Terveyden parannuksia ymmärtämällä sepelvaltimotaudin jäännösriskin määräävät tekijät ja uudet ehkäisy- ja hoitotavoitteet (HURRICANE)

HURRICANE on havainnollinen kliininen tutkimus, joka suoritetaan retrospektiivisille ja prospektiivisille potilaille, joilla on vakaa CAD. Tarkoituksena on arvioida uusien kardiometabolisten ja verisuoniriskin taustatekijöiden roolia vaikean ja etenevän sepelvaltimoiden ateroskleroosin ennustamisessa, joka on dokumentoitu edistyneellä CCT-kuvauksella.

Retrospektiivisen tutkimuksen populaatio koostuu kahdesta rinnakkaisesta, riippumattomasta potilasryhmästä, jotka on otettu mukaan aikaisempiin kliinisiin tutkimuksiin, jotka keskittyivät CAD:n vereen ja CCT-biomarkkereihin. Kaikkien osallistujien soveltuvuus nykyiseen tutkimukseen arvioidaan, mikä sisältää erityisesti verinäytteiden saatavuuden biopankissa ja tulkittavissa olevat CCT-tutkimukset. Kullekin kohortille ja koko retrospektiiviselle populaatiolle (561 potilasta) kliiniset muuttujat (demografiset tiedot, kardiovaskulaariset riskitekijät, aikaisempi sepelvaltimotauti, oireet ja lääkkeet) ja tavanomaiset verenkierrossa olevat biomarkkerit (lipidi- ja glukoosiaineenvaihdunta, systeeminen tulehdus, maksan ja munuaisten toiminta) tallennetaan. Sepelvaltimon kuvantamismuuttujat, jotka antavat taudin esiintymisen ja vaikeusasteen päätepisteet, johdetaan CCT-tutkimusten kvalitatiivisista ja semikvantitatiivisista analyyseistä CAD-RADS 2.0 -luokitusjärjestelmän mukaisesti.

Prospektiivisen pitkittäistutkimuksen populaatio sisältää 400 potilasta, jotka on lähetetty IRCCS SYNLAB SDN:ään Napolissa ja FTGM:ään Pisassa 12 kuukauden aikana kliinisesti indikoituun CCT:hen epäillyn sepelvaltimotaudin vuoksi, allekirjoittamalla kirjallisen suostumuksen ja täyttämällä sisällyttämis- ja poissulkemiskriteerit. Lähtötilanteessa potilaat karakterisoidaan kuten retrospektiivisessä tutkimuksessa (samat kliiniset muuttujat, tavanomaiset kiertävät biomarkkerit ja CCT-kuvausmuuttujat), ja verinäytteitä kerätään ja säilytetään biopankkiin kehittyneitä geneettisiä/molekyylianalyysiä varten. Heille lähetetään seurantakäyntejä ja viimeinen seurantakäynti 12 kuukauden kuluttua, jolloin lääketieteellisen hoidon noudattaminen ja tapahtumat rekisteröidään. Toinen verinäyte kerätään ja säilytetään erityisessä Bio-Bankissa edistyneitä molekyylianalyysejä varten. Toinen CCT-skannaus tehdään 12 kuukauden kuluttua samalla skannerilla samassa laitoksessa käyttämällä huippuluokan CCT-tekniikkaa, jolla on korkea spatiaalinen ja ajallinen erottelukyky, jotta saadaan kvantitatiivisia mittauksia sepelvaltimoplakin tilavuudesta ja sepelvaltimoplakista. koostumus, jota käytetään määrittämään taudin etenemisen päätepisteet.

