Gesundheitsverbesserungen durch Verständnis der Determinanten des Restrisikos bei koronarer Herzkrankheit und neue Ziele für Prävention und Behandlung (HURRICANE)

HURRICANE ist eine klinische Beobachtungsstudie, die in retrospektiven und prospektiven Kohorten von Patienten mit stabiler koronarer Herzkrankheit durchgeführt wird, um die Rolle neu auftretender kardiometabolischer und vaskulärer Risikodeterminanten bei der Vorhersage schwerer und fortschreitender koronarer Atherosklerose, dokumentiert durch fortschrittliche CCT-Bildgebung, zu bewerten.

Die Population der retrospektiven Studie besteht aus zwei parallelen, unabhängigen Gruppen von Patienten, die an früheren klinischen Studien mit Schwerpunkt auf Blut- und CCT-Biomarkern von CAD teilgenommen haben. Alle Teilnehmer werden auf ihre Eignung für die aktuelle Studie geprüft, was insbesondere die Verfügbarkeit von Blutproben in der Biobank und interpretierbaren CCT-Untersuchungen umfasst. Für jede Kohorte und für die gesamte retrospektive Population (561 Patienten) klinische Variablen (demografische Daten, kardiovaskuläre Risikofaktoren, frühere koronare Herzkrankheit in der Vorgeschichte, Symptome und Medikamente) und konventionelle zirkulierende Biomarker (Lipid- und Glukosestoffwechsel, systemische Entzündung, Leber- und Nierenfunktion) werden aufgezeichnet. Die koronaren Bildgebungsvariablen, die die Endpunkte für Krankheitspräsenz und -schwere liefern, werden aus qualitativen und semiquantitativen Analysen von CCT-Untersuchungen gemäß dem CAD-RADS 2.0-Klassifizierungssystem abgeleitet.

Die Population der prospektiven Längsschnittstudie umfasst 400 Patienten, die über einen Zeitraum von 12 Monaten an das IRCCS SYNLAB SDN in Neapel und FTGM in Pisa überwiesen wurden und an ein klinisch indiziertes CCT wegen Verdacht auf CAD überwiesen wurden, eine schriftliche Einverständniserklärung unterzeichneten und Einschluss- und Ausschlusskriterien erfüllten. Zu Studienbeginn werden die Patienten wie in der retrospektiven Studie charakterisiert (dieselben klinischen Variablen, herkömmliche zirkulierende Biomarker und CCT-Bildgebungsvariablen) und Blutproben werden gesammelt und in der speziellen Biobank für fortgeschrittene genetische/molekulare Analysen gespeichert. Sie werden Überwachungsbesuchen und einem letzten Nachuntersuchungsbesuch nach 12 Monaten unterzogen, bei dem die Einhaltung medizinischer Behandlungen und Ereignisse registriert wird. Eine zweite Blutprobe wird entnommen und in einer speziellen Biobank für fortgeschrittene molekulare Analysen aufbewahrt. Ein zweiter CCT-Scan wird nach 12 Monaten mit demselben Scanner an derselben Einrichtung unter Verwendung einer hochmodernen CCT-Technologie mit hoher räumlicher und zeitlicher Auflösung durchgeführt, um quantitative Messungen von Koronarplaquevolumina und Koronarplaque zu ermöglichen Zusammensetzung, die zur Definition der Endpunkte des Krankheitsverlaufs verwendet wird.

Qualitative und semiquantitative Analysen von CCT-Untersuchungen werden von Radiologen gemäß dem CAD-RADS 2.0-Klassifizierungssystem sowohl in der retrospektiven als auch in der prospektiven Population durchgeführt. In der potenziellen Population werden CCT-Bilder bei der Aufnahme und Nachuntersuchung auch quantitativ analysiert, um sich entwickelnde CAD-Phänotypen zu definieren. Eine quantitative Analyse wird an visuell identifizierten Plaques unter Verwendung eines speziellen Softwarepakets (QAngio CT Research Edition Version 3.1.2.0, Medis Medical Imaging Systems, Leiden, Niederlande) durchgeführt, um eine detaillierte Ausgabe der Lumen- und Plaque-Statistiken, einschließlich des Stenosegrades, zu generieren , Läsionslänge, Gefäßvolumen, Plaquebelastung, Plaquevolumen und Plaquekomponenten (gemäß der Klassifizierung der virtuellen Histologie: dichtes Kalzium, nekrotischer Kern, faserig-fettig, faserig und medial). Zusätzliche CT-abgeleitete Parameter werden ebenfalls bewertet, insbesondere epikardiales und perivaskuläres Fettgewebe, um in den Vorhersagemodellen der CAD-Evolution getestet zu werden und in eine Datenanalyse durch maschinelles Lernen als potenzielle Variablen des pathophysiologischen CAD-Netzwerks eingegeben zu werden.

Zirkulierende Biomarker werden anhand von Standardmethoden klinisch-chemischer Laboratorien in den beiden teilnehmenden klinischen Zentren bewertet und spezifische zirkulierende Biomarker werden im IFC-CNR Core-Lab sowohl in der retrospektiven als auch in der prospektiven Population analysiert. Insbesondere werden zusätzliche Marker des Lipidstoffwechsels und der Funktion des Fettgewebes, der Endothelfunktion und der atherosklerotischen Belastung durch spezielle Immunoassays evaluiert, während Marker der Myokardschädigung/-funktion durch automatisierte Immunoassays evaluiert werden. Das Entzündungsprofil wird durch Multiplex-Zytokin-Screenings beurteilt. „Omics“ Zu den Analysen in beiden Populationen gehören die Lipidanalyse mit der Bewertung zirkulierender Lipidspezies mittels Massenspektrometrie und die genetische Profilierung durch GWAS (Genome-Wide Association Study), die von einem externen Anbieter (Genomix4Life) unter Verwendung von Microarray-Technologie der neuen Generation zur Genotypisierung einzelner Populationen durchgeführt wird. Nukleotidvarianten (SNVs). In repräsentativen Extremgruppen von Patienten aus der potenziellen Population wird eine spezifische Gruppe von 88 Kandidatengenen, die an der Lipid-/Glukosehomöostase, der Endothel-/Gefäßfunktion und systemischen Entzündungen beteiligt sind, zusammen mit anderen relevanten Genen, die aus der GWAS-Analyse hervorgehen, für bekannte und sequenziert unbekannte Varianten bei FTGM durch NGS-Ansatz (Next Generation Sequencing). Die Bibliotheksvorbereitung für NGS wird mit dem Illumina DNA Prep with Enrichment Kit durchgeführt. Die Base-Space Variant Interpreter-Software wird zum Kommentieren, Filtern und Interpretieren der Varianten verwendet. Der Grad der Pathogenität wird auch auf VarSome (https://varsome.com) und dem GWAS-Katalog (https://www.ebi.ac.uk/gwas/), Suchmaschinen und Auswirkungsanalysetools für menschliche genetische Variationen bewertet. Die bei den Probanden mit extremen Phänotypen als pathogenetisch relevant identifizierten Varianten werden dann im Rest der Bevölkerung bewertet. Darüber hinaus werden miRNAs, die mutmaßlich mit relevanten Genvarianten assoziiert sind und durch bioinformatische In-silico-Analyse gescreent werden, mittels qPCR bewertet.