Sundhedsforbedringer ved at forstå determinanterne for resterende risiko ved koronararteriesygdom og nye mål for forebyggelse og behandling (HURRICANE)

HURRICANE er et observationelt klinisk studie, udført i retrospektive og prospektive kohorter af patienter med stabil CAD, for at vurdere rollen af ​​nye kardiometaboliske og vaskulære risikodeterminanter til at forudsige svær og progressiv koronar aterosklerose dokumenteret ved avanceret CCT-billeddannelse.

Populationen af ​​det retrospektive studie består af to parallelle, uafhængige grupper af patienter, der er indskrevet i tidligere kliniske forsøg med fokus på blod og CCT-biomarkører for CAD. Alle deltagere vurderes for berettigelse til den aktuelle undersøgelse, som især omfatter tilgængelighed af blodprøver i biobank og fortolkbare CCT-undersøgelser. For hver kohorte og for hele den retrospektive population (561 patienter) kliniske variabler (demografiske data, kardiovaskulære risikofaktorer, historie med tidligere CAD, symptomer og medicin) og konventionelle cirkulerende biomarkører (lipid- og glucosemetabolisme, systemisk inflammation, lever- og nyrefunktion) er optaget. De koronare billeddiagnostiske variabler, som vil give sygdomstilstedeværelsen og endepunkternes sværhedsgrad, vil blive afledt af kvalitative og semikvantitative analyser af CCT-undersøgelser i henhold til CAD-RADS 2.0 klassifikationssystem.

Populationen af ​​den prospektive longitudinelle undersøgelse vil omfatte 400 patienter henvist til IRCCS SYNLAB SDN i Napoli og FTGM i Pisa over en 12 måneders periode til en klinisk indiceret CCT for mistanke om CAD, der underskriver et skriftligt informeret samtykke og opfylder inklusions- og eksklusionskriterier. Ved baseline vil patienter blive karakteriseret som i det retrospektive studie (samme kliniske variabler, konventionelle cirkulerende biomarkører og CCT-billeddannelsesvariabler), og blodprøver vil blive indsamlet og opbevaret i den dedikerede Bio-Bank til avancerede genetiske/molekylære analyser. De vil blive underkastet overvågningsbesøg og et sidste opfølgningsbesøg efter 12 måneder, hvor overholdelse af medicinsk behandling og hændelser vil blive registreret. En anden blodprøve vil blive indsamlet og opbevaret i dedikeret Bio-Bank til avancerede molekylære analyser. En anden CCT-scanning vil blive udført efter 12 måneder med den samme scanner, på samme institution, ved brug af en avanceret CCT-teknologi med høj rumlig og tidsmæssig opløsning for at give kvantitative målinger af koronar plaquevolumener og koronar plak sammensætning, som vil blive brugt til at definere sygdomsprogressionens slutpunkter.

Kvalitative og semikvantitative analyser af CCT-undersøgelser vil blive udført af radiologer i henhold til CAD-RADS 2.0 klassifikationssystem i både den retrospektive og den potentielle population. I den potentielle befolkning vil CCT-billeder ved tilmelding og opfølgning også blive analyseret kvantitativt for at definere udviklende CAD-fænotyper. Kvantitativ analyse vil blive udført på visuelt identificerede plaques ved hjælp af en dedikeret softwarepakke (QAngio CT Research Edition version 3.1.2.0, Medis Medical Imaging Systems, Leiden, Holland) for at generere detaljeret output om lumen- og plakstatistikker, herunder graden af ​​stenose , læsionslængde, karvolumen, plakbelastning, plakvolumen og plakkomponenter (ifølge den virtuelle histologiske klassifikation: tæt calcium, nekrotisk kerne, fibrøst-fedt, fibrøst og medier). Yderligere CT-afledte parametre vil også blive vurderet, især epikardiet og perivaskulært fedtvæv, som skal testes i de prædiktive modeller for CAD-evolution og indgå i en Machine Learning-dataanalyse som potentielle variabler i det patofysiologiske CAD-netværk.

Cirkulerende biomarkører vil blive evalueret ved standardmetoder fra klinisk kemi laboratorier på de to deltagende kliniske centre, og specifikke cirkulerende biomarkører vil blive analyseret på IFC-CNR Core-Lab i både den retrospektive og de potentielle populationer. Især vil yderligere markører for lipidmetabolisme og fedtvævsfunktion, endotelfunktion og aterosklerotisk belastning blive evalueret ved dedikerede immunoassays, mens markører for myokardieskade/funktion vil blive evalueret ved automatiserede immunassays. Den inflammatoriske profil vil blive vurderet ved multipleks cytokinscreeninger."Omics" analyser, i begge populationer, vil omfatte lipidomic, med vurdering af cirkulerende lipid-arter ved hjælp af massespektrometri, og genetisk profilering ved GWAS (Genome-Wide Association Study) udført af en ekstern udbyder (Genomix4Life) ved hjælp af ny generation af mikroarray-teknologi til at genotype enkelt- nukleotidvarianter (SNV'er). I repræsentative ekstreme grupper af patienter fra den potentielle befolkning vil et specifikt panel af 88 kandidatgener involveret i lipid/glukose-homeostase, endotel/vaskulær funktion og systemisk inflammation, sammen med andre relevante gener, der dukker op fra GWAS-analysen, blive sekventeret for kendte og ukendte varianter ved FTGM ved NGS (Next Generation Sequencing) tilgang. Bibliotekets forberedelse til NGS vil blive udført ved hjælp af Illumina DNA Prep with Enrichment Kit. Base-Space Variant Interpreter software vil blive brugt til at kommentere, filtrere og fortolke varianterne. Graden af ​​patogenicitet vil også blive vurderet på VarSome (https://varsome.com) og GWAS Catalog (https://www.ebi.ac.uk/gwas/), søgemaskiner og konsekvensanalyseværktøjer til human genetisk variation. De varianter, der er identificeret som patogenetisk relevante, i forsøgspersoner med ekstreme fænotyper vil derefter blive vurderet i resten af ​​befolkningen. Desuden vil miRNA'er, formodet forbundet med relevante genvarianter og screenet ved in silico bioinformatisk analyse, blive vurderet ved qPCR.