Hälsoförbättringar genom att förstå bestämningsfaktorerna för kvarstående risk vid kranskärlssjukdom och nya mål för förebyggande och behandling (HURRICANE)

HURRICANE är en observationsstudie, utförd i retrospektiva och prospektiva kohorter av patienter med stabil CAD, för att bedöma rollen av framväxande kardiometabola och vaskulära riskdeterminanter för att förutsäga svår och progressiv koronar ateroskleros dokumenterad med avancerad CCT-avbildning.

Populationen i den retrospektiva studien består av två parallella, oberoende grupper av patienter inskrivna i tidigare kliniska prövningar fokuserade på blod och CCT-biomarkörer för CAD. Alla deltagare bedöms för att vara berättigade till den aktuella studien som särskilt inkluderar tillgång till blodprover i biobanker och tolkbara CCT-undersökningar. För varje kohort och för hela den retrospektiva populationen (561 patienter) kliniska variabler (demografiska data, kardiovaskulära riskfaktorer, historia av tidigare CAD, symtom och mediciner) och konventionella cirkulerande biomarkörer (lipid- och glukosmetabolism, systemisk inflammation, lever- och njurfunktion) är inspelade. De kranskärlsavbildningsvariabler som kommer att ge sjukdomsnärvaro och ändpunkter för svårighetsgrad kommer att härledas från kvalitativa och semikvantitativa analyser av CCT-undersökningar enligt CAD-RADS 2.0 klassificeringssystem.

Populationen i den prospektiva longitudinella studien kommer att inkludera 400 patienter som remitteras vid IRCCS SYNLAB SDN i Neapel och FTGM i Pisa, under en 12-månadersperiod, till en kliniskt indicerad CCT för misstänkt CAD, undertecknande av ett skriftligt informerat samtycke och uppfyllande av inklusions- och uteslutningskriterier. Vid baslinjen kommer patienter att karakteriseras som i den retrospektiva studien (samma kliniska variabler, konventionella cirkulerande biomarkörer och CCT-avbildningsvariabler) och blodprover kommer att samlas in och lagras i den dedikerade Bio-Banken för avancerade genetiska/molekylära analyser. De kommer att underkastas övervakningsbesök och ett sista uppföljningsbesök vid 12 månader då efterlevnad av medicinsk behandling och händelser kommer att registreras. Ett andra blodprov kommer att samlas in och lagras i en dedikerad Bio-Bank för avancerade molekylära analyser. En andra CCT-skanning kommer att utföras efter 12 månader med samma skanner, vid samma institution, med användning av en toppmodern CCT-teknik med hög rumslig och tidsmässig upplösning för att ge kvantitativa mätningar av koronar plackvolymer och kranskärlsplack sammansättning som kommer att användas för att definiera sjukdomsprogressionsslutpunkterna.

Kvalitativa och semikvantitativa analyser av CCT-undersökningar kommer att utföras av radiologer enligt CAD-RADS 2.0 klassificeringssystem i både den retrospektiva och den framtida populationen. I den potentiella befolkningen kommer CCT-bilder vid inskrivning och uppföljning också att analyseras kvantitativt för att definiera utvecklande CAD-fenotyper. Kvantitativ analys kommer att utföras på visuellt identifierade plack med hjälp av ett dedikerat mjukvarupaket (QAngio CT Research Edition version 3.1.2.0, Medis Medical Imaging Systems, Leiden, Nederländerna) för att generera detaljerad information om lumen och plackstatistik, inklusive graden av stenos , lesionslängd, kärlvolym, plackbörda, plackvolym och plackkomponenter (enligt den virtuella histologiska klassificeringen: tätt kalcium, nekrotisk kärna, fibröst fett, fibröst och media). Ytterligare CT-härledda parametrar kommer också att bedömas, särskilt epikardiell och perivaskulär fettvävnad, för att testas i de prediktiva modellerna för CAD-utveckling och för att läggas in i en maskininlärningsdataanalys som potentiella variabler i det patofysiologiska CAD-nätverket.

Cirkulerande biomarkörer kommer att utvärderas med standardmetoder från kliniska kemiska laboratorier vid de två deltagande kliniska centra och specifika cirkulerande biomarkörer kommer att analyseras vid IFC-CNR Core-Lab i både den retrospektiva och den framtida populationen. Speciellt kommer ytterligare markörer för lipidmetabolism och fettvävnadsfunktion, endotelfunktion och aterosklerotisk börda att utvärderas med dedikerade immunanalyser, medan markörer för myokardskada/funktion kommer att utvärderas med automatiserade immunanalyser. Den inflammatoriska profilen kommer att bedömas med multiplex cytokinscreening."Omics" analyser, i båda populationerna, kommer att inkludera lipidomic, med bedömning av cirkulerande lipidarter med hjälp av masspektrometri, och genetisk profilering av GWAS (Genome-Wide Association Study) utförd av en extern leverantör (Genomix4Life) med hjälp av den nya generationens mikroarrayteknologi för att genotypa enkel- nukleotidvarianter (SNV). I representativa extrema grupper av patienter från den potentiella populationen kommer en specifik panel av 88 kandidatgener involverade i lipid/glukoshomeostas, endotel-/kärlfunktion och systemisk inflammation, tillsammans med andra relevanta gener som kommer fram från GWAS-analysen, att sekvenseras för kända och okända varianter vid FTGM av NGS (Next Generation Sequencing) tillvägagångssätt. Bibliotekets förberedelser för NGS kommer att utföras med hjälp av Illumina DNA Prep with Enrichment Kit. Programvaran Base-Space Variant Interpreter kommer att användas för att kommentera, filtrera och tolka varianterna. Graden av patogenicitet kommer också att bedömas på VarSome (https://varsome.com) och GWAS Catalog (https://www.ebi.ac.uk/gwas/), sökmotorer och verktyg för konsekvensanalys för mänsklig genetisk variation. De varianter som identifierats som patogenetiskt relevanta, hos försökspersonerna med extrema fenotyper, kommer sedan att bedömas i resten av befolkningen. Dessutom kommer miRNA, förmodat associerade med relevanta genvarianter och screenade med in silico bioinformatisk analys, att bedömas med qPCR.