Gezondheidsverbeteringen door inzicht in de determinanten van het resterende risico bij coronaire hartziekte en nieuwe doelstellingen voor preventie en behandeling (HURRICANE)

HURRICANE is een observationeel klinisch onderzoek, uitgevoerd in retrospectieve en prospectieve cohorten van patiënten met stabiele CAD, om de rol te beoordelen van opkomende cardiometabolische en vasculaire risicodeterminanten bij het voorspellen van ernstige en progressieve coronaire atherosclerose, gedocumenteerd door geavanceerde CCT-beeldvorming.

De populatie van het retrospectieve onderzoek bestaat uit twee parallelle, onafhankelijke groepen patiënten die deelnamen aan eerdere klinische onderzoeken gericht op bloed- en CCT-biomarkers van CAD. Van alle deelnemers wordt beoordeeld of zij in aanmerking komen voor het huidige onderzoek, waarbij met name de beschikbaarheid van bloedmonsters in de biobank en van interpreteerbare CCT-onderzoeken wordt betrokken. Voor elk cohort en voor de gehele retrospectieve populatie (561 patiënten) klinische variabelen (demografische gegevens, cardiovasculaire risicofactoren, geschiedenis van eerdere CAD, symptomen en medicatie) en conventionele circulerende biomarkers (lipiden- en glucosemetabolisme, systemische ontsteking, lever- en nierfunctie) zijn opgenomen. De coronaire beeldvariabelen die de eindpunten van de aanwezigheid en de ernst van de ziekte zullen opleveren, zullen worden afgeleid uit kwalitatieve en semikwantitatieve analyses van CCT-onderzoeken volgens het CAD-RADS 2.0-classificatiesysteem.

De populatie van het prospectieve longitudinale onderzoek zal 400 patiënten omvatten die over een periode van 12 maanden naar IRCCS SYNLAB SDN in Napels en FTGM in Pisa zijn verwezen naar een klinisch geïndiceerde CCT voor vermoedelijke CAD, waarbij ze een schriftelijke geïnformeerde toestemming ondertekenen en voldoen aan de inclusie- en exclusiecriteria. Bij aanvang zullen patiënten worden gekarakteriseerd zoals in het retrospectieve onderzoek (dezelfde klinische variabelen, conventionele circulerende biomarkers en CCT-beeldvormingsvariabelen) en zullen bloedmonsters worden verzameld en opgeslagen in de speciale Bio-Bank voor geavanceerde genetische/moleculaire analyses. Ze zullen worden onderworpen aan controlebezoeken en een laatste vervolgbezoek na 12 maanden, waarbij de naleving van de medische behandeling en gebeurtenissen zal worden geregistreerd. Een tweede bloedmonster zal worden verzameld en opgeslagen in een speciale Bio-Bank voor geavanceerde moleculaire analyses. Een tweede CCT-scan zal na 12 maanden worden uitgevoerd met dezelfde scanner, in dezelfde instelling, door gebruik te maken van de modernste CCT-technologie met hoge ruimtelijke en temporele resolutie om kwantitatieve metingen van coronaire plaquevolumes en coronaire plaque te verkrijgen. samenstelling die zal worden gebruikt om de eindpunten van de ziekteprogressie te definiëren.

Kwalitatieve en semikwantitatieve analyses van CCT-onderzoeken zullen worden uitgevoerd door radiologen volgens het CAD-RADS 2.0-classificatiesysteem, zowel in de retrospectieve als in de prospectieve populaties. In de toekomstige populatie zullen CCT-beelden bij inschrijving en follow-up ook kwantitatief worden geanalyseerd om evoluerende CAD-fenotypes te definiëren. Kwantitatieve analyse zal worden uitgevoerd op visueel geïdentificeerde plaques met behulp van een speciaal softwarepakket (QAngio CT Research Edition versie 3.1.2.0, Medis Medical Imaging Systems, Leiden, Nederland) om gedetailleerde output te genereren over de lumen- en plaquestatistieken, inclusief de mate van stenose , laesielengte, vaatvolume, plaquelast, plaquevolume en plaquecomponenten (volgens de virtuele histologische classificatie: dicht calcium, necrotische kern, vezelig-vettig, vezelig en media). Bijkomende CT-afgeleide parameters zullen ook worden beoordeeld, in het bijzonder epicardiaal en perivasculair vetweefsel, om te worden getest in de voorspellende modellen van CAD-evolutie en om te worden ingevoerd in een Machine Learning data-analyse als potentiële variabelen van het pathofysiologische CAD-netwerk.

Circulerende biomarkers zullen worden geëvalueerd door standaardmethodologieën van klinisch-chemische laboratoria in de twee deelnemende klinische centra en specifieke circulerende biomarkers zullen worden geanalyseerd in het IFC-CNR Core-Lab in zowel de retrospectieve als de prospectieve populaties. In het bijzonder zullen aanvullende markers van het lipidenmetabolisme en de functie van het vetweefsel, de endotheliale functie en de atherosclerotische belasting worden geëvalueerd door middel van speciale immunoassays, terwijl markers van myocardschade/functie zullen worden geëvalueerd door middel van geautomatiseerde immunoassays. Het ontstekingsprofiel zal worden beoordeeld door middel van multiplex cytokineschermen."Omics" analyses, in beide populaties, zullen onder meer lipidomisch zijn, met de beoordeling van circulerende lipidensoorten met behulp van massaspectrometrie, en genetische profilering door GWAS (Genome-Wide Association Study), uitgevoerd door een externe leverancier (Genomix4Life), met behulp van nieuwe generatie microarray-technologie om single- nucleotidevarianten (SNV's). In representatieve extreme groepen patiënten uit de toekomstige populatie zal een specifiek panel van 88 kandidaatgenen die betrokken zijn bij lipiden/glucosehomeostase, endotheliale/vasculaire functie en systemische ontsteking, samen met andere relevante genen die uit de GWAS-analyse naar voren komen, worden gesequenced op bekende en onbekende varianten bij FTGM door NGS (Next Generation Sequencing) aanpak. De voorbereiding van de bibliotheek voor NGS zal worden uitgevoerd met behulp van de Illumina DNA Prep with Enrichment Kit. Base-Space Variant Interpreter-software zal worden gebruikt om de varianten te annoteren, filteren en interpreteren. De mate van pathogeniteit zal ook worden beoordeeld op VarSome (https://varsome.com) en GWAS Catalog (https://www.ebi.ac.uk/gwas/), zoekmachines en impactanalysetools voor menselijke genetische variatie. De varianten die als pathogenetisch relevant zijn geïdentificeerd bij de proefpersonen met extreme fenotypes, zullen vervolgens worden beoordeeld bij de rest van de populatie. Bovendien zullen miRNAs, vermoedelijk geassocieerd met relevante genvarianten en gescreend door in silico bio-informatica-analyse, worden beoordeeld met qPCR.