Frequência de polimorfismos do gene FCGR3A em pacientes com distúrbios do espectro da neuromielite óptica, doença anticorpo da proteína mielina anti-oligodendrócitos e esclerose múltipla. (PoGe)

Os receptores FCG (FCGR) são proteínas expressas por várias células imunes que se ligam à porção de FC da imunoglobulina G (IgG). Eles desempenham um papel fundamental na imunidade inata e adaptativa, regulando as respostas inflamatórias e impedindo a autoimunidade. Estudos genéticos mostraram que as variações nos genes FCGR podem influenciar essas funções, alterando a capacidade de fagocitose e a resposta inflamatória.

Um polimorfismo particularmente relevante é o SNP RS396991 no gene FCGR3A, que codifica o receptor expresso em células NK, monócitos e macrófagos. Este SNP causa a substituição da fenilalanina de aminoácidos (F) por valina (v) na posição 158, modificando a afinidade do receptor por IgG. A variante de 158V está associada a uma resposta inflamatória aprimorada, enquanto 158F está ligado à redução do complexo imunológico, contribuindo para a patogênese de doenças autoimunes, como lúpus, artrite reumatóide e sarcoidose.

Distúrbio do espectro da neuromielite óptica (NMOSD) e mielina Oligodendrócitos da doença associada à anticorpo glicoproteína (MOGAD) são dois distúrbios inflamatórios do sistema nervoso central, muitas vezes grave e recorrente. O NMOSD é caracterizado por autoanticorpos contra a aquaporina-4 (AQP4), enquanto o MOGAD está associado a autoanticorpos contra a glicoproteína MOG. Atualmente, não há dados sobre a frequência do polimorfismo RS396991 na população italiana afetada por essas doenças.

O objetivo principal deste estudo é avaliar a frequência do polimorfismo genético FCGR3A-V158F em uma coorte de pacientes italianos afetados pelo NMOSD e MOGAD. Também será incluído um grupo de comparação composto por pacientes diagnosticados com esclerose múltipla (EM).

O estudo envolverá pacientes adultos diagnosticados com EM, NMOSD ou MOGAD, recebendo atendimento em vários centros clínicos na região de Lazio. Pacientes dos centros clínicos participantes serão selecionados e seus registros médicos, baseados em papel e digital, serão revisados ​​para coletar dados clínicos e de neuroimagem. Esses dados serão organizados em um banco de dados do Excel e incluirão informações como idade, sexo, origem étnica, índice de massa corporal, status de fumante, presença de outras doenças autoimunes e comorbidades não neurológicas. Informações registradas adicionais incluirão diagnóstico (NMOSD, EM ou MOGAD), idade no início da doença, duração da doença, status de anticorpo (aqp4 +/- e mog +/-), terapias anteriores da modificação de doenças e sua duração, bem como escala de dados de dados de deficiência e deficiência expandida (EDSS).

Para análise genética, cada paciente incluído no estudo passará por uma coleta de sangue de aproximadamente 5 ml de sangue venoso periférico (coletado no EDTA) durante exames de sangue de rotina. A amostra será usada para extração de DNA, seguindo o consentimento informado assinado do paciente. Investigações genéticas serão realizadas na seção de medicina genômica do Departamento de Ciências da Vida e Saúde Pública da Università Cattolica del Sacro Cuore em Roma. As amostras de DNA serão armazenadas anonimamente por até 10 anos após o início do projeto, com o acesso restrito ao pessoal autorizado. Os pacientes ou suas famílias podem solicitar a destruição de seu DNA a qualquer momento.

Um total de 50 pacientes será recrutado, com um período de inscrição de 12 meses e uma duração total do estudo de 24 meses. O objetivo secundário é identificar possíveis diferenças nas características clínicas dos pacientes com NMOSD e MOGAD que expressam o polimorfismo em comparação com aqueles que não o fazem.

As análises genéticas serão realizadas na seção de medicina genômica, do Departamento de Ciências da Vida e saúde pública, Università Cattolica del Sacro Cuore (Roma). O DNA extraído será armazenado anonimamente com um código alfanumérico por um máximo de 10 anos a partir da data de início do projeto na mesma instituição. Somente um número limitado de pessoal autorizado terá acesso às amostras e dados, sujeito à aprovação do investigador principal (Prof. Massimiliano Mirabella). Se solicitado pelo paciente ou por sua família, o DNA pode ser destruído a qualquer momento.

A extração de DNA será realizada usando o kit de isolamento de DNA genômico do Mago (Promega) e quantificado por espectrofotômetro (Thermo Fisher) e eletroforese em gel de agarose. A detecção do polimorfismo RS396991 no gene FCGR3A em pacientes com NMOSD, MS e MOGAD será realizado usando sequenciamento de Sanger, empregando iniciadores descritos por Mahaweni et al. (14).

A presença de regiões variáveis ​​de número de cópias (CNRs) no gene FCGR3A será avaliada através do MLPA (MRC Holland) e será reservada apenas para pacientes que testam negativos para o polimorfismo RS396991 usando o método Sanger.