Miglioramenti della salute grazie alla comprensione dei determinanti del rischio residuo nella malattia coronarica e nuovi obiettivi per la prevenzione e il trattamento (HURRICANE)

HURRICANE è uno studio clinico osservazionale, condotto in coorti retrospettive e prospettiche di pazienti con CAD stabile, per valutare il ruolo dei determinanti emergenti del rischio cardiometabolico e vascolare nel predire l'aterosclerosi coronarica grave e progressiva documentata dall'imaging CCT avanzato.

La popolazione dello studio retrospettivo è costituita da due gruppi paralleli e indipendenti di pazienti arruolati in precedenti studi clinici focalizzati sui biomarcatori ematici e CCT della CAD. Tutti i partecipanti vengono valutati per l'idoneità allo studio in corso che include in particolare la disponibilità di campioni di sangue nella biobanca e di esami CCT interpretabili. Per ciascuna coorte e per l'intera popolazione retrospettiva (561 pazienti) variabili cliniche (dati demografici, fattori di rischio cardiovascolare, storia di precedenti CAD, sintomi e farmaci) e biomarcatori circolanti convenzionali (metabolismo lipidico e glucidico, infiammazione sistemica, funzionalità epatica e renale) vengono registrati. Le variabili di imaging coronarico che forniranno gli endpoint di presenza e gravità della malattia saranno derivate da analisi qualitative e semiquantitative degli esami CCT secondo il sistema di classificazione CAD-RADS 2.0.

La popolazione dello studio prospettico longitudinale includerà 400 pazienti indirizzati presso l'IRCCS SYNLAB SDN di Napoli e FTGM di Pisa, per un periodo di 12 mesi, a un CCT clinicamente indicato per sospetta CAD, firmando un consenso informato scritto e soddisfacendo i criteri di inclusione ed esclusione. Al basale, i pazienti saranno caratterizzati come nello studio retrospettivo (stesse variabili cliniche, biomarcatori circolanti convenzionali e variabili di imaging CCT) e i campioni di sangue saranno raccolti e conservati nella bio-banca dedicata per analisi genetiche/molecolari avanzate. Saranno sottoposti a visite di monitoraggio e ad un'ultima visita di controllo a 12 mesi in cui verrà registrata l'aderenza al trattamento medico e agli eventi. Un secondo campione di sangue verrà raccolto e conservato in una Bio-Banca dedicata per analisi molecolari avanzate. Una seconda scansione CCT verrà eseguita a 12 mesi con lo stesso scanner, presso la stessa istituzione, utilizzando una tecnologia CCT all'avanguardia con elevata risoluzione spaziale e temporale per fornire misurazioni quantitative dei volumi della placca coronarica e della placca coronarica. composizione che verrà utilizzata per definire gli endpoint di progressione della malattia.

Le analisi qualitative e semiquantitative degli esami CCT saranno eseguite dai radiologi secondo il sistema di classificazione CAD-RADS 2.0 sia nella popolazione retrospettiva che prospettica. Nella popolazione potenziale, le immagini CCT all'arruolamento e al follow-up verranno anche analizzate quantitativamente per definire i fenotipi CAD in evoluzione. L'analisi quantitativa verrà eseguita sulle placche identificate visivamente utilizzando un pacchetto software dedicato (QAngio CT Research Edition versione 3.1.2.0, Medis Medical Imaging Systems, Leiden, Paesi Bassi) per generare risultati dettagliati sulle statistiche del lume e della placca, compreso il grado di stenosi , lunghezza della lesione, volume del vaso, carico di placca, volume della placca e componenti della placca (secondo la classificazione istologica virtuale: calcio denso, nucleo necrotico, fibroso-grasso, fibroso e media). Verranno inoltre valutati ulteriori parametri derivati ​​dalla CT, in particolare il tessuto adiposo epicardico e perivascolare, da testare nei modelli predittivi dell'evoluzione del CAD e da inserire in un'analisi dei dati di Machine Learning come potenziali variabili della rete CAD fisiopatologica.

I biomarcatori circolanti saranno valutati mediante metodologie standard dei laboratori di chimica clinica presso i due centri clinici partecipanti e specifici biomarcatori circolanti saranno analizzati presso il Core-Lab dell'IFC-CNR sia nella popolazione retrospettiva che in quella prospettica. In particolare, ulteriori marcatori del metabolismo lipidico e della funzione del tessuto adiposo, della funzione endoteliale e del carico aterosclerotico saranno valutati mediante test immunologici dedicati, mentre i marcatori di danno/funzione miocardica saranno valutati mediante test immunologici automatizzati. Il profilo infiammatorio sarà valutato mediante screening multiplex di citochine."Omics" le analisi, in entrambe le popolazioni, includeranno la lipidomica, con la valutazione delle specie lipidiche circolanti mediante spettrometria di massa, e il profilo genetico mediante GWAS (Genome-Wide Association Study) eseguito da un fornitore esterno (Genomix4Life) utilizzando la tecnologia microarray di nuova generazione per genotipizzare singoli- varianti nucleotidiche (SNV). In gruppi estremi rappresentativi di pazienti della potenziale popolazione, un pannello specifico di 88 geni candidati coinvolti nell'omeostasi dei lipidi/glucosio, nella funzione endoteliale/vascolare e nell'infiammazione sistemica, insieme ad altri geni rilevanti emersi dall'analisi GWAS, saranno sequenziati per scopi noti e varianti sconosciute all'FTGM mediante approccio NGS (Next Generation Sequencing). La preparazione delle librerie per NGS verrà eseguita utilizzando Illumina DNA Prep with Enrichment Kit. Il software Base-Space Variant Interpreter verrà utilizzato per annotare, filtrare e interpretare le varianti. Il grado di patogenicità sarà valutato anche su VarSome (https://varsome.com) e GWAS Catalog (https://www.ebi.ac.uk/gwas/), motori di ricerca e strumenti di analisi di impatto per la variazione genetica umana. Le varianti identificate come patogeneticamente rilevanti nei soggetti con fenotipi estremi verranno poi valutate nel resto della popolazione. Inoltre, i miRNA, presumibilmente associati a varianti genetiche rilevanti e selezionati mediante analisi bioinformatica in silico, saranno valutati mediante qPCR.