Frekvens af FCGR3A-genpolymorfismer hos patienter med neuromyelitis optica-spektrumforstyrrelser, anti-oligodendrocytmyelinproteinantistofsygdom og multipel sklerose. (PoGe)

FCG -receptorer (FCGR) er proteiner udtrykt af forskellige immunceller, der binder til FC -delen af ​​immunoglobulin G (IgG). De spiller en nøglerolle i medfødt og adaptiv immunitet, regulerer inflammatoriske reaktioner og forhindrer autoimmunitet. Genetiske undersøgelser har vist, at variationer i FCGR -gener kan påvirke disse funktioner, ændre fagocytosekapacitet og inflammatorisk respons.

En særlig relevant polymorfisme er SNP Rs396991 i FCGR3A -genet, der koder for receptoren udtrykt på NK -celler, monocytter og makrofager. Denne SNP forårsager substitution af aminosyrephenylalanin (F) med valin (V) i position 158, hvilket modificerer receptorens affinitet for IgG. 158V -varianten er forbundet med en forbedret inflammatorisk respons, mens 158F er knyttet til reduceret immunkompleks clearance, der bidrager til patogenesen af ​​autoimmune sygdomme, såsom lupus, reumatoid arthritis og sarkoidose.

Neuromyelitis Optica Spectrum Disorder (NMOSD) og myelin oligodendrocytglycoprotein-antistof-associeret sygdom (MOGAD) er to inflammatoriske lidelser i det centrale nervesystem, ofte alvorlige og tilbagevendende. NMOSD er kendetegnet ved autoantistoffer mod aquaporin-4 (AQP4), mens MOGAD er forbundet med autoantistoffer mod MOG-glycoprotein. Der er i øjeblikket ingen data om hyppigheden af ​​Rs396991 -polymorfismen i den italienske population, der er påvirket af disse sygdomme.

Det primære mål med denne undersøgelse er at vurdere hyppigheden af ​​FCGR3A-V158F genetisk polymorfisme i en kohort af italienske patienter påvirket af NMOSD og MOGAD. En sammenligningsgruppe sammensat af patienter, der er diagnosticeret med multipel sklerose (MS), vil også blive inkluderet.

Undersøgelsen vil involvere voksne patienter, der er diagnosticeret med MS, NMOSD eller MOGAD, der modtager pleje på forskellige kliniske centre i Lazio -regionen. Patienter fra de deltagende kliniske centre vil blive valgt, og deres medicinske poster, både papirbaseret og digital, vil blive gennemgået for at indsamle kliniske og neuroimaging data. Disse data vil blive organiseret i en Excel-database og vil omfatte information såsom alder, køn, etnisk baggrund, kropsmasseindeks, rygestatus, tilstedeværelse af andre autoimmune sygdomme og ikke-neurologiske komorbiditeter. Yderligere registreret information vil omfatte diagnose (NMOSD, MS eller MOGAD), alder ved sygdomsdebut, sygdomsvarighed, antistofstatus (AQP4 +/- og MOG +/-), tidligere sygdomsmodificerende terapier og deres varighed samt MRI-data og udvidet handicap status skala (EDSS) scoringer.

Til genetisk analyse vil hver patient inkluderet i undersøgelsen gennemgå et blodtrækning på ca. 5 ml perifert venøs blod (indsamlet i EDTA) under rutinemæssige blodprøver. Prøven vil blive brugt til DNA -ekstraktion efter patientens underskrevne informerede samtykke. Genetiske undersøgelser vil blive gennemført i afsnittet Genomisk medicin i Institut for Livsvidenskab og folkesundhed ved Università Cattolica del Sacro Cuore i Rom. DNA -prøver gemmes anonymt i op til 10 år fra starten af ​​projektet, med adgang begrænset til autoriseret personale. Patienter eller deres familier kan til enhver tid anmode om ødelæggelse af deres DNA.

I alt 50 patienter rekrutteres med en 12-måneders tilmeldingsperiode og en samlet undersøgelsesvarighed på 24 måneder. Det sekundære mål er at identificere potentielle forskelle i de kliniske egenskaber hos NMOSD- og MOGAD -patienter, der udtrykker polymorfismen sammenlignet med dem, der ikke gør det.

Genetiske analyser vil blive udført på sektionen af ​​genomisk medicin, Institut for Livsvidenskab og folkesundhed, Università Cattolica del Sacro Cuore (Rom). Det ekstraherede DNA gemmes anonymt med en alfanumerisk kode i højst 10 år fra projektets startdato på den samme institution. Kun et begrænset antal autoriserede personale har adgang til prøverne og dataene, med forbehold af godkendelse fra den vigtigste efterforsker (prof. Massimiliano Mirabella). Hvis patienten eller deres familie anmodes om, kan DNA ødelægges når som helst.

DNA -ekstraktion udføres under anvendelse af Wizard Genomic DNA Isolation Kit (Promega) og kvantificeret via spektrofotometer (Thermo Fisher) og Agarose Gel Electrophorese. Påvisningen af ​​Rs396991 -polymorfismen i FCGR3A -genet hos patienter med NMOSD, MS og MOGAD vil blive udført under anvendelse af Sanger -sekventering og anvender primere beskrevet af Mahaweni et al. (14).

Tilstedeværelsen af ​​kopienummervariable regioner (CNR'er) i FCGR3A -genet vurderes gennem MLPA (MRC Holland) og vil kun være reserveret til patienter, der tester negativt for Rs396991 -polymorfismen ved anvendelse af Sanger -metoden.