Radiologit suorittavat CCT-tutkimusten kvalitatiivisia ja semikvantitatiivisia analyyseja CAD-RADS 2.0 -luokitusjärjestelmän mukaisesti sekä retrospektiivisissä että prospektiivisissa populaatioissa. Mahdollisessa väestössä CCT-kuvat ilmoittautumisen ja seurannan yhteydessä analysoidaan myös kvantitatiivisesti kehittyvien CAD-fenotyyppien määrittämiseksi. Kvantitatiivinen analyysi suoritetaan visuaalisesti tunnistetuille plakeille käyttämällä erityistä ohjelmistopakettia (QAngio CT Research Edition versio 3.1.2.0, Medis Medical Imaging Systems, Leiden, Alankomaat) yksityiskohtaisten tulosten luomiseksi ontelo- ja plakkitilastoista, mukaan lukien ahtauman aste. , leesion pituus, suonen tilavuus, plakin kuormitus, plakin tilavuus ja plakin komponentit (virtuaalisen histologisen luokituksen mukaan: tiheä kalsium, nekroottinen ydin, kuitu-rasvainen, kuitumainen ja elatusaine). Arvioidaan myös muita CT-peräisiä parametreja, erityisesti epikardiaalista ja perivaskulaarista rasvakudosta, jotka testataan CAD-evoluution ennustavissa malleissa ja syötetään koneoppimistietoanalyysiin patofysiologisen CAD-verkon mahdollisina muuttujina.

Kierrettävät biomarkkerit arvioidaan kliinisen kemian laboratorioiden standardimenetelmin kahdessa osallistuvassa kliinisessä keskuksessa, ja tietyt kiertävät biomarkkerit analysoidaan IFC-CNR Core-Labissa sekä retrospektiivisissä että tulevissa populaatioissa. Erityisesti lipidiaineenvaihdunnan ja rasvakudoksen toiminnan, endoteelin toiminnan ja ateroskleroottisen kuormituksen lisämarkkereita arvioidaan erityisillä immuunimäärityksillä, kun taas sydänlihaksen vaurion/toiminnan markkereita arvioidaan automatisoiduilla immuunimäärityksillä. Tulehdusprofiili arvioidaan moninkertaisilla sytokiiniseuloilla."Omics" Molemmissa populaatioissa tehtäviin analyyseihin kuuluu lipidominen, kiertävien lipidilajien arvioiminen massaspektrometrialla, ja ulkoisen palveluntarjoajan (Genomix4Life) suorittama geneettinen profilointi GWAS:lla (Genome-Wide Association Study) käyttäen uuden sukupolven mikrosiruteknologiaa yksittäisten ryhmien genotyypitykseen. nukleotidivariantteja (SNV:t). Edustavissa äärimmäisissä potilasryhmissä potentiaalisesta populaatiosta sekvensoidaan erityinen paneeli, jossa on 88 ehdokasgeeniä, jotka osallistuvat lipidi-/glukoosihomeostaasiin, endoteeli-/verisuonitoimintoihin ja systeemiseen tulehdukseen, sekä muiden GWAS-analyysistä ilmenevien relevanttien geenien kanssa. tuntemattomat variantit FTGM:ssä NGS-menetelmällä (Next Generation Sequencing). Kirjaston valmistelu NGS:ää varten suoritetaan käyttämällä Illumina DNA Prep with Enrichment Kit -pakkausta. Base-Space Variant Interpreter -ohjelmistoa käytetään muunnelmien merkitsemiseen, suodattamiseen ja tulkitsemiseen. Patogeenisuusastetta arvioidaan myös VarSomessa (https://varsome.com) ja GWAS-luettelossa (https://www.ebi.ac.uk/gwas/), hakukoneissa ja ihmisen geneettisen variaation vaikutusanalyysityökaluissa. Variantit, jotka on tunnistettu patogeneettisesti merkityksellisiksi koehenkilöillä, joilla on äärimmäisiä fenotyyppejä, arvioidaan sitten muussa populaatiossa. Lisäksi miRNA:t, jotka oletetaan liittyvän relevantteihin geenivariantteihin ja seulotaan in silico bioinformaattisella analyysillä, arvioidaan qPCR:llä.