Frequenza dei polimorfismi del gene FCGR3A nei pazienti con disturbi dello spettro della neuromielite ottica, malattia anticorpale proteica anti-oligodendrociti e sclerosi multipla. (PoGe)

I recettori FCG (FCGR) sono proteine ​​espresse da varie cellule immunitarie che si legano alla porzione FC dell'immunoglobulina G (IgG). Svolgono un ruolo chiave nell'immunità innata e adattiva, regolando le risposte infiammatorie e prevenendo l'autoimmunità. Studi genetici hanno dimostrato che le variazioni dei geni FCGR possono influenzare queste funzioni, alterando la capacità di fagocitosi e la risposta infiammatoria.

Un polimorfismo particolarmente rilevante è SNP RS396991 nel gene FCGR3A, che codifica il recettore espresso su cellule NK, monociti e macrofagi. Questo SNP provoca la sostituzione della fenilalanina aminoacidica (F) con valina (V) nella posizione 158, modificando l'affinità del recettore per le IgG. La variante 158V è associata a una risposta infiammatoria migliorata, mentre 158F è collegato alla ridotta clearance del complesso immunitario, contribuendo alla patogenesi delle malattie autoimmuni come lupus, artrite reumatoide e sarcoidosi.

Il disturbo dello spettro della neuromielite optica (NMOSD) e la malattia associata all'anticorpo glicoproteico-glicoproteico (MOGAD) sono due disturbi infiammatori del sistema nervoso centrale, spesso gravi e ricorrenti. NMOSD è caratterizzato da autoanticorpi contro Aquaporin-4 (AQP4), mentre Mogad è associato ad autoanticorpi contro la glicoproteina MOG. Al momento non ci sono dati sulla frequenza del polimorfismo rs396991 nella popolazione italiana colpita da queste malattie.

L'obiettivo principale di questo studio è valutare la frequenza del polimorfismo genetico FCGR3A-V158F in una coorte di pazienti italiani affetti da NMOSD e MOGAD. Verrà anche incluso un gruppo di confronto composto da pazienti con diagnosi di sclerosi multipla (SM).

Lo studio coinvolgerà pazienti adulti con diagnosi di SM, NMOSD o MOGAD, che ricevono cure in vari centri clinici nella regione di Lazio. I pazienti dei centri clinici partecipanti saranno selezionati e le loro cartelle cliniche, sia in carta che digitale, saranno riviste per raccogliere dati clinici e di neuroimaging. Questi dati saranno organizzati in un database Excel e includeranno informazioni come età, sesso, background etnico, indice di massa corporea, stato di fumo, presenza di altre malattie autoimmuni e comorbidità non neurologiche. Ulteriori informazioni registrate includeranno la diagnosi (NMOSD, MS o MOGAD), l'età all'insorgenza della malattia, la durata della malattia, lo stato degli anticorpi (AQP4 +/- e il MOG +/-), le precedenti terapie che modificano la malattia e la loro durata, nonché i dati di MRI e i punteggi della scala di status di disabilità ampliati (EDSS).

Per l'analisi genetica, ogni paziente incluso nello studio subirà un prelievo di sangue di circa 5 ml di sangue venoso periferico (raccolto in EDTA) durante gli esami del sangue di routine. Il campione verrà utilizzato per l'estrazione del DNA, seguendo il consenso informato firmato dal paziente. Le indagini genetiche saranno condotte nella sezione di medicina genomica del Dipartimento della vita e della salute pubblica presso l'Università Cattolica del Sacro Cuore a Roma. I campioni di DNA saranno conservati in modo anonimo per un massimo di 10 anni dall'inizio del progetto, con accesso limitato al personale autorizzato. I pazienti o le loro famiglie possono richiedere la distruzione del proprio DNA in qualsiasi momento.

Verranno reclutati un totale di 50 pazienti, con un periodo di iscrizione di 12 mesi e una durata totale dello studio di 24 mesi. L'obiettivo secondario è identificare potenziali differenze nelle caratteristiche cliniche dei pazienti NMOSD e Mogad che esprimono il polimorfismo rispetto a quelli che non lo fanno.

Le analisi genetiche saranno condotte nella sezione della medicina genomica, del dipartimento della vita e della salute pubblica, Universitità Cattolica del Sacro Cuore (Roma). Il DNA estratto verrà archiviato in modo anonimo con un codice alfanumerico per un massimo di 10 anni dalla data di inizio del progetto presso la stessa istituzione. Solo un numero limitato di personale autorizzato avrà accesso ai campioni e ai dati, previa approvazione da parte dell'investigatore principale (Prof. Massimiliano Mirabella). Se richiesto dal paziente o dalla loro famiglia, il DNA può essere distrutto in qualsiasi momento.

L'estrazione del DNA verrà eseguita utilizzando il kit di isolamento del DNA genomico (Promega) e quantificato tramite spettrofotometro (Thermo Fisher) ed elettroforesi su gel di agarosio. Il rilevamento del polimorfismo rs396991 nel gene FCGR3A nei pazienti con NMOSD, MS e MOGAD verrà effettuato usando il sequenziamento di Sanger, impiegando primer descritti da Mahaweni et al. (14).

La presenza di regioni variabili del numero di copia (CNR) nel gene FCGR3A sarà valutata tramite MLPA (MRC Holland) e saranno riservate solo ai pazienti che sono testati negativi per il polimorfismo rs396991 usando il metodo Sanger.