Rendellenesen megtermékenyített embriók vizsgálata (SAFE)
A rendellenes megtermékenyítéssel rendelkező blastociszták morfokinetikájának és ploidia prospektív megfigyelési vizsgálata (1PN, 2,1PN és 3PN) a műtrágyázási változások eredetének azonosítására
Ennek a megfigyelési vizsgálatnak az a célja, hogy meghatározza a haploid és triploid embriók diploidia sebességét in vitro megtermékenyítési (IVF) ciklusokból. A fő kérdések, amelyekre a válaszok célja:
- Használhat -e rendellenesen megtermékenyített embriók molekuláris genetikai megtermékenyítési ellenőrzését a segített szaporodási kezelésen átesett párok lehetőségeinek kibővítésére?
- A kromoszómális veszteség vagy nyereség jelen van -e a rendellenesen megtermékenyített embriókban, elsősorban az anyai eredetű?
Erre a célra kiértékeljük körülbelül 300 embrió morfokinetikáját és ploidia -t, különféle rendellenes pronukleáris mintákkal (1pn, 2,1pn és 3pn), amelyek elérik a blastocyst stádiumát. Ha lehetséges, a nem diploid kromoszómális komplementummal rendelkező embriókat szintén megvizsgálják, hogy meghatározzák a elveszett vagy megszerzett kromoszómális készlet eredetét (anyai vagy apai).
A vizsgálati alanyok követik a korábban ütemezett IVF/ICSI kezelést, és a részvételhez további látogatásokra/beavatkozásokra nincs szükség.
A tanulmány áttekintése
Állapot
Körülmények
Részletes leírás
A kromoszómák olyan sejtszerkezetek, amelyek az élő szervezet genetikai információinak nagy részét tartalmazzák. A ivarsejtek (petesejtek és spermatozoidok) csak egyetlen 23 kromoszómát tartalmaznak a pronuclei (PN) néven ismert struktúrákban. Megtermékenyítéskor az oocitából származó 23 kromoszómát és a sperma 23 kromoszómáját 2PN zigót képződik, amely összesen 46 kromoszómát tartalmaz.
A segített reprodukciós (ART) laboratóriumokban az embriológusok morfológiai értékeléssel határozhatják meg, hogy a megtermékenyítési folyamat normális (2pn) vagy rendellenes (0pn, 1pn vagy> 2pn). A művészeti kezeléshez csak egy sikeresen megtermékenyített petesejt (2PN), amely a Blastocyst stádiumába alakul, alkalmas lehet az embrió átadására. A korábbi tanulmányok azonban kimutatták, hogy a rendellenes megtermékenyítéssel rendelkező petesejtek egyes embriók normál kromoszómális tartalmat tartalmazhatnak, és felhasználhatók a művészetekben, ha a normál megtermékenyítésből származó embriók nem állnak rendelkezésre.
Vannak genetikai elemzési technikák, amelyek nemcsak az embrió euploid -e (normál számú kromoszómát tartalmaznak), hanem annak felmérésére is, hogy haploid, diploid vagy triploid (1pn, 2,1pn és 3pn). Ezeket a technikákat alkalmazhatjuk az embriók "megmentésére" rendellenes megtermékenyítéssel, amelyet jelenleg eldobnak. Ez a megközelítés hasznos lehet az IVF -betegek esetében, amelyek korlátozott számú életképes embriót kapnak (csökkentett petefészek -tartalék esetek, előrehaladott anyai életkor, rossz válasz a petefészek stimulációjára stb.).
A jelenlegi prospektív és megfigyelési tanulmányt az illetékes kutatási etikai bizottság hagyta jóvá, és minden potenciális résztvevőt felkérnek, hogy írja alá a tanulmány tájékozott hozzájárulását.
A 300 embriót, amely a tanulmány részét képezi, a megtermékenyítés napján a hagyományos IVF eljárások elvégzése után az Együttműködő Központ laboratóriumában toborozzák. Ugyanezen rutin eljárásokat követően mindkét szülő biológiai mintáit is tárolják a genetikai elemzés elvégzésére a kromoszómális rendellenességek eredetének meghatározása érdekében. A kiválasztott embriókból biopsziát vesznek fel, amikor elérik a genetikai elemzés blastocysta stádiumát, amely lehetővé teszi annak felismerését, hogy valóban van -e kromoszómális rendellenesség. Az összes olyan embriót, amelyet nem erősítenek meg kromoszómálisan normálnak, felolvasztják, mostuk és tenyésztik egy második biopsziára, hogy megerősítsék korábbi diagnózisukat és a kromoszómális rendellenességek eredetét. Az új elemzéshez a biopsziákon kívül a megolvasztott blastociszták tenyésztési közegének egyedi mintáit gyűjtik és tárolják. A mintákat a genetikai kutatáshoz és a további adatok elemzéséhez az IGenomix -hez szállítják.
A vizsgálat várható időtartama 18 hónap. Az embriókat becsült 13 hónapos időtartamra beépítik a résztvevő központba. A résztvevők részvétele a tanulmányban csak a hozzájárulási forma aláírásának pillanatához kapcsolódik. Kivételesen a rendellenes megtermékenyítésből származó embriók, amelyeket az első biopszia után kromoszómálisan normálnak tekintettek, figyelembe lehet venni az átvitelre, feltéve, hogy nincs más embriók. Ha a beteg úgy dönt, hogy folytatja az átadást, akkor klinikai nyomon követése a vizsgálat részét képezi a folyamatban lévő terhesség eléréséig (12 terhességi hét). Ezt követően a vizsgálatban való részvétele véget ér, de orvosa a szokásos klinikai gyakorlatnak megfelelően folytatja a terhesség nyomon követését.
Tanulmány típusa
Beiratkozás (Becsült)
Kapcsolatok és helyek
Tanulmányi kapcsolat
- Név: Carlos A Gomez De La Cruz, BSc MSc
- Telefonszám: +34963905310
- E-mail: carlos.gomez@igenomix.com
Tanulmányi helyek
-
-
Valencia
-
Valencia, Valencia, Spanyolország, 46015
- Toborzás
- Equipo Médico Crespo Valencia
-
Kapcsolatba lépni:
- Jose Teruel López, BSc MSc
- Telefonszám: +34 961 042 557
- E-mail: jteruel@juanacrespo.es
-
Kutatásvezető:
- María Escribá Suarez, BSc MSc
-
Kutatásvezető:
- Marina Benavent Martínez, BSc MSc
-
-
Részvételi kritériumok
Jogosultsági kritériumok
Tanulmányozható életkorok
- Felnőtt
Egészséges önkénteseket fogad
Mintavételi módszer
Tanulmányi populáció
Leírás
Befogadási kritériumok:
- Művészeti betegek, akik aláírják a vizsgálat tájékozott beleegyezését.
- Kor: A nők petesejtjei ≤ 49 év és a férfiak spermája ≤ 60 év. A ivarsejtek adományozása megengedett.
- ≥1 Blastocysts oocitákból, rendellenes pronukleáris mintázatú (1PN, 2,1PN és/vagy 3PN) és 2 sarki test (PB) jelenlétével, amelyet egy időbeli inkubátorban tenyésztettek.
Kizárási kritériumok:
- A tanulmányban nem vették figyelembe a kizárási kritériumokat.
Tanulási terv
Hogyan készül a tanulmány?
Tervezési részletek
Kohorszok és beavatkozások
Csoport / Kohorsz |
Beavatkozás / kezelés |
|---|---|
|
A rendellenesen megtermékenyített petesejtek blastocisztái a segített szaporodás során
A laboratóriumi hagyományos ICSI/IVF eljárások során a megtermékenyítést megfigyelő embriológus rendellenes pronukleáris mintázatú embriókat azonosít, és előzetesen megvizsgálja azokat a vizsgálathoz. Ezeket az embriókat a laboratórium szokásos gyakorlatát követően egy időbeli inkubátorban tenyésztik. Az összes rögzített morfokinetikai paramétert, valamint a megfelelő képeket együtt dokumentálják. Minden embrió megfigyelhető, fejlődési minőségét kiértékeljük és rögzítik annak meghatározására, hogy eléri -e a blastocysta stádiumát. Ha igen, akkor a kutatók kapcsolatba lépnek a beteggel, hogy kérjék hozzájárulást, hogy ezeket az embriókat beépítsék a vizsgálatba. Az olyan abnormális pronukleáris mintázatú embriókat, amelyek a fejlődési elzáródás miatt nem sikerül elérni a blastocista stádiumát, el kell dobni. Nem használnak gyógyszereket vagy orvostechnikai eszközöket. |
A megtermékenyítés során, a hagyományos ICSI/IVF eljárást követően, a kumulussejtekből származó mintákat (a rutin petesejt -denudációs folyamat során nyerték) és a plazmában jelenlévő többlet sperma sejteket visszanyerik. Ezeket a mintákat -20 ° C -on fagyasztva tárolják, amíg el nem küldik az IGenomix -be. Ott fogják felhasználni a vizsgálat célkitűzéseinek eléréséhez szükséges genetikai elemzés elvégzésére, feltéve, hogy a beteg hozzájárul a részvételhez. Ha a beteg végül úgy dönt, hogy nem vesz részt, akkor ezeket a mintákat megsemmisítik. A szülőket felkérhetik, hogy adjanak nyálmintát ugyanazon célra, amikor a minták megtermékenyítés során történő beszerzése nem volt lehetséges, vagy ha az összegyűjtött minták nem voltak képesek feldolgozni a laboratóriumban. A nyálmintát a klinikán összegyűjthetik a szaporodási kezelés egyik tervezett látogatása során, vagy a klinika által biztosított készlet segítségével alternatívaként az otthoni szülők.
A fejlesztés 3. napján segített keltést végeznek a biopszia megkönnyítése érdekében a blastocista szakaszban.
Mindegyik embriót a laboratóriumban biopsziáltak hagyományos trophectoderm (TE) biopsziás technikák felhasználásával a +5, +6 vagy +7 napon, attól függően, hogy mikor érik el a megfelelő blastocista stádiumot.
A biopszia után a blastocisztát a klinikai rutin protokoll után, és addig tárolja, amíg a genetikai eredmények nem állnak rendelkezésre.
A biopsziás mintákat egy PCR -csőbe helyezzük, amely a megfelelő tanulmány -specifikus kóddal felcímkézi, és 4 ° C -on hideg állványban tárolja, mielőtt egy fagyasztóba vitték -20 ° C -on.
Végül a mintákat elküldik az IGenomix -hez az aneuploidia genetikai vizsgálatához.
A PGT-A eredmények megszerzése után minden olyan embrió, amelyet genetikailag nem erősítenek meg euploidként, és ploidy rendellenességek nélkül megolvadnak, mossák és tenyésztik a tenyésztés céljából. A diagnózis megerősítésére és a rendellenességek eredetének meghatározására a következő generációs szekvenálási (NGS) technikákkal kiegészítő elemzést végeznek. E kiegészítő elemzéshez az új biopsziákon kívül az egyes embrió egyéni tenyésztő táptalaját 8–24 órás inkubálási idő után szívjuk meg. Az összegyűjtött tápközeget PCR -csövekbe helyezzük és fagyasztóban tárolják -20 ° C -on, mielőtt a laboratóriumba küldték. A kiegészítő elemzés eredményétől függetlenül nem veszik figyelembe klinikai célokat. |
Mit mér a tanulmány?
Elsődleges eredményintézkedések
Eredménymérő |
Intézkedés leírása |
Időkeret |
|---|---|---|
|
Diploidia sebessége haploid embriókban az IVF/ICSI -ből
Időkeret: 3 hónap
|
A rendellenesen megtermékenyített petesejtekből származó 2PN blastocisták száma (1pn)
|
3 hónap
|
|
Diploidia sebessége triploid embriókban az IVF/ICSI -ből
Időkeret: 3 hónap
|
A rendellenesen megtermékenyített oocitákból származó 2PN blastocisták száma (2,1pn és 3pn)
|
3 hónap
|
Másodlagos eredményintézkedések
Eredménymérő |
Intézkedés leírása |
Időkeret |
|---|---|---|
|
A kromoszómális rendellenességek eredete nem diploid kromoszómális tartalommal rendelkező embriókban
Időkeret: 6 hónap
|
Az elveszett vagy megszerzett kromoszóma -készlet eredetének (anyai vagy apai) meghatározására.
|
6 hónap
|
|
Az euploid embriók terhességi aránya rendellenes megtermékenyítésből
Időkeret: 2 héttel az embrió átadását követően
|
Az embrion transzferenként pozitív szérum szintű β-humán korion gonadotropin (βHCG> 25 MIU/ml) számú betegek száma.
A béta-HCG-t az embrió átvitele után a 12 ± 2 napon mérik.
|
2 héttel az embrió átadását követően
|
|
Az euploid embriók beültetési sebessége rendellenes megtermékenyítésből
Időkeret: Legfeljebb 4 héttel az embrió átutalása után
|
A hüvelyi ultrahang által megfigyelt terhességi SAC -k száma eloszlik az áthelyezett embriók számával.
|
Legfeljebb 4 héttel az embrió átutalása után
|
|
Az euploid embriók biokémiai terhességi aránya rendellenes megtermékenyítésből
Időkeret: 4 héttel az embrió transzfer után, a rendellenes megtermékenyítésből származó euploid embriókkal
|
A csak β-HCG detektálással diagnosztizált terhességek száma vaginális ultrahanggal, a terhességek számánként megjelenítve.
|
4 héttel az embrió transzfer után, a rendellenes megtermékenyítésből származó euploid embriókkal
|
|
A rendellenes megtermékenyítésből származó eubloid embriók ektopiás terhességi sebessége
Időkeret: 4-5 héttel az embrió átutalása után
|
A méhüregen kívüli terhességek száma, ultrahanggal, műtéti megjelenítéssel vagy kórszövettaniával diagnosztizálva, terhességek száma.
|
4-5 héttel az embrió átutalása után
|
|
Az euproid embriók klinikai vetélési sebessége rendellenes megtermékenyítésből
Időkeret: Legfeljebb 12 gesztációs hét
|
A spontán terhességi veszteségek száma a 12. hét előtt, amelyben a terhességi számú terhességenként a terhességi számot figyelték meg.
|
Legfeljebb 12 gesztációs hét
|
|
Az euploid embriók folyamatos terhességi aránya rendellenes megtermékenyítésből
Időkeret: Több mint 12 gesztációs hét
|
A terhességek száma legfeljebb 12 terhességi hétig (legalább egy, észrevehető szívveréssel diagnosztizált magzat), amelyet az embrió transzferjein belül elértek.
|
Több mint 12 gesztációs hét
|
|
Az euploid embriók önkéntes megszüntetési sebessége rendellenes megtermékenyítésből
Időkeret: Legfeljebb 12 gesztációs hét
|
Az önkéntes végződések száma a 12. hét előtt a terhességek számánként.
|
Legfeljebb 12 gesztációs hét
|
Együttműködők és nyomozók
Szponzor
Nyