Частота полиморфизмов генов FCGR3A у пациентов с расстройствами спектра оптики, антиолигодендроцитарных белков, а также расстройства антиолигодендроцитов миелинового белка и рассеянный склероз. (PoGe)

Рецепторы FCG (FCGR) представляют собой белки, экспрессируемые различными иммунными клетками, которые связываются с частью FC иммуноглобулина G (IgG). Они играют ключевую роль в врожденном и адаптивном иммунитете, регулируя воспалительные реакции и предотвращая аутоиммунитет. Генетические исследования показали, что вариации в генах FCGR могут влиять на эти функции, изменяя способность фагоцитоза и воспалительный ответ.

Одним из особенно важных полиморфизма является SNP RS396991 в гене FCGR3A, который кодирует рецептор, экспрессируемый на NK -клетках, моноцитах и ​​макрофагах. Этот SNP вызывает замещение аминокислотного фенилаланина (F) валином (V) в положении 158, модифицируя аффинность рецептора к IgG. Вариант 158V связан с усиленным воспалительным ответом, в то время как 158F связан с снижением клиренса иммунного комплекса, способствуя патогенезу аутоиммунных заболеваний, таких как волчанка, ревматоидный артрит и саркоидоз.

Спектр нейромиелита оптического спектра (NMOSD) и миелинового олигодендроцитов гликопротеинового антитела, связанного с антителом, заболеванием (MOGAD) являются двумя воспалительными расстройствами центральной нервной системы, часто тяжелыми и рецидивирующими. NMOSD характеризуется аутоантителами против аквапорина-4 (AQP4), в то время как MOGAD связан с аутоантителами против гликопротеина MOG. В настоящее время нет данных о частоте полиморфизма RS396991 в итальянской популяции, затронутых этими заболеваниями.

Основной целью этого исследования является оценка частоты генетического полиморфизма FCGR3A-V158F у когорты итальянских пациентов, пораженных NMOSD и MOGAD. Группа сравнения, состоящая из пациентов с диагнозом рассеянного склероза (МС), также будет включена.

В исследовании будут участвовать взрослые пациенты с диагнозом MS, NMOSD или MOGAD, получающие помощь в различных клинических центрах в регионе Лацио. Пациенты из участвующих клинических центров будут выбраны, и их медицинские записи, как бумажные, так и цифровые, будут рассмотрены для сбора клинических и нейровизуализационных данных. Эти данные будут организованы в базе данных Excel и будут включать такую ​​информацию, как возраст, пол, этнический фон, индекс массы тела, статус курения, наличие других аутоиммунных заболеваний и неврологические сопутствующие заболевания. Дополнительная зарегистрированная информация будет включать диагноз (NMOSD, MS или MOGAD), возраст при возникновении заболевания, продолжительность заболевания, статус антител (AQP4 +/- и MOG +/-), предыдущие терапии, модифицирующие заболевание, а также их продолжительность, а также данные о МРТ и расширенные оценки статуса инвалидности (EDSS).

Для генетического анализа каждый пациент, включенный в исследование, будет подвергаться крови примерно 5 мл периферической венозной крови (собранной в ЭДТА) во время обычных анализов крови. Образец будет использоваться для экстракции ДНК после подписанного информированного согласия пациента. Генетические исследования будут проводиться в разделе геномной медицины Департамента наук и общественного здравоохранения в Università Cattolica del Sacro Cuore в Риме. Образцы ДНК будут храниться анонимно в течение 10 лет с начала проекта, причем доступ ограничен уполномоченным персоналом. Пациенты или их семьи могут запросить уничтожение своей ДНК в любое время.

В общей сложности будет набрано 50 пациентов с 12-месячным периодом регистрации и общей продолжительностью исследования 24 месяца. Вторичная цель состоит в том, чтобы выявить потенциальные различия в клинических характеристиках пациентов с NMOSD и MOGAD, которые экспрессируют полиморфизм по сравнению с теми, кто этого не делает.

Генетический анализ будет проводиться в разделе геномной медицины, Департамента наук о жизни и общественного здравоохранения, Università Cattolica del Sacro Cuore (Rome). Извлеченная ДНК будет храниться анонимно с буквенно -цифровым кодом максимум 10 лет с даты начала проекта в том же учреждении. Только ограниченное количество уполномоченного персонала будет иметь доступ к образцам и данным, при условии одобрения основного следователя (проф. Массимилиано Мирабелла). Если запрошен пациент или их семья, ДНК может быть уничтожена в любое время.

Экстракция ДНК будет выполнена с использованием набора для выделения геномной ДНК Wizard (Promega) и количественно определяется с помощью спектрофотометра (Thermo Fisher) и электрофореза в агарозном геле. Обнаружение полиморфизма RS396991 в гене FCGR3A у пациентов с NMOSD, MS и MOGAD будет выполняться с использованием секвенирования Sanger, используя праймеры, описанные Mahaweni et al. (14).

Наличие областей переменных числа копий (CNR) в гене FCGR3A будет оцениваться с помощью MLPA (MRC Holland) и будет зарезервировано только для пациентов, которые испытывают отрицательные для полиморфизма RS396991 с использованием метода Sanger.