Korin kliininen tutkimus glyserolitributyraatin arvioimiseksi potilailla, joilla on mitokondriaalinen enkefalopatia, maitohappoasidoosi, aivohalvauksen kaltaiset jaksot (MELAS) tai Leberin perinnöllinen optinen neuropatia-plus (LHON-Plus)

Kahden kuukauden pituisen lähtötilanteen johtavassa vaiheessa hankin seuraavat tiedot, jotka ovat osa tavanomaista kliinistä hoitoa:

1. Sairaushistoria
2. Raskaustesti hedelmällisyyspotentiaalin kohteille: ihmisen koorion gonadotropiinikokeen virtsan käyttäminen
3. Sairaalahoitojen määrä viimeisen 12 kuukauden aikana
4. Lääkärintarkastus
5. 6 minuutin kävelytesti

6. Kliiniset laboratoriobiomarkkerit, jotka on suoritettu ja/tai tulkittu CLIA-sertifioiduissa laboratorioissa Lasten kansallissairaalassa:

   • GDF-15
   • FGF-21
   • CMP
   • Hemoglobiini A1C
   • Plasman aminohapot
   • Laktaatti
   • Karnitiini ja asyylikarnitiini
   • Virtsan orgaaniset hapot ja virtsan analyysi
7. Standard 1 tunnin mittainen EEG Melas-kohteille
8. Perustaso MRI (koehenkilöille, joilla on melas tai LHON-plus) ja MRS (Melas-kohteille)
9. Näyttö aivohalvauksen kaltaisille jaksoille Melas-kohteille
10. Sähköinen kohtauspäiväkirja MELAS-koehenkilöille
11. Motorinen tutkimus koehenkilöille, joilla on MELAS tai LHON-Plus
12. Elektromyografia ja hermojen johtumisnopeus LHON-Plus-potilaille
13. Oftalmologinen tutkimus (pohja, näkökenttä ja näöntarkkuus) LHON-Plus-potilaille
14. Snellen-kaaviokoe lhon-plus-aiheista

15. Lannerangan puhkeaminen LHON-plus-henkilöille CSF-markkerien arvioimiseksi multippeliskleroosimaiselle:

    • Spesifinen vasta-aineryhmä, jota kutsutaan oligoklonaalisiksi vyöhykkeiksi
    • Myeliini -perusproteiinit (MBP)
    • IgG -tasot
    • Tulehduksellisten proteiinien tasot
    • Leukosyyttien määrä: lymfosyytit (B-solut ja T-solut), monosyytit, makrofagit, plasmasolut ja granulosyytit
    • CSF/seerumin glukoosisuhde
16. Väsymysnäyttö Modified Fatigue Impact Scale -asteikolla
17. Elämänlaatua (QoL) arvioidaan käyttämällä lyhyttä "Neuro-Quality of Life" -kyselylomaketta.
18. Kognitiivinen arviointi käyttämällä NIH-Toolbox Cognitive Batterya

19. Ihon biopsia arvioida:

    • Mitokondrioiden geneettinen analyysi: Melas- ja LHON-plus-mitokondriaalisten varianttien heteroplasmisten tasojen kvantifiointi pitkän kantaman PCR: llä, jota seurasi massiivisesti rinnakkain sekvensointi Baylor Miraca Genetics Laboratories DBA Baylor -genetiikassa, kliinisen diagnostiikan laboratoriossa.
    • Mitokondrioiden hengitysketjun entsyymianalyysi: oksidatiivisen fosforylaation entsymaattisen aktiivisuuden kvantifiointi (Oxphos) -kompleksit Baylor -genetiikan tekemällä spektrofotometrialla.
    • Mitokondrioiden kuntotestit: Osallistujista peräisin olevien ihofibroblastien mitokondrioiden kuntoa arvioidaan reaaliajassa elävien solujen mitokondriotesteillä käyttäen kahta maailman edistyksellisintä automatisoitua soluaineenvaihdunta-analysaattoria ja Agilent Technologies Inc:n automaattista normalisointijärjestelmää Cytation1. kolme seuraavaa Agilentin erikoistunutta metabolista testiä:

Mitokondrioiden stressitestimääritys: Tämä määritys mittaa osallistujan mitokondriaalisten funktioiden perustasoa kvantifioimalla Oxphos -bioenergettiset parametrit. Tutkijat käyttävät tätä määritystä seuratakseen glyseroli -tributyraatin oraalisen antamisen mahdollista tehokkuutta osallistujilla.

Reaaliaikainen ATP-nopeusmääritys: Tutkijat käyttävät tätä määritystä kvantifioimaan reittikohtainen ATP-nopeustuotanto mitokondriaalisesta Oxphos-reitistä ja sytosolisesta glykolyyttisestä reitistä.

Agilent Glycolytic Rate -määritys: Tutkijat käyttävät tätä testiä arvioidakseen metabolista plastisuutta kahden pääenergiareitin, OXPHOS:n ja glykolyysin, välillä sekä korreloidakseen yksitellen glykolyyttisen aktiivisuuden laktaatin kertymisen kanssa.

Osallistujia ei ole ilmoittautunut annos-eskalaatiovaiheeseen ilman täydellistä tulkintaa kliinisistä tiedoista lähtötason etuvaiheesta. Turvallisuusriskin korkeamman tason osallistujat, joilla on olemassa vakavia komplikaatioita, munuaisten vajaatoimintaa, rytmihäiriöitä, keuhkokuumetta, joilla on hengitysvaurio ja/tai vaikea mahalaukun maha-asunto, jätetään etenemisestä annoseskalaatiovaiheeseen.

Kuuden kuukauden mittaisen annos-eskalaatiovaiheen aikana tutkijat määrittävät turvallisen osallistujaspesifisen MTD: n käyttämällä edellä kuvattua toksikologiaa ja kliinistä tietoa.

Osallistujille annetaan glyseroli -tributyraattia kolme kertaa päivässä (TID), jonka lasten kansallisen sairaalan (CNH) tutkimusapteekki, joka sijaitsee tutkimusalueella (CNH). Annos-eskalaatiovaiheen aloittamiseksi tutkija tarjoaa kaikille osallistujille yhden kuukauden tarjonnan 100 kapselia, joista kukin sisältää 500 mg glyseroli-tributyraattia. Alkuperäinen annos on 1000 mg TID. Kuukauden 1 ja sitä seuraavien kuukausien viimeisen viikon aikana tutkijat tarkistavat jokaisen osallistujan kliiniset ja biokemialliset tiedot ennen kuin lisäävät glyserolien timorutyraatin oraalista annosta.

Alla on kuvaus menetelmistä annosta rajoittavan toksisuuden (DLT) arvioimiseksi koko annoksen korotusvaiheen ajan.

1. Taudispesifinen arvio:

   • MELAS-potilailla on kaksi mitattavissa olevaa ja luotettavaa biomarkkeria MELAS-spesifiselle tutkittavan lääkkeen vaikutuksen ylärajalle: 1) plasman laktaattitasot yli kolme kertaa normaalitasot; ja 2) veren glukoositasot yli 200 mg/dl (11,1 mM). Lisäksi MELAS-potilaiden yleinen toksisuus arvioidaan alla kuvatuissa kriteereissä, jotka ovat yhteisiä kaikille osallistujille. Jos yleinen toksisuus ja/tai MELAS-spesifinen plasman laktaattitasojen ja veren glukoositasojen yläraja, MELAS-osallistujia ei nosteta seuraavaan suunniteltuun annokseen 500 mg tid, vaan heitä hoidetaan uudelleen yhden annoksen pitoisuudella, joka on pienempi kuin annos. jossa todetaan asteen 3 toksisuus.
   • Lhon-plus-osallistujille ei ole samanlaisia ​​luotettavia biomarkkereita tällaisen ylemmän kynnyksen arvioinnissa. Siksi näitä koehenkilöitä seurataan tiiviisti yleisen myrkyllisyyden suhteen.

2. Yleinen toksisuuden arviointi: Kliiniset tutkijat arvioivat toksisuutta käyttämällä haittavaikutusten yleisiä terminologiakriteerejä (CTCAE) versio 4.0 3 -luokitusasteikko.

   • Annosta rajoittava myrkyllisyys (DLT) määritellään mille tahansa kohdassa 5.3.1.11 luetelluista haittavaikutuksista (AE). "Myrkyllisyyden valvonta" luokiteltu CTCAE v4.03:lle. AE katsotaan mahdollisesti liittyväksi tutkittavaan lääkkeeseen, joka ilmenee milloin tahansa glyserolitributyraatin aloitusannoksen jälkeen, kun aste on 3 tai korkeampi, tai lähtötilanteen heikkeneminen, joka määritellään vähintään 2 asteen nousuna, jos lähtötason aste on pienempi tai yhtä suuri kuin 1. Osallistujat, joille kehittyy asteen 3 tai korkeampi toksisuus, käsitellään uudelleen yhden annoksen pitoisuudella, joka on pienempi kuin annos, jolla asteen 3 toksisuus havaitaan.
   • DLT: n puuttuessa tai CTCAE: n luokan 1 tai 2 toksisuuden tapauksessa glyserolien timuturaattia annos kärjistyy seuraavaan suunniteltuun annokseen 500 mg TID. Annokset nostetaan seuraavaan suunniteltuun annokseen 500 mg TID: llä joka kuukausi kuukauteen 6 saakka tai ennen, jos osallistujaspesifinen DLT saavutetaan toksisuustietojen perusteella CTCAE-luokitusasteikolla, kuten edellä on määritelty. Jos osallistujat saavuttavat MTD: nsä ennen annoseskalaation kuukautta 6, he siirtyvät välittömästi kliiniseen vaiheeseen kiinteässä osallistujaspesifisessä MTD: ssä, joka on määritelty yhden annoksen pitoisuutena, joka on pienempi kuin annos, jolla luokan 3 toksisuus kohdataan.

Annoksen nostovaiheen päätteeksi kaikille osallistujille tehdään ihobiopsia ennen kliinisen vaiheen alkua kiinteällä osallistujakohtaisella MTD:llä. Osallistujakohtaiset ihon fibroblastit johdetaan kunkin osallistujan geneettisten ja mitokondrioiden bioenergeettisten parametrien määrittämiseksi kliinisen vaiheen alussa.

12 kuukauden mittainen kliininen vaihe kiinteässä osallistujaspesifisessä MTD: ssä alkaa 6 kuukauden pituisen annoseskalaatiofaasin lopussa ja jaetaan kahteen 6 kuukauden mittaiseen jaksoon. Tämä 12 kuukauden mittainen aikakehys on välttämätön taudispesifisten kliinisten oireiden kaappaamiseksi, alustavien todisteiden keräämiseksi glyseroli-tributyraatin tehokkuudesta käyttämällä sairauskohtaisia ​​biomarkkereita ja arvioidakseen mahdollisia kliinisiä tuloksia, jotka osoittavat glyserolien tributyraatin kliinistä hyötyä.

12 kuukautta kestävän kliinisen vaiheen alussa, puolivälissä ja lopussa osallistujille tehdään kolme ihobiopsiaa arvioidakseen glyserolitributyraatin mahdollista tehoa:

1. OXPHOSin bioenergeettiset parametrit
2. Kliiniset ja biokemialliset kohde -biomarkkerit.

Koko kliinisen vaiheen ajan kiinteällä MTD:llä toteutamme DLT:ille saman turvallisuusarvioinnin kuin annoksen korotusvaiheessa.

12 kuukautta kestävän kliinisen vaiheen lopussa kiinteällä osallistujakohtaisella MTD:llä tutkijat kotiuttavat osallistujat suoritettuaan seurantatutkimuksen, jonka aikana ei-vakavia haittatapahtumia tai vakavia haittatapahtumia kirjataan 7 tai 30 päivää viimeisen tutkimukseen osallistumispäivän jälkeen.

Glyserolitributyraattia (500 mg) sisältävät kapselit annetaan suun kautta kaikille osallistujille kolme kertaa päivässä 8 unssin lasillisen vettä kanssa tyhjään vatsaan: aamulla, päivällä ja illalla annoksen korotusvaiheen aikana ja kliinisessä vaiheessa kiinteällä tutkimuksen aihekohtainen MTD.

Vaatimustenmukaisuus arvioidaan sähköisellä lokilla/päiväkirjalla, johon osallistujat kirjaavat päivittäin kellonajan, päivämäärän ja pillerimäärän. Osallistujia pyydetään tuomaan takaisin kaikki glyserolitributyraattipullot seuraaville käynneille vaatimustenmukaisuuden arvioimiseksi. Vaatimustenmukaisuus katsotaan tyydyttäväksi, kun 80 % suunnitelluista annoksista on kirjautuneena sisään.

Osallistujia tarkkaillaan erityisesti seuraavien haittatapahtumien (AE) esiintymisen varalta, jotka on luokiteltu CTCAE v4.03:n perusteella:

• Huimaus
• Synkronointi
• Pitoisuus
• Väsymys
• Kuume
• Pahoinvointi
• Oksentelu
• Ripuli
• Hypoglykemia
• Hyperglykemia
• Maitohappoasidoosi tutkijat tarkistavat minkä tahansa haittapuolen henkilökohtaisesti aikataulun mukaisten vierailujen aikana. Osallistujat täyttävät myös sähköisen päiväkirjansa kyselyn, jotta kaikkien AES: n sieppaaminen on helpompaa.

Data and Safety Monitoring Board (DSMB) -komitea on muodostettu, ja siihen kuuluu viisi riippumatonta jäsentä: aineenvaihduntalääkäri, neurologi, bioeetikko, kliininen tutkija ja maallikko äänettömänä jäsenenä. DSMB-komitea tarkastelee turvallisuustietoja jatkuvasti, kokoontuu kahdesti vuodessa tai tapauskohtaisesti tarvittaessa. Tämä DSMB-komitean tarjoama lisävalvonta tarjoaa lisäsuojaa tutkimuksen osallistujille MELAS- ja LHON-PLus-korin kliinisen tutkimuksen aikana.