FCGR3A-geenien polymorfismien esiintymistiheys potilailla, joilla on neuromyelitis Optica -spektrihäiriöitä, anti-oligodendrosyyttien myeliiniproteiinin vasta-ainetauti ja multippeliskleroosi. (PoGe)

FCG -reseptorit (FCGR) ovat proteiineja, jotka ekspressoivat erilaisia ​​immuunisoluja, jotka sitoutuvat immunoglobuliinin G FC -osaan (IgG). Niillä on avainasemassa synnynnäisessä ja mukautuvassa immuniteetissa, tulehduksellisten vasteiden säätelyssä ja autoimmuniteetin estämisessä. Geneettiset tutkimukset ovat osoittaneet, että FCGR -geenien vaihtelut voivat vaikuttaa näihin toimintoihin, muuttaen fagosytoosikapasiteettia ja tulehduksellista vastetta.

Yksi erityisen merkityksellinen polymorfismi on SNP RS396991 FCGR3A -geenissä, joka koodaa NK -soluissa, monosyyteissä ja makrofageissa ekspressoitua reseptoria. Tämä SNP aiheuttaa aminohappofenyylialaniinin (F) korvaamisen valiiinilla (V) asennossa 158, modifioimalla reseptorin affiniteettia IgG: hen. 158 V: n variantti liittyy parantuneeseen tulehdukselliseen vasteeseen, kun taas 158F liittyy vähentyneeseen immuunikompleksin puhdistumiseen, mikä edistää autoimmuunisairauksien, kuten lupuksen, nivelreuman ja sarkoidoosin, patogeneesiä.

Neuromyelitis Optica -spektrihäiriö (NMOSD) ja myeliini-oligodendrosyyttihäiriöt. NMOSD: lle on ominaista auto-vasta-aineet aquaporin-4: tä (AQP4) vastaan, kun taas Mogad liittyy auto-vasta-aineisiin MOG-glykoproteiinia vastaan. Tällä hetkellä ei ole tietoja RS396991 -polymorfismin taajuudesta italialaisessa väestössä, johon nämä sairaudet kärsivät.

Tämän tutkimuksen ensisijaisena tavoitteena on arvioida FCGR3A-V158F-geneettisen polymorfismin taajuutta italialaisten potilaiden ryhmässä, joihin NMOSD ja MOGAD kärsivät. Mukana on myös vertailuryhmä, joka koostuu potilaista, joilla on diagnosoitu multippeliskleroosi (MS).

Tutkimukseen liittyy aikuisia potilaita, joilla on diagnosoitu MS, NMOSD tai Mogad, joka saa hoitoa Lazion alueen eri kliinisissä keskuksissa. Osallistuvien kliinisten keskuksien potilaita valitaan, ja heidän sairauskertomuksiaan, sekä paperipohjaisia ​​että digitaalisia, tarkistetaan kliinisen ja neurokuvaustiedon keräämiseksi. Nämä tiedot järjestetään Excel-tietokannassa ja niihin sisältyy tietoja, kuten ikä, sukupuoli, etninen tausta, kehon massaindeksi, tupakointitila, muiden autoimmuunisairauksien läsnäolo ja ei-neurologiset lisävaikutukset. Lisätietoihin sisältyy diagnoosi (NMOSD, MS tai MOGAD), ikä taudin alkamisessa, taudin kesto, vasta-aineen tila (AQP4 +/- ja MOG +/-), aiemmat taudin muuttavat terapiat ja niiden kesto sekä MRI-tiedot ja laajennettu vammaisuusaseman (EDS) pisteet.

Geneettistä analyysiä varten jokainen tutkimukseen sisältyvä potilas läpäisee noin 5 ml perifeerisen laskimoveren (kerätty EDTA: ssa) verenotto rutiininomaisten verikokeiden aikana. Näytettä käytetään DNA: n uuttamiseen potilaan allekirjoitetun tietoisen suostumuksen seurauksena. Geneettiset tutkimukset tehdään Roomassa Università Cattolica del Sacro Cuoran biotieteiden ja kansanterveyden genomisen lääketieteen osassa Roomassa. DNA -näytteet tallennetaan nimettömästi jopa 10 vuoden ajan hankkeen alkamisesta, ja pääsy rajoitetaan valtuutettuun henkilöstöön. Potilaat tai heidän perheensä voivat pyytää DNA: nsa tuhoamista milloin tahansa.

Rekrytoidaan yhteensä 50 potilasta, jolloin 12 kuukauden ilmoittautumisaika ja kokonaistutkimuksen kesto on 24 kuukautta. Toissijainen tavoite on tunnistaa potentiaaliset erot NMOSD- ja MOGAD -potilaiden kliinisissä ominaisuuksissa, jotka ekspressoivat polymorfismia verrattuna niihin, jotka eivät.

Geneettiset analyysit tehdään genomisen lääketieteen, biotieteiden ja kansanterveyden osastolla, Università Cattolica del Sacro Cuor (Rooma). Uutettua DNA: ta tallennetaan nimettömästi aakkosnumeerisen koodin kanssa enintään 10 vuotta projektin alkamispäivästä samassa laitoksessa. Vain rajoitetulla määrällä valtuutettua henkilöstöä on pääsy näytteisiin ja tietoihin, jollei päätutkija hyväksyy (prof. Massimiliano Mirabella). Potilaan tai heidän perheensä pyynnöstä DNA voidaan tuhota milloin tahansa.

DNA -uutto suoritetaan käyttämällä ohjatun genomisen DNA -eristyspakkausta (Promega) ja kvantifioitu spektrofotometrillä (Thermo Fisher) ja agaroosigeelielektroforeesilla. RS396991 -polymorfismin havaitseminen FCGR3A -geenissä potilailla, joilla on NMOSD, MS ja MOGAD (14).

Kopionumeron muuttuvien alueiden (CNRS) läsnäolo FCGR3A -geenissä arvioidaan MLPA: n (MRC Holland) kautta ja ne varataan vain potilaille, jotka testaavat negatiivisia RS396991 -polymorfismiin Sanger -menetelmän avulla.