Melhorias na saúde através da compreensão dos determinantes do risco residual na doença arterial coronariana e novos alvos para prevenção e tratamento (HURRICANE)

HURRICANE é um estudo clínico observacional, realizado em coortes retrospectivas e prospectivas de pacientes com DAC estável, para avaliar o papel dos determinantes emergentes do risco cardiometabólico e vascular na previsão da aterosclerose coronariana grave e progressiva documentada por imagens avançadas de TCC.

A população do estudo retrospectivo consiste em dois grupos paralelos e independentes de pacientes inscritos em ensaios clínicos anteriores focados em biomarcadores sanguíneos e CCT de DAC. Todos os participantes são avaliados quanto à elegibilidade para o estudo atual, que inclui, em particular, a disponibilidade de amostras de sangue em biobanco e de exames CCT interpretáveis. Para cada coorte e para toda a população retrospectiva (561 pacientes) variáveis ​​clínicas (dados demográficos, fatores de risco cardiovascular, história de DAC prévia, sintomas e medicamentos) e biomarcadores circulantes convencionais (metabolismo de lipídios e glicose, inflamação sistêmica, função hepática e renal) são registrados. As variáveis ​​​​de imagem coronariana que fornecerão os desfechos de presença e gravidade da doença serão derivadas de análises qualitativas e semiquantitativas de exames de CCT de acordo com o sistema de classificação CAD-RADS 2.0.

A população do estudo longitudinal prospectivo incluirá 400 pacientes encaminhados ao IRCCS SYNLAB SDN em Nápoles e FTGM em Pisa, durante um período de 12 meses, para um CCT clinicamente indicado para suspeita de DAC, assinando um consentimento informado por escrito e cumprindo os critérios de inclusão e exclusão. No início do estudo, os pacientes serão caracterizados como no estudo retrospectivo (mesmas variáveis ​​clínicas, biomarcadores circulantes convencionais e variáveis ​​de imagem CCT) e amostras de sangue serão coletadas e armazenadas no Bio-Banco dedicado para análises genéticas/moleculares avançadas. Eles serão submetidos a visitas de monitoramento e uma última visita de acompanhamento aos 12 meses, quando será registrada a adesão ao tratamento médico e eventos. Uma segunda amostra de sangue será coletada e armazenada em Bio-Banco dedicado para análises moleculares avançadas. Uma segunda tomografia computadorizada será realizada aos 12 meses com o mesmo scanner, na mesma instituição, pelo uso de uma tecnologia CCT de última geração com alta resolução espacial e temporal para fornecer medições quantitativas de volumes de placa coronária e placa coronária composição que será usada para definir os desfechos de progressão da doença.

Análises qualitativas e semiquantitativas dos exames de CCT serão realizadas por radiologistas de acordo com o sistema de classificação CAD-RADS 2.0 nas populações retrospectivas e prospectivas. Na população prospectiva, as imagens de CCT na inscrição e no acompanhamento também serão analisadas quantitativamente para definir fenótipos de DAC em evolução. A análise quantitativa será realizada em placas identificadas visualmente usando um pacote de software dedicado (QAngio CT Research Edition versão 3.1.2.0, Medis Medical Imaging Systems, Leiden, Holanda) para gerar resultados detalhados sobre as estatísticas do lúmen e da placa, incluindo o grau de estenose , comprimento da lesão, volume do vaso, carga da placa, volume da placa e componentes da placa (de acordo com a classificação histológica virtual: cálcio denso, núcleo necrótico, fibro-gorduroso, fibroso e médio). Parâmetros adicionais derivados de TC também serão avaliados, em particular tecido adiposo epicárdico e perivascular, para serem testados nos modelos preditivos de evolução da DAC e para serem inseridos em uma análise de dados de aprendizado de máquina como variáveis ​​potenciais da rede fisiopatológica da DAC.

Os biomarcadores circulantes serão avaliados por metodologias padrão de laboratórios de química clínica nos dois centros clínicos participantes e biomarcadores circulantes específicos serão analisados ​​no IFC-CNR Core-Lab tanto na população retrospectiva quanto na prospectiva. Em particular, marcadores adicionais de metabolismo lipídico e função do tecido adiposo, função endotelial e carga aterosclerótica serão avaliados por imunoensaios dedicados, enquanto marcadores de dano/função miocárdica serão avaliados por imunoensaios automatizados. O perfil inflamatório será avaliado por telas multiplex de citocinas."Omics" as análises, em ambas as populações, incluirão a lipidômica, com a avaliação de espécies lipídicas circulantes usando espectrometria de massa, e o perfil genético por GWAS (Genome-Wide Association Study) realizado por um fornecedor externo (Genomix4Life) usando tecnologia de microarray de nova geração para genotipar single- variantes de nucleotídeos (SNVs). Em grupos extremos representativos de pacientes da população prospectiva, um painel específico de 88 genes candidatos envolvidos na homeostase lipídica/glicose, função endotelial/vascular e inflamação sistêmica, juntamente com outros genes relevantes emergentes da análise GWAS, serão sequenciados para genes conhecidos e variantes desconhecidas no FTGM pela abordagem NGS (Next Generation Sequencing). A preparação da biblioteca para NGS será realizada usando o Illumina DNA Prep with Enrichment Kit. O software Base-Space Variant Interpreter será usado para anotar, filtrar e interpretar as variantes. O grau de patogenicidade também será avaliado no VarSome (https://varsome.com) e no Catálogo GWAS (https://www.ebi.ac.uk/gwas/), motores de busca e ferramentas de análise de impacto para variação genética humana. As variantes identificadas como patogeneticamente relevantes, nos indivíduos com fenótipos extremos, serão então avaliadas no resto da população. Além disso, miRNAs, supostamente associados a variantes genéticas relevantes e triados por análise bioinformática in silico, serão avaliados por qPCR.