresysteem voor haargroei en beoordeeld als A0: geen verandering of meer haargroei. haarverlies, A1: 1-24% haarhergroei, A2: 25-49% haarhergroei, A3: 50-74% haarhergroei, A4: 75-99% haarhergroei, en A5: 100% haar hergroei.

Dermoscopisch onderzoek werd vóór de behandeling en na 4 en 8 weken uitgevoerd met behulp van de draagbare dermoscoop (DermLite DL4, 3Gen, Inc., San Juan Capistrano, CA 92675). Digitale basisfoto's en post-therapie-foto's van dermoscopische velden werden gemaakt met behulp van een iPhone 6S-smartphonecamera. Dermoscopische kenmerken van AA werden geëvalueerd, waaronder gele stippen, zwarte stippen, gebroken haar, uitroeptekenharen, kort vellushaar en teruggroeiend haar. Er werden twee dermoscopische velden onderzocht; één vanuit het midden en de andere op de 3-uurpositie van de alopecia-pleister. Trichoscopische parameters in elk veld werden geëvalueerd en gekwantificeerd.

Gegevensanalyse werd uitgevoerd met behulp van de SPSS-softwareversie 24 (SPSS Inc., Chicago, IL, VS). De Chi-kwadraattest en Mann-Whitney-test werden gebruikt voor het vergelijken van respectievelijk kwalitatieve gegevens en kwantitatieve gegevens. P <0,05 werd als statistisch significant beschouwd.