Una nuova formulazione di nanocarrier caricati con sildenafil per il trattamento dell'alopecia areata

Lo scopo del presente lavoro era ottimizzare i liposomi caricati di sildenafil che potrebbero migliorare l'assorbimento percutaneo e la penetrazione follicolare del sildenafil ottenendo una migliore efficienza terapeutica con effetti collaterali minimi non necessari dovuti alla somministrazione orale.

Inoltre, lo studio mirava a valutare l'efficacia della formulazione topica di liposomi caricati con sildenafil rispetto alla terapia topica con minoxidil per il trattamento dell'AA a chiazze del cuoio capelluto attraverso l'esame dei suoi effetti clinici insieme ai risultati dermoscopici.

Materiali Lipoid S75 (fosfatidilcolina (70%) con fosfolipidi di soia senza grassi) è stato gentilmente donato dalla società lipoid (Germania). Il citrato di sildenafil è stato acquistato da Fagron Iberica SAU. Il reagente HPLC acetonitrile è stato acquistato da Fisher Chemical. L'acqua ultrapura era. Il colesterolo è stato acquistato dalla Fluka Chemical Co. (India). L'etanolo (assoluto) è stato acquistato da El-Nasr Pharmaceuticals, (Egitto). Tutti i reagenti e i prodotti chimici sono stati acquistati da (Sigma Aldrich).

Metodologia Preparazione di SIL-LIP utilizzando la tecnica di spruzzatura I SIL-LIP sono stati formulati utilizzando il metodo di spruzzatura. Quantità precalcolate di Lipoid s75, colesterolo e sildenafil sono state sciolte in 2 ml di etanolo assoluto e la soluzione preparata è stata trasferita in un apparecchio a spruzzo [20]. In un sistema chiuso, la soluzione alcolica di sildenafil e lipidi è stata spruzzata (100 ul sono stati spruzzati ogni 10 secondi) sulla superficie di 2 ml di acqua distillata contenente saccarosio (9% p/v) agitando a 1250 giri al minuto a 25º C. Agitazione è stata mantenuta fino alla completa evaporazione dell'etanolo. Per garantire la completa ricottura dei liposomi formati, i SIL-LIP sono stati mantenuti a 4°C durante la notte [21]. I SIL-LIP sono stati ripresi utilizzando (JEM-1400,-Jeol,-Tokyo,-Giappone) mantenuto a 80 kV. SIL-LIP è stato lasciato per dieci minuti a 25°C prima dell'esame su griglia di rame rivestita di carbone.

Misurazione delle dimensioni delle particelle Per ottenere maggiori informazioni sulle dimensioni e sulla distribuzione dimensionale, è stata utilizzata la diffrazione della luce laser. i SIL-LIP preparati sono stati diluiti con acqua deionizzata e analizzati con Mastersizer 3000E Malvern Instruments, Regno Unito a 25°C. Il risultato era la media di tre valori ripetuti.

Efficienza di intrappolamento (E.E) dei liposomi preparati

L'EE% è stato determinato mediante centrifugazione della sospensione liposomiale a 1.000 giri/min per 45 minuti a 4 °C per isolare il sildenafil non intrappolato nel surnatante per la determinazione indiretta dell'EE%. La quantità di sildenafil nel surnatante è stata determinata mediante spettrofotometro UV (Spectronic Genesys®, Winspec Software, Spectronic, USA) a 228 nm. L'EE (%) è stato calcolato come segue:

EE (%) = [(Qi -Qs)/Qt] × 100 dove Qi è la quantità iniziale di sildenafil aggiunta durante la preparazione e Qs è la quantità di sildenafil determinata nel surnatante dopo la centrifugazione Studio clinico Uno studio prospettico randomizzato e controllato è stato condotto in Il dipartimento di Dermatologia dell'Ospedale Universitario di Assiut ha incluso pazienti con AA a chiazze del cuoio capelluto, di età compresa tra 10 e 40 anni. Sono stati esclusi i pazienti con alopecia totalis/universalis o ofiasi, quelli con malattie sistemiche e/o altre malattie dermatologiche e quelli sottoposti a trattamento per AA nei 3 mesi precedenti.

Questo studio è stato condotto in conformità con le linee guida della Dichiarazione di Helsinki e il protocollo di studio è stato approvato dal Comitato Etico della Ricerca della Facoltà di Medicina dell'Università di Assiut (IRB n. 17300458). Il consenso informato è stato ottenuto da tutti i pazienti prima dell'arruolamento.

Alla visita iniziale, per tutti i pazienti è stata effettuata l'anamnesi completa e un esame clinico approfondito. La diagnosi è stata stabilita sulla base dell’esame clinico e dermoscopico.

Protocollo di trattamento

I pazienti sono stati assegnati in modo casuale a utilizzare gel topico di minoxidil al 5% o liposomi topici caricati con sildenafil all'1% due volte al giorno per un periodo di 8 settimane.

Criteri di valutazione

La valutazione clinica è stata effettuata confrontando le fotografie seriali delle lesioni con quelle basali. Il punteggio Severity of Alopecia Tool (SALT) è stato calcolato, al basale, a 4 e 8 settimane e la percentuale media di ricrescita dei capelli è stata determinata utilizzando il sistema di punteggio SALT per la ricrescita dei capelli e classificata come A0: nessun cambiamento o ulteriori capelli perdita, A1: 1-24% ricrescita dei capelli, A2: 25-49% ricrescita dei capelli, A3: 50-74% ricrescita dei capelli, A4: 75-99% ricrescita dei capelli e A5: 100% capelli ricrescita .

L'esame dermoscopico è stato effettuato prima del trattamento e dopo 4 e 8 settimane, utilizzando il dermoscopio portatile (DermLite DL4, 3Gen, Inc., San Juan Capistrano, CA 92675). Le fotografie digitali di base e post-terapia dei campi dermoscopici sono state scattate utilizzando la fotocamera di uno smartphone iPhone 6S. Sono state valutate le caratteristiche dermoscopiche dell'AA, inclusi punti gialli, punti neri, capelli spezzati, peli a punto esclamativo, peli vellus corti e peli in ricrescita. Sono stati esaminati due campi dermoscopici; uno dal centro e l'altro a ore 3 della zona dell'alopecia. I parametri tricoscopici in ciascun campo sono stati valutati e quantificati.

L'analisi dei dati è stata eseguita utilizzando il software SPSS versione 24 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA). Il test Chi-quadrato e il test di Mann-Whitney sono stati utilizzati per il confronto rispettivamente di dati qualitativi e dati quantitativi. P <0,05 è stato considerato statisticamente significativo.