Epänormaalisti hedelmöitettyjen alkioiden tutkimus (SAFE)
Prospektiivinen havainnointitutkimus blastosystien morfokinetiikasta ja ploidiasta, jolla on epänormaali hedelmöitys (1pn, 2,1pn ja 3pn) hedelmöitysmuutosten alkuperän tunnistamiseksi
Tämän havainnollisen tutkimuksen tavoitteena on määrittää haploidien ja triploidisten alkioiden diploidianopeus in vitro -hedelmöityssykleistä (IVF). Tärkeimmät kysymykset, joihin sen tavoitteena on vastata, ovat:
- Voiko molekyylien geneettistä hedelmöitystarkistusta epänormaalisti hedelmöitettyjen alkioiden käyttömahdollisuuksien laajentamiseen pariskunnille avustetun lisääntymishoidon aikana?
- Onko kromosomaalinen menetys tai voitto esiintymässä epänormaalisti hedelmöitetyissä alkioissa pääosin äidin alkuperästä?
Tätä tarkoitusta varten arvioimme noin 300 alkion morfokinetiikkaa ja ploidiaa, jolla on erityyppisiä epänormaaleja pronukleaarisia kuvioita (1pn, 2,1pn ja 3pn), jotka saavuttavat blastokystissä. Aina kun mahdollista, alkioita, joilla on diploidikromosomaalinen komplementti, arvioidaan myös kromosomaalisen sarjan alkuperän (äidin tai isäna) määrittämiseksi.
Opiskelet seuraavat aiemmin suunniteltuja IVF/ICSI -hoitoa, eikä osallistumiseen tarvita lisäkäyntejä/interventioita.
Tutkimuksen yleiskatsaus
Tila
Yksityiskohtainen kuvaus
Kromosomit ovat solurakenteita, jotka sisältävät suurimman osan elävän organismin geneettisistä tiedoista. Galetes (munasolut ja siittiöt) sisältävät vain yhden sarjan 23 kromosomia rakenteissa, jotka tunnetaan nimellä pronuclei (PN). Hedelmöityksen jälkeen munasoluista peräisin olevat 23 kromosomia ja sperman 23 kromosomia yhdistyvät 2PN -zygootin muodostamiseksi, joka sisältää yhteensä 46 kromosomia.
Avustetuissa lisääntymislaboratorioissa embryologit voivat määrittää morfologisen arvioinnin avulla, oliko hedelmöitysprosessi normaalia (2PN) vai epänormaalia (0PN, 1PN tai> 2PN). Taidehoitoa varten vain menestyksekkäästi hedelmöitetty munasolu (2PN), joka kehittyy blastokystivaiheeseen, voi olla sopiva alkionsiirtoon. Aikaisemmat tutkimukset ovat kuitenkin osoittaneet, että joillakin munasolujen alkioilla, joilla on epänormaalia hedelmöitystä, voivat olla normaalia kromosomaalipitoisuutta ja että niitä voidaan käyttää taiteessa, kun normaalin hedelmöityksen alkioita ei ole saatavana.
On olemassa geneettisiä analyysitekniikoita paitsi, että alkio on euploidinen (sisältää normaalin määrän kromosomeja), vaan myös arvioidakseen, onko se haploidi, diploidi tai triploidi (1pn, 2,1pn ja vastaavasti 3PN). Näitä tekniikoita voidaan soveltaa "pelastus" -alkioihin, joilla on tällä hetkellä hylätty epänormaali hedelmöitys. Tämä lähestymistapa voi olla hyödyllinen IVF -potilaille, joilla on rajoitettu määrä elinkelpoisia alkioita (vähentyneet munasarjojen varantotapaukset, äidin ikä, huono vaste munasarjojen stimulaatiolle jne.).
Pätevä tutkimusetiikkakomitea on hyväksynyt nykyisen tulevaisuuden ja havainnollisen tutkimuksen, ja jokaista potentiaalista osallistujaa pyydetään allekirjoittamaan tutkimus tietoinen suostumus.
300 tutkimusta, joka on osa tutkimusta, rekrytoidaan yhteistyökeskuksen laboratorioon hedelmöityspäivänä tavanomaisten IVF -menettelyjen suorittamisen jälkeen. Näiden samojen rutiinimenetelmien jälkeen molempien vanhempien biologiset näytteet varastoidaan myös geneettisen analyysin suorittamiseksi kromosomaalisten poikkeavuuksien alkuperän määrittämiseksi. Biopsia otetaan valituista alkioista, kun ne saavuttavat blastokystin vaiheen geneettiseen analyysiin, joka sallii havaita, onko kromosomaalista poikkeavuutta todellakin. Kaikki alkiot, joita ei ole vahvistettu kromosomaalisesti normaaleiksi, sulataan, pestään ja viljellään toiselle biopsialle niiden aikaisemman diagnoosin ja kromosomaalisten poikkeavuuksien alkuperän varmistamiseksi. Tätä uutta analyysiä varten kerätään ja tallennetaan biopsioiden lisäksi sulatettujen blastokystien kulttuuriaineiden yksittäisiä näytteitä. Näytteet lähetetään Igenomixiin geneettisen tutkimuksen ja lisätietojen analysoimiseksi.
Tutkimuksen odotettu kesto on 18 kuukautta. Alkioita sisällytetään osallistuvaan keskukseen arvioidun 13 kuukauden ajan. Osallistujien osallistuminen tutkimukseen liittyy vain suostumuslomakkeen allekirjoituksen hetkeen. Poikkeuksellisesti epänormaalin hedelmöityksen alkioiden, jotka ilmoitettiin kromosomaalisesti normaaliksi ensimmäisen biopsian jälkeen, voidaan katsoa siirtävän, mikäli muita alkioita ei ole käytettävissä. Jos potilas päättää jatkaa siirtoa, hänen kliininen seuranta on osa tutkimusta, kunnes se saavuttaa meneillään oleva raskaus (12 raskausviikkoa). Sen jälkeen hänen osallistumisensa tutkimukseen päättyy, mutta hänen lääkärinsä jatkaa raskauden seurantaa, kunnes toimitus on tarvittaessa tavanomaisen kliinisen käytännön mukaisesti.
Opintotyyppi
Ilmoittautuminen (Arvioitu)
Yhteystiedot ja paikat
Opiskeluyhteys
- Nimi: Carlos A Gomez De La Cruz, BSc MSc
- Puhelinnumero: +34963905310
- Sähköposti: carlos.gomez@igenomix.com
Opiskelupaikat
-
-
Valencia
-
Valencia, Valencia, Espanja, 46015
- Rekrytointi
- Equipo Médico Crespo Valencia
-
Ottaa yhteyttä:
- Jose Teruel López, BSc MSc
- Puhelinnumero: +34 961 042 557
- Sähköposti: jteruel@juanacrespo.es
-
Päätutkija:
- María Escribá Suarez, BSc MSc
-
Päätutkija:
- Marina Benavent Martínez, BSc MSc
-
-
Osallistumiskriteerit
Kelpoisuusvaatimukset
Opintokelpoiset iät
- Aikuinen
Hyväksyy terveitä vapaaehtoisia
Näytteenottomenetelmä
Tutkimusväestö
Kuvaus
Sisällyttämiskriteerit:
- Taidepotilaat, jotka allekirjoittavat tutkimuksen tietoisen suostumuksen.
- Ikä: naisten ≤ 49 vuotta ja siemennesteet miehistä ≤ 60 vuotta. Kosikerroksen lahjoitus on sallittua.
- ≥1 Blastosystit munasoluista, joilla on epänormaali pronukleaarinen kuvio (1pn, 2,1pn ja/tai 3pn) ja 2 polaarisen rungon (PB) esiintymisen kanssa, jota viljeltiin ajankiulan inkubaattorissa.
Poissulkemiskriteerit:
- Tässä tutkimuksessa ei ole otettu huomioon poissulkemiskriteerejä.
Opintosuunnitelma
Miten tutkimus on suunniteltu?
Suunnittelun yksityiskohdat
Kohortit ja interventiot
Ryhmä/Kohortti |
Interventio / Hoito |
|---|---|
|
Blastosystit epänormaalisti hedelmöitetyistä munasoluista avustetun lisääntymisen aikana
Laboratorion tavanomaisten ICSI/IVF -menettelyjen aikana hedelmöitystä tarkkaileva alkologi tunnistaa alkiot epänormaalin pronukleaarisen mallin kanssa ja ennalta valitsevat ne tutkimusta varten. Näitä alkioita viljellään aikataulun inkubaattorissa laboratorion standardikäytännön jälkeen. Kaikki tallennetut morfokineettiset parametrit sekä vastaavat kuvat dokumentoidaan. Jokaista alkioita seurataan, sen kehityslaatua arvioidaan ja kirjataan sen määrittämiseksi, saavuttaako se blastosyst -vaiheen. Jos näin on, tutkijat ottavat yhteyttä potilaan pyytämään suostumusta näiden alkioiden sisällyttämiseksi tutkimukseen. Alkiot, joilla on epänormaali pronukleaarinen kuvio, joka ei pääse blastosyst -vaiheeseen kehityksen tukkeutumisesta johtuen. Huumeita tai lääkinnällisiä laitteita ei käytetä. |
Hedelmöityksen yhteydessä tavanomaisen ICSI/IVF -menettelyn jälkeen kumppasolujen näytteet (saadut rutiininomaisen munasolujen poistoprosessin aikana) ja siemenplasmassa läsnä olevat siittiöt solut. Nämä näytteet jäädytetään -20 ° C: ssa, kunnes ne lähetetään Igenomixiin. Siellä niitä käytetään suorittamaan geneettinen analyysi, jota tarvitaan tutkimuksen tavoitteiden saavuttamiseen, mikäli potilas suostuu osallistumaan. Jos potilas lopulta päättää olla osallistumatta, nämä näytteet tuhoutuvat. Vanhempia voidaan pyytää toimittamaan syljenäyte samaan tarkoitukseen tapauksissa, joissa näytteiden saaminen hedelmöityksen aikana ei ollut mahdollista tai jos kerätyt näytteet eivät sovellu prosessoimaan laboratoriossa. Syljenäyte voidaan kerätä klinikalle yhden aikataulun mukaisesti lisääntymishoitoa varten tai vanhemmat vaihtoehtoisesti klinikan tarjoaman sarjan avulla.
Kehityspäivänä 3 biopsian helpottamiseksi biopsiassa biopsysti -vaiheessa suoritetaan.
Jokainen alkio biopsioidaan laboratoriossa käyttämällä tavanomaisia trophektodermia (TE) biopsiatekniikoita päivässä +5, +6 tai +7 kehityksessä riippuen siitä, milloin ne saavuttavat asianmukaisen blastosystin vaiheen.
Biopsian jälkeen blastokysti litroituu kliinisen rutiiniprotokollan jälkeen ja säilyttää, kunnes geneettiset tulokset ovat saatavilla.
Biopsianäytteet asetetaan PCR -putkeen, joka on merkitty sen vastaavalla tutkimuskohtaisella koodilla ja varastoidaan kylmässä telineessä 4 ° C: ssa ennen kuin ne siirretään pakastimeen -20 ° C: ssa.
Lopuksi näytteet lähetetään igenomixille aneuploidian preimplantaation geenitestausta varten.
PGT-A-tulosten saatuaan kaikki alkiot, joita ei ole geneettisesti vahvistettu euploidiksi ja ilman ploidisia poikkeavuuksia sulatetaan, pestään ja viljelty uudistamista varten. Suoritetaan täydentävä analyysi seuraavan sukupolven sekvensointitekniikoita (NGS) diagnoosin vahvistamiseksi ja poikkeavuuksien alkuperän määrittämiseksi. Tätä lisäanalyysiä varten uusien biopsioiden lisäksi kunkin alkion yksittäinen viljelyväliaine imee 8–24 tunnin inkubaatiojakson jälkeen. Kerätty väliaine asetetaan PCR -putkiin ja varastoidaan pakastimeen -20 ° C: ssa ennen laboratorioon lähetettyä. Riippumatta näiden täydentävän analyysin tuloksesta, kliinisiin tarkoituksiin ei oteta huomioon uudelleenkestäviä blastosystiä. |
Mitä tutkimuksessa mitataan?
Ensisijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Toimenpiteen kuvaus |
Aikaikkuna |
|---|---|---|
|
Diploidianopeus haploidisissa alkioissa IVF/ICSI: stä
Aikaikkuna: 3 kuukautta
|
2PN -blastokystien lukumäärä epänormaalisti hedelmöitetyistä munasoluista (1PN)
|
3 kuukautta
|
|
Diploidianopeus triploidisissa alkioissa IVF/ICSI: stä
Aikaikkuna: 3 kuukautta
|
2PN -blastokystien lukumäärä epänormaalisti hedelmöitetyistä munasoluista (2,1pn ja 3PN)
|
3 kuukautta
|
Toissijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Toimenpiteen kuvaus |
Aikaikkuna |
|---|---|---|
|
Kromosomaalisten poikkeavuuksien alkuperä alkioissa, joissa ei ole diploidikromosomipitoisuutta
Aikaikkuna: 6 kuukautta
|
Kromosomaalisen sarjan alkuperän (äidin tai isän) määrittämiseksi, joka on kadonnut tai saavutettu.
|
6 kuukautta
|
|
Euploidisten alkioiden raskaudenopeus epänormaalista hedelmöityksestä
Aikaikkuna: 2 viikkoa alkion siirron jälkeen
|
Potilaiden lukumäärä, joilla on positiivinen seerumin taso β-ihmisen koorion gonadotropiinista (βHCG> 25 mIU/ml) alkion siirtoa kohti.
Beeta-HCG mitataan päivänä 12 ± 2 alkion siirron jälkeen.
|
2 viikkoa alkion siirron jälkeen
|
|
Euploidisten alkioiden implantaationopeus epänormaalista hedelmöityksestä
Aikaikkuna: Jopa 4 viikkoa alkion siirron jälkeen
|
Emättimen ultraäänillä havaittujen raskauspussien lukumäärä jaettuna siirrettyjen alkioiden lukumäärällä.
|
Jopa 4 viikkoa alkion siirron jälkeen
|
|
Euploidisten alkioiden biokemiallinen raskausaste epänormaalista hedelmöityksestä
Aikaikkuna: 4 viikkoa alkion siirron jälkeen euploidisilla alkioilla epänormaalista hedelmöityksestä
|
Vain β-HCG: n havaitsemisella diagnosoitujen raskauksien lukumäärä ilman emättimen ultraäänellä visualisoitua raskauden määrää raskauden lukumäärää kohden.
|
4 viikkoa alkion siirron jälkeen euploidisilla alkioilla epänormaalista hedelmöityksestä
|
|
Ekloidisten alkioiden ektooppinen raskausaste epänormaalista hedelmöityksestä
Aikaikkuna: 4-5 viikkoa alkion siirron jälkeen
|
Kohdunontelon ulkopuolella olevien raskauksien lukumäärä, joka on diagnosoitu ultraäänellä, kirurgisella visualisoinnilla tai histopatologialla, raskauden lukumäärän kohdalla.
|
4-5 viikkoa alkion siirron jälkeen
|
|
Euploidisten alkioiden kliininen keskenmenon määrä epänormaalista hedelmöityksestä
Aikaikkuna: Jopa 12 raskausviikkoa
|
Spontaanien raskaushäviöiden lukumäärä ennen viikkoa 12, jossa havaittiin raskauden lukumäärää aikaisemmin raskauden sakk/s.
|
Jopa 12 raskausviikkoa
|
|
Euploidisten alkioiden jatkuva raskaudenopeus epänormaalista hedelmöityksestä
Aikaikkuna: Yli 12 raskausviikkoa
|
Enintään 12 raskausviikkoa (ainakin yksi sikiö, jonka havaittavissa oleva syke on diagnosoitu) jokaista alkion siirtoa kohden.
|
Yli 12 raskausviikkoa
|
|
Euploidisten alkioiden vapaaehtoinen lopetusaste epänormaalista hedelmöityksestä
Aikaikkuna: Jopa 12 raskausviikkoa
|
Vapaaehtoisten lopetusten lukumäärä ennen viikkoa 12 raskauden lukumäärää kohden.
|
Jopa 12 raskausviikkoa
|
Yhteistyökumppanit ja tutkijat
Sponsori
Tutkijat
- Päätutkija: Pere Mir Pardo, PhD, Igenomix
- Päätutkija: Carmen Rubio Lluesa, PhD, Igenomix
Opintojen ennätyspäivät
Opi tärkeimmät päivämäärät
Opiskelun aloitus (Todellinen)
Ensisijainen valmistuminen (Arvioitu)
Opintojen valmistuminen (Arvioitu)
Opintoihin ilmoittautumispäivät
Ensimmäinen lähetetty
Ensimmäinen toimitettu, joka täytti QC-kriteerit
Ensimmäinen Lähetetty (Todellinen)
Tutkimustietojen päivitykset
Viimeisin päivitys julkaistu (Todellinen)
Viimeisin lähetetty päivitys, joka täytti QC-kriteerit
Viimeksi vahvistettu
Lisää tietoa
Tähän tutkimukseen liittyvät termit
Avainsanat
Muita asiaankuuluvia MeSH-ehtoja
Muut tutkimustunnusnumerot
- EJC-SAFE-24-02
Yksittäisten osallistujien tietojen suunnitelma (IPD)
Aiotko jakaa yksittäisten osallistujien tietoja (IPD)?
Lääke- ja laitetiedot, tutkimusasiakirjat
Tutkii yhdysvaltalaista FDA sääntelemää lääkevalmistetta
Tutkii yhdysvaltalaista FDA sääntelemää laitetuotetta
Nämä tiedot haettiin suoraan verkkosivustolta clinicaltrials.gov ilman muutoksia. Jos sinulla on pyyntöjä muuttaa, poistaa tai päivittää tutkimustietojasi, ota yhteyttä register@clinicaltrials.gov. Heti kun muutos on otettu käyttöön osoitteessa clinicaltrials.gov, se päivitetään automaattisesti myös verkkosivustollemme .