Zlepšení zdraví pochopením determinant reziduálního rizika u ischemické choroby srdeční a nových cílů prevence a léčby (HURRICANE)

HURRICANE je observační klinická studie, prováděná v retrospektivních a prospektivních kohortách pacientů se stabilní ICHS, za účelem posouzení úlohy nově se objevujících determinant kardiometabolického a vaskulárního rizika při predikci těžké a progresivní koronární aterosklerózy dokumentované pokročilým CCT zobrazením.

Populaci retrospektivní studie tvoří dvě paralelní, nezávislé skupiny pacientů zařazených do předchozích klinických studií zaměřených na krevní a CCT biomarkery ICHS. Všichni účastníci jsou posuzováni z hlediska způsobilosti k současné studii, která zahrnuje zejména dostupnost krevních vzorků v biobankách a interpretovatelných CCT vyšetření. Pro každou kohortu a pro celou retrospektivní populaci (561 pacientů) klinické proměnné (demografické údaje, kardiovaskulární rizikové faktory, anamnéza předchozí ICHS, symptomy a léky) a konvenční cirkulující biomarkery (metabolismus lipidů a glukózy, systémový zánět, funkce jater a ledvin) jsou zaznamenány. Proměnné koronárního zobrazení, které poskytnou koncové body přítomnosti a závažnosti onemocnění, budou odvozeny z kvalitativních a semikvantitativních analýz CCT vyšetření podle klasifikačního systému CAD-RADS 2.0.

Populace prospektivní longitudinální studie bude zahrnovat 400 pacientů doporučených na IRCCS SYNLAB SDN v Neapoli a FTGM v Pise po dobu 12 měsíců ke klinicky indikovanému CCT pro podezření na CAD, kteří podepíší písemný informovaný souhlas a splňují kritéria pro zařazení a vyloučení. Na začátku budou pacienti charakterizováni jako v retrospektivní studii (stejné klinické proměnné, konvenční cirkulující biomarkery a proměnné CCT zobrazení) a vzorky krve budou odebrány a uloženy ve vyhrazené Bio-Bance pro pokročilé genetické/molekulární analýzy. Budou podrobeni monitorovacím návštěvám a poslední následné návštěvě po 12 měsících, kdy bude zaznamenáno dodržování lékařské péče a událostí. Druhý vzorek krve bude odebrán a uložen ve vyhrazené Bio-Bance pro pokročilé molekulární analýzy. Druhý CCT sken bude proveden za 12 měsíců se stejným skenerem, ve stejné instituci, za použití nejmodernější CCT technologie s vysokým prostorovým a časovým rozlišením, aby bylo možné kvantitativní měření objemů koronárního plaku a koronárního plaku. složení, které bude použito k definování koncových bodů progrese onemocnění.

Kvalitativní a semikvantitativní analýzy CCT vyšetření budou prováděny radiology podle klasifikačního systému CAD-RADS 2.0 v retrospektivní i prospektivní populaci. V prospektivní populaci budou také kvantitativně analyzovány snímky CCT při zařazení a sledování, aby se definovaly vyvíjející se fenotypy CAD. Kvantitativní analýza bude provedena na vizuálně identifikovaných plakech pomocí speciálního softwarového balíčku (QAngio CT Research Edition verze 3.1.2.0, Medis Medical Imaging Systems, Leiden, Nizozemsko), aby se vytvořily podrobné výstupy o lumenu a statistikách plaku, včetně stupně stenózy. , délka léze, objem cévy, zátěž plakem, objem plaku a složky plaku (podle klasifikace virtuální histologie: hustý vápník, nekrotické jádro, vláknité-tukové, fibrózní a média). Budou také posouzeny další parametry odvozené z CT, zejména epikardiální a perivaskulární tuková tkáň, které budou testovány v prediktivních modelech evoluce CAD a budou vloženy do analýzy dat Machine Learning jako potenciální proměnné patofyziologické sítě CAD.

Cirkulující biomarkery budou hodnoceny standardními metodikami laboratoří klinické chemie ve dvou zúčastněných klinických centrech a specifické cirkulující biomarkery budou analyzovány v IFC-CNR Core-Lab v retrospektivní i prospektivní populaci. Specializovanými imunotesty budou hodnoceny zejména další markery metabolismu lipidů a funkce tukové tkáně, funkce endotelu a aterosklerotická zátěž, zatímco markery poškození/funkce myokardu budou hodnoceny automatizovanými imunotesty. Zánětlivý profil bude hodnocen pomocí multiplexních cytokinových screeningů."Omics" analýzy v obou populacích budou zahrnovat lipidomické, s hodnocením cirkulujících lipidových druhů pomocí hmotnostní spektrometrie, a genetické profilování pomocí GWAS (Genome-Wide Association Study) provedené externím poskytovatelem (Genomix4Life) s využitím technologie microarray nové generace k genotypování jedno- nukleotidové varianty (SNV). V reprezentativních extrémních skupinách pacientů z prospektivní populace bude sekvenován specifický panel 88 kandidátních genů zapojených do lipidové/glukózové homeostázy, endoteliální/vaskulární funkce a systémového zánětu, spolu s dalšími relevantními geny vycházejícími z analýzy GWAS pro známé a neznámé varianty na FTGM přístupem NGS (Next Generation Sequencing). Příprava knihovny pro NGS bude provedena pomocí Illumina DNA Prep with Enrichment Kit. Software Base-Space Variant Interpreter bude použit k anotaci, filtrování a interpretaci variant. Stupeň patogenity bude také posouzen na VarSome (https://varsome.com) a katalogu GWAS (https://www.ebi.ac.uk/gwas/), vyhledávačích a nástrojích analýzy dopadu pro lidské genetické variace. Varianty identifikované jako patogeneticky relevantní u jedinců s extrémními fenotypy pak budou hodnoceny ve zbytku populace. Navíc miRNA, domněle spojené s relevantními genovými variantami a skrínované bioinformatickou analýzou in silico, budou hodnoceny pomocí qPCR.