Helseforbedringer ved å forstå determinantene for gjenværende risiko ved koronararteriesykdom og nye mål for forebygging og behandling (HURRICANE)

HURRICANE er en observasjonsstudie, utført i retrospektive og prospektive kohorter av pasienter med stabil CAD, for å vurdere rollen til nye kardiometabolske og vaskulære risikodeterminanter for å forutsi alvorlig og progressiv koronar aterosklerose dokumentert ved avansert CCT-avbildning.

Populasjonen i den retrospektive studien består av to parallelle, uavhengige grupper av pasienter som er registrert i tidligere kliniske studier med fokus på blod og CCT-biomarkører for CAD. Alle deltakere vurderes for kvalifisering til den nåværende studien, som spesielt inkluderer tilgjengelighet av blodprøver i biobank og tolkbare CCT-undersøkelser. For hver kohort og for hele den retrospektive populasjonen (561 pasienter) kliniske variabler (demografiske data, kardiovaskulære risikofaktorer, historie med tidligere CAD, symptomer og medisiner) og konvensjonelle sirkulerende biomarkører (lipid- og glukosemetabolisme, systemisk betennelse, lever- og nyrefunksjon) er registrert. De koronare avbildningsvariablene som vil gi sykdomstilstedeværelsen og endepunktene for alvorlighetsgrad, vil bli utledet fra kvalitative og semikvantitative analyser av CCT-undersøkelser i henhold til CAD-RADS 2.0 klassifiseringssystem.

Populasjonen i den prospektive longitudinelle studien vil inkludere 400 pasienter henvist ved IRCCS SYNLAB SDN i Napoli og FTGM i Pisa, over en 12 måneders periode, til en klinisk indisert CCT for mistenkt CAD, signere et skriftlig informert samtykke og oppfylle inkluderings- og eksklusjonskriterier. Ved baseline vil pasienter bli karakterisert som i den retrospektive studien (samme kliniske variabler, konvensjonelle sirkulerende biomarkører og CCT-avbildningsvariabler) og blodprøver vil bli samlet inn og lagret i den dedikerte Bio-Bank for avanserte genetiske/molekylære analyser. De vil bli underkastet overvåkingsbesøk og et siste oppfølgingsbesøk etter 12 måneder når samsvar med medisinsk behandling og hendelser vil bli registrert. En andre blodprøve vil bli samlet inn og lagret i dedikert Bio-Bank for avanserte molekylære analyser. En andre CCT-skanning vil bli utført etter 12 måneder med samme skanner, ved samme institusjon, ved bruk av en toppmoderne CCT-teknologi med høy romlig og tidsmessig oppløsning for å gi kvantitative målinger av koronar plakkvolumer og koronar plakk sammensetning som vil bli brukt til å definere endepunktene for sykdomsprogresjon.

Kvalitative og semikvantitative analyser av CCT-undersøkelser vil bli utført av radiologer i henhold til CAD-RADS 2.0 klassifiseringssystem i både retrospektive og prospektive populasjoner. I den potensielle befolkningen vil CCT-bilder ved innmelding og oppfølging også bli kvantitativt analysert for å definere utviklende CAD-fenotyper. Kvantitativ analyse vil bli utført på visuelt identifiserte plakk ved hjelp av en dedikert programvarepakke (QAngio CT Research Edition versjon 3.1.2.0, Medis Medical Imaging Systems, Leiden, Nederland) for å generere detaljert utdata om lumen og plakkstatistikk, inkludert graden av stenose , lesjonslengde, karvolum, plakkbelastning, plakkvolum og plakkkomponenter (i henhold til den virtuelle histologiske klassifiseringen: tett kalsium, nekrotisk kjerne, fibrøst fett, fibrøst og media). Ytterligere CT-avledede parametere vil også bli vurdert, spesielt epikardielt og perivaskulært fettvev, som skal testes i de prediktive modellene for CAD-evolusjon og legges inn i en maskinlæringsdataanalyse som potensielle variabler for det patofysiologiske CAD-nettverket.

Sirkulerende biomarkører vil bli evaluert ved standardmetoder fra kliniske kjemilaboratorier ved de to deltakende kliniske sentrene, og spesifikke sirkulerende biomarkører vil bli analysert ved IFC-CNR Core-Lab i både den retrospektive og den potensielle populasjonen. Spesielt vil tilleggsmarkører for lipidmetabolisme og fettvevsfunksjon, endotelfunksjon og aterosklerotisk belastning bli evaluert ved dedikerte immunanalyser, mens markører for myokardskade/funksjon vil bli evaluert ved automatiserte immunanalyser. Den inflammatoriske profilen vil bli vurdert ved multiplekse cytokinskjermer."Omics" analyser, i begge populasjoner, vil inkludere lipidomic, med vurdering av sirkulerende lipidarter ved bruk av massespektrometri, og genetisk profilering av GWAS (Genome-Wide Association Study) utført av en ekstern leverandør (Genomix4Life) ved bruk av ny generasjons mikroarray-teknologi for å genotype enkelt- nukleotidvarianter (SNV). I representative ekstreme grupper av pasienter fra den potensielle populasjonen vil et spesifikt panel av 88 kandidatgener involvert i lipid/glukose homeostase, endotelial/vaskulær funksjon og systemisk betennelse, sammen med andre relevante gener som kommer fra GWAS-analysen, bli sekvensert for kjente og ukjente varianter ved FTGM av NGS (Next Generation Sequencing) tilnærming. Bibliotekets forberedelse for NGS vil bli utført ved hjelp av Illumina DNA Prep with Enrichment Kit. Base-Space Variant Interpreter-programvare vil bli brukt til å kommentere, filtrere og tolke variantene. Graden av patogenisitet vil også bli vurdert på VarSome (https://varsome.com) og GWAS Catalog (https://www.ebi.ac.uk/gwas/), søkemotorer og konsekvensanalyseverktøy for menneskelig genetisk variasjon. Variantene som er identifisert som patogenetisk relevante, hos forsøkspersonene med ekstreme fenotyper, vil deretter bli vurdert i resten av befolkningen. Dessuten vil miRNA, antatt assosiert med relevante genvarianter og screenet ved in silico bioinformatisk analyse, bli vurdert ved qPCR.