Frekvens av FCGR3A-genpolymorfismer hos patienter med neuromyelit OpticA-spektrumstörningar, anti-oligodendrocytmyelinproteinantikroppssjukdom och multipel skleros. (PoGe)

FCG -receptorer (FCGR) är proteiner uttryckta av olika immunceller som binder till FC -delen av immunglobulin G (IgG). De spelar en nyckelroll i medfödd och adaptiv immunitet, reglerar inflammatoriska svar och förhindrar autoimmunitet. Genetiska studier har visat att variationer i FCGR -gener kan påverka dessa funktioner, vilket förändrar fagocytoskapacitet och inflammatoriskt svar.

En särskilt relevant polymorfism är SNP Rs396991 i FCGR3A -genen, som kodar för receptorn uttryckt på NK -celler, monocyter och makrofager. Denna SNP orsakar substitution av aminosyran fenylalanin (F) med valin (V) vid position 158, vilket modifierar receptorns affinitet för IgG. 158V -varianten är associerad med ett förbättrat inflammatoriskt svar, medan 158F är kopplat till minskad immunkomplex clearance, vilket bidrar till patogenesen av autoimmuna sjukdomar såsom lupus, reumatoid artrit och sarkoidos.

Neuromyelitis optica spektrumsjukdom (NMOSD) och myelin oligodendrocytglykoprotein antikroppassocierad sjukdom (MOGAD) är två inflammatoriska störningar i centrala nervsystemet, ofta allvarliga och återkommande. NMOSD kännetecknas av autoantikroppar mot aquaporin-4 (AQP4), medan Mogad är associerad med autoantikroppar mot Mog-glykoprotein. Det finns för närvarande inga uppgifter om frekvensen av Rs396991 -polymorfismen i den italienska befolkningen som drabbats av dessa sjukdomar.

Det primära målet med denna studie är att bedöma frekvensen av FCGR3A-V158F-genetisk polymorfism hos en kohort av italienska patienter som drabbats av NMOSD och MOGAD. En jämförelsegrupp som består av patienter som diagnostiserats med multipel skleros (MS) kommer också att inkluderas.

Studien kommer att involvera vuxna patienter som diagnostiserats med MS, NMOSD eller MOGAD, som får vård vid olika kliniska centra i Lazio -regionen. Patienter från de deltagande kliniska centra kommer att väljas och deras medicinska journaler, både pappersbaserade och digitala, kommer att granskas för att samla in kliniska och neuroimaging-data. Dessa data kommer att organiseras i en Excel-databas och kommer att innehålla information som ålder, kön, etnisk bakgrund, kroppsmassaindex, rökstatus, närvaro av andra autoimmuna sjukdomar och icke-neurologiska komorbiditeter. Ytterligare inspelad information kommer att inkludera diagnos (NMOSD, MS eller Mogad), ålder vid sjukdomens början, sjukdomsvaraktighet, antikroppsstatus (AQP4 +/- och MOG +/-), tidigare sjukdomsmodifierande terapier och deras varaktighet, samt MRI-data och utökad skalor (EDSS) -resultat.

För genetisk analys kommer varje patient som ingår i studien att genomgå en bloddragning av cirka 5 ml perifert venöst blod (samlat i EDTA) under rutinmässiga blodprover. Provet kommer att användas för DNA -extraktion, efter patientens undertecknade informerade samtycke. Genetiska undersökningar kommer att genomföras vid avsnittet Genomic Medicine i avdelningen för livsvetenskap och folkhälsa vid Università Cattolica del Sacro Cuore i Rom. DNA -prover kommer att lagras anonymt i upp till tio år från projektets början, med tillgång begränsad till auktoriserad personal. Patienter eller deras familjer kan begära förstörelse av deras DNA när som helst.

Totalt kommer 50 patienter att rekryteras, med en 12-månaders inskrivningsperiod och en total studievaraktighet på 24 månader. Det sekundära målet är att identifiera potentiella skillnader i de kliniska egenskaperna hos NMOSD- och MOGAD -patienter som uttrycker polymorfismen jämfört med dem som inte gör det.

Genetiska analyser kommer att genomföras vid avsnittet av genomisk medicin, avdelningen för livsvetenskap och folkhälsa, Università Cattolica del Sacro Cuore (Rom). Det extraherade DNA kommer att lagras anonymt med en alfanumerisk kod under högst 10 år från startdatum för projektet på samma institution. Endast ett begränsat antal auktoriserade personal har tillgång till prover och uppgifter, med förbehåll för godkännande från huvudutredaren (Prof. Massimiliano Mirabella). På begäran av patienten eller deras familj kan DNA förstöras när som helst.

DNA -extraktion kommer att utföras med hjälp av Wizard Genomic DNA Isolation Kit (Promega) och kvantifieras via spektrofotometer (Thermo Fisher) och agarosgelelektrofores. Detekteringen av RS396991 -polymorfismen i FCGR3A -genen hos patienter med NMOSD, MS och Mogad kommer att genomföras med Sanger -sekvensering, med användning av primrar som beskrivs av Mahaweni et al. (14).

Närvaron av kopieringsnummervariabla regioner (CNR: er) i FCGR3A -genen kommer att bedömas genom MLPA (MRC Holland) och kommer endast att reserveras för patienter som testar negativt för Rs396991 -polymorfismen med Sanger -metoden.