Улучшение здоровья за счет понимания определяющих факторов остаточного риска при ишемической болезни сердца и новых целей профилактики и лечения (HURRICANE)

HURRICANE — это обсервационное клиническое исследование, проводимое в ретроспективных и проспективных группах пациентов со стабильной ИБС с целью оценки роли новых детерминант кардиометаболического и сосудистого риска для прогнозирования тяжелого и прогрессирующего коронарного атеросклероза, документированного с помощью расширенной компьютерной томографии.

Популяция ретроспективного исследования состоит из двух параллельных независимых групп пациентов, участвовавших в предыдущих клинических исследованиях, посвященных биомаркерам крови и ЦКТ ИБС. Все участники проходят проверку на соответствие критериям участия в текущем исследовании, которое включает в себя, в частности, наличие образцов крови в биобанке и интерпретируемые тесты CCT. Для каждой когорты и для всей ретроспективной популяции (561 пациент) клинические переменные (демографические данные, факторы риска сердечно-сосудистых заболеваний, история предшествующей ИБС, симптомы и лекарства) и традиционные циркулирующие биомаркеры (метаболизм липидов и глюкозы, системное воспаление, функция печени и почек). записаны. Переменные коронарной визуализации, которые обеспечат конечные точки наличия и тяжести заболевания, будут получены на основе качественного и полуколичественного анализа исследований CCT в соответствии с системой классификации CAD-RADS 2.0.

В популяцию проспективного продольного исследования войдут 400 пациентов, направленных в IRCCS SYNLAB SDN в Неаполе и FTGM в Пизе в течение 12 месяцев в клинику CCT по клиническим показаниям с подозрением на ИБС, подписавших письменное информированное согласие и соответствующих критериям включения и исключения. На исходном уровне пациенты будут охарактеризованы так же, как и в ретроспективном исследовании (те же клинические переменные, обычные циркулирующие биомаркеры и переменные визуализации CCT), а образцы крови будут собраны и сохранены в специальном биобанке для расширенного генетического / молекулярного анализа. Они будут направлены на контрольные визиты и последний контрольный визит через 12 месяцев, когда будет зарегистрировано соблюдение медицинского лечения и событий. Второй образец крови будет собран и сохранен в специальном биобанке для расширенного молекулярного анализа. Второе сканирование CCT будет выполнено через 12 месяцев с тем же сканером в том же учреждении с использованием современной технологии CCT с высоким пространственным и временным разрешением для количественного измерения объемов коронарных бляшек и коронарных бляшек. композицию, которая будет использоваться для определения конечных точек прогрессирования заболевания.

Качественный и полуколичественный анализ исследований CCT будет выполняться рентгенологами в соответствии с системой классификации CAD-RADS 2.0 как в ретроспективной, так и в проспективной популяции. В перспективной популяции изображения CCT при зачислении и последующем наблюдении также будут количественно анализироваться для определения развивающихся фенотипов ИБС. Количественный анализ будет проводиться на визуально идентифицируемых бляшках с использованием специального пакета программного обеспечения (QAngio CT Research Edition, версия 3.1.2.0, Medis Medical Imaging Systems, Лейден, Нидерланды) для получения подробных результатов статистики просвета и бляшек, включая степень стеноза. длина поражения, объем сосуда, бляшечная нагрузка, объем бляшки и компоненты бляшки (согласно виртуальной гистологической классификации: плотный кальций, некротическое ядро, фиброзно-жировой, фиброзный и средний). Также будут оцениваться дополнительные параметры, полученные с помощью КТ, в частности эпикардиальная и периваскулярная жировая ткань, которые будут протестированы в прогностических моделях эволюции ИБС и введены в анализ данных машинного обучения в качестве потенциальных переменных патофизиологической сети ИБС.

Циркулирующие биомаркеры будут оцениваться по стандартным методикам лабораторий клинической химии в двух участвующих клинических центрах, а специфические циркулирующие биомаркеры будут анализироваться в базовой лаборатории IFC-CNR как в ретроспективной, так и в проспективной популяции. В частности, дополнительные маркеры липидного обмена и функции жировой ткани, функции эндотелия и атеросклеротической нагрузки будут оцениваться с помощью специальных иммуноанализов, а маркеры повреждения/функции миокарда будут оцениваться с помощью автоматизированных иммуноанализов. Профиль воспаления будет оцениваться с помощью множественного цитокинового скрининга. Анализы в обеих популяциях будут включать липидомный анализ с оценкой видов циркулирующих липидов с использованием масс-спектрометрии и генетическое профилирование с помощью GWAS (Исследование общегеномных ассоциаций), выполняемое внешним поставщиком (Genomix4Life) с использованием технологии микрочипов нового поколения для генотипирования единичных нуклеотидные варианты (SNV). В репрезентативных крайних группах пациентов из перспективной популяции будет секвенирована определенная панель из 88 генов-кандидатов, участвующих в гомеостазе липидов/глюкозы, эндотелиальной/сосудистой функции и системном воспалении, вместе с другими соответствующими генами, возникшими в результате анализа GWAS, для известных и неизвестные варианты при FTGM с помощью подхода NGS (секвенирования следующего поколения). Подготовка библиотеки для NGS будет осуществляться с использованием набора для подготовки ДНК Illumina с набором для обогащения. Программное обеспечение Base-Space Variant Interpreter будет использоваться для аннотирования, фильтрации и интерпретации вариантов. Степень патогенности также будет оцениваться с помощью VarSome (https://varsome.com) и каталога GWAS (https://www.ebi.ac.uk/gwas/), поисковых систем и инструментов анализа воздействия генетических вариаций человека. Варианты, идентифицированные как патогенетически значимые у субъектов с крайними фенотипами, затем будут оценены у остальной популяции. Более того, микроРНК, предположительно связанные с соответствующими вариантами генов и проверенные с помощью биоинформатического анализа in silico, будут оцениваться с помощью кПЦР.