Frecuencia de polimorfismos del gen FCGR3A en pacientes con trastornos del espectro de neuromielitis óptica, enfermedad de anticuerpos proteína anti-oligodendrocitos de mielina y esclerosis múltiple. (PoGe)

Los receptores FCG (FCGR) son proteínas expresadas por varias células inmunes que se unen a la porción FC de la inmunoglobulina G (IgG). Desempeñan un papel clave en la inmunidad innata y adaptativa, regulando las respuestas inflamatorias y evitando la autoinmunidad. Los estudios genéticos han demostrado que las variaciones en los genes FCGR pueden influir en estas funciones, alterando la capacidad de fagocitosis y la respuesta inflamatoria.

Un polimorfismo particularmente relevante es SNP RS396991 en el gen FCGR3A, que codifica el receptor expresado en células NK, monocitos y macrófagos. Este SNP causa la sustitución del aminoácido fenilalanina (F) con valina (V) en la posición 158, modificando la afinidad del receptor por IgG. La variante de 158V se asocia con una respuesta inflamatoria mejorada, mientras que 158F está vinculada a una eliminación reducida del complejo inmune, contribuyendo a la patogénesis de enfermedades autoinmunes como el lupus, la artritis reumatoide y la sarcoidosis.

El trastorno del espectro de la neuromielitis óptica (NMOSD) y la enfermedad asociada a anticuerpos de glucoproteína de oligodendrocitos de mielina son dos trastornos inflamatorios del sistema nervioso central, a menudo grave y recurrente. NMOSD se caracteriza por autoanticuerpos contra Aquaporin-4 (AQP4), mientras que Mogad está asociado con autoanticuerpos contra la glucoproteína MOG. Actualmente no hay datos sobre la frecuencia del polimorfismo RS396991 en la población italiana afectada por estas enfermedades.

El objetivo principal de este estudio es evaluar la frecuencia del polimorfismo genético FCGR3A-V158F en una cohorte de pacientes italianos afectados por NMOSD y MOGAD. También se incluirá un grupo de comparación compuesto por pacientes diagnosticados con esclerosis múltiple (EM).

El estudio involucrará a pacientes adultos diagnosticados con EM, NMOSD o Mogad, que reciba atención en varios centros clínicos de la región de Lazio. Se seleccionarán pacientes de los centros clínicos participantes, y sus registros médicos, tanto en papel como digitales, serán revisados ​​para recopilar datos clínicos y de neuroimagen. Estos datos se organizarán en una base de datos de Excel e incluirán información como edad, sexo, antecedentes étnicos, índice de masa corporal, estado de fumar, presencia de otras enfermedades autoinmunes y comorbilidades no neurológicas. La información registrada adicional incluirá el diagnóstico (NMOSD, EM o MOGAD), edad de inicio de la enfermedad, duración de la enfermedad, estado de anticuerpos (AQP4 +/- y MOG +/-), terapias de modificación de la enfermedad previas y su duración, así como datos de datos de discapacidad de resonancia magnética y puntajes de escala de estado de discapacidad expandida (EDSS).

Para el análisis genético, cada paciente incluido en el estudio se someterá a un sorteo de sangre de aproximadamente 5 ml de sangre venosa periférica (recolectada en EDTA) durante los análisis de sangre de rutina. La muestra se utilizará para la extracción de ADN, siguiendo el consentimiento informado firmado del paciente. Las investigaciones genéticas se realizarán en la sección de medicina genómica del Departamento de Ciencias de la Vida y la Salud Pública de la Università Cattolica del Sacro Cuore en Roma. Las muestras de ADN se almacenarán de forma anónima durante hasta 10 años desde el comienzo del proyecto, con acceso restringido al personal autorizado. Los pacientes o sus familias pueden solicitar la destrucción de su ADN en cualquier momento.

Se reclutarán un total de 50 pacientes, con un período de inscripción de 12 meses y una duración total del estudio de 24 meses. El objetivo secundario es identificar posibles diferencias en las características clínicas de los pacientes con NMOSD y Mogad que expresan el polimorfismo en comparación con los que no lo hacen.

Los análisis genéticos se realizarán en la sección de Medicina Genómica, Departamento de Ciencias de la Vida y Salud Pública, Università Cattolica del Sacro Cuore (Roma). El ADN extraído se almacenará de forma anónima de un código alfanumérico durante un máximo de 10 años a partir de la fecha de inicio del proyecto en la misma institución. Solo un número limitado de personal autorizado tendrá acceso a las muestras y datos, sujeto a la aprobación del investigador principal (Prof. Massimiliano Mirabella). Si el paciente o su familia lo solicitan, el ADN puede ser destruido en cualquier momento.

La extracción de ADN se realizará utilizando el kit de aislamiento de ADN genómico del mago (Promega) y cuantificado a través del espectrofotómetro (Thermo Fisher) y la electroforesis en gel de agarosa. La detección del polimorfismo RS396991 en el gen FCGR3A en pacientes con NMOSD, MS y MOGAD se llevará a cabo utilizando la secuenciación de Sanger, empleando cebadores descritos por Mahaweni et al. (14).

La presencia de regiones variables de número de copias (CNR) en el gen FCGR3A se evaluará a través de MLPA (MRC Holland) y se reservará solo para pacientes que prueben negativos para el polimorfismo RS396991 utilizando el método Sanger.