En ny formulering av sildenafilladdade nanobärare för behandling av alopecia areata

Syftet med detta arbete var att optimera sildenafil-laddade liposomer som kunde förbättra perkutan absorption och follikelpenetration av sildenafil för att uppnå förbättrad terapeutisk effektivitet med minimala onödiga biverkningar på grund av oral administrering.

Dessutom syftade studien till att bedöma effekten av topikal sildenafil-laddade liposomerformulering jämfört med topikal minoxidilterapi för behandling av fläckvis AA i hårbotten genom undersökning av dess kliniska effekter tillsammans med dermoskopiska fynd.

Material Lipoid S75 (fosfatidylkolin (70 %) med fettfria sojabönfosfolipider) donerades vänligt av lipoidföretaget (Tyskland). Sildenafilcitrat köptes från Fagron Iberica SAU. Acetonitril HPLC-reagens köptes från Fisher Chemical. Ultrarent vatten var. Kolesterol köptes från Fluka Chemical Co. (Indien). Etanol (absolut) köptes från El-Nasr Pharmaceuticals, (Egypten). Alla reagenser och kemikalier köptes från (Sigma Aldrich).

Metodologi Framställning av SIL-LIP med användning av sprayteknik SIL-LIP formulerades med användning av spraymetoden. Förberäknade mängder av Lipoid s75, kolesterol och sildenafil löstes i 2 ml absolut etanol och den beredda lösningen överfördes till en sprayapparat [20]. I ett slutet system sprayades den alkoholhaltiga lösningen av sildenafil och lipider (100 ul sprayades var 10:e sekund) på ytan av 2 ml destillerat vatten innehållande sackaros (9 % vikt/volym) under omrörning vid 1250 rpm vid 25°C. Omröring bibehölls tills fullständig avdunstning av etanol. För att garantera fullständig hybridisering av de bildade liposomerna hölls SIL-LIP vid 4°C över natten [21]. SIL-LIP avbildades med användning av (JEM-1400,-Jeol,-Tokyo,-Japan) hölls vid 80 kV. SIL-LIP lämnades i tio minuter vid 25°C före undersökning på kolbelagt koppargaller.

Mätning av partikelstorlek För att få mer insikt i storlek och storleksfördelning användes laserljusdiffraktion. den beredda SIL-LIP späddes med avjoniserat vatten och analyserades med Mastersizer 3000E Malvern Instruments, UK vid 25°C. Resultatet var medelvärdet av tre upprepade värden.

Infångningseffektivitet (E.E) av preparerade liposomer

EE% bestämdes genom centrifugering av liposomal suspension vid 1 000 rpm under 45 min vid 4°C för att isolera den oinfångade sildenafilen i supernatanten för indirekt bestämning av EE%. Mängden sildenafil i supernatanten bestämdes med UV-spektrofotometer (Spectronic Genesys®, Winspec Software, Spectronic, USA) vid 228 nm. EE (%) beräknades enligt följande:

EE (%). dermatologiska avdelningen, Assiut Universitetssjukhus inklusive patienter med fläckvis AA i hårbotten, i åldern mellan 10 och 40 år. Patienter med alopecia totalis/universalis eller ophiasis, de med systemiska och/eller andra dermatologiska sjukdomar och de som fått behandling för AA under de föregående 3 månaderna exkluderades.

Denna studie genomfördes i enlighet med riktlinjerna i Helsingforsdeklarationen och studieprotokollet godkändes av Medicinska fakultetens forskningsetiska kommitté, Assiut universitet (IRB nr. 17300458). Informerat samtycke erhölls från alla patienter före registreringen.

Vid det första besöket gjordes en fullständig anamnese och en noggrann klinisk undersökning för alla patienter. Diagnosen ställdes utifrån både klinisk och dermoskopisk undersökning.

Behandlingsprotokoll

Patienterna tilldelades slumpmässigt använda antingen topiska 5 % minoxidilgel eller topiska 1 % sildenafilladdade liposomer två gånger dagligen under en period av 8 veckor.

Bedömningskriterier

Klinisk utvärdering utfördes genom jämförelse av seriefotografier av lesionerna med baslinjebilderna. Allvarligheten för Alopecia Tool (SALT)-poängen beräknades vid baslinjen, 4 veckor och 8 veckor och den genomsnittliga andelen håråterväxt bestämdes med hjälp av SALT-poängsystemet för håråterväxt och graderades som A0: ingen förändring eller ytterligare hårstrån avfall, A1: 1-24% håråterväxt, A2: 25-49% håråterväxt, A3: 50-74% håråterväxt, A4: 75-99% håråterväxt och A5: 100% hår återväxt.

Dermoskopisk undersökning utfördes före behandling och efter 4 och 8 veckor med användning av det handhållna dermoskopet (DermLite DL4, 3Gen, Inc., San Juan Capistrano, CA 92675). Digitala baslinjebilder och efterbehandlingsfotografier av dermoskopiska fält togs med en iPhone 6S smartphonekamera. Dermoskopiska egenskaper hos AA utvärderades inklusive gula prickar, svarta prickar, brutet hår, utropstecken, kort vellushår och återväxt hår. Två dermoskopiska fält undersöktes; en från mitten och den andra vid 3-tidens position av alopeciplåstret. Trikoskopiska parametrar i varje fält utvärderades och kvantifierades.

Dataanalys gjordes med användning av SPSS-programvaran version 24 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA). Chi-square-testet och Mann-Whitney-testet användes för jämförelse av kvalitativa data respektive kvantitativa data. P < 0,05 ansågs vara statistiskt signifikant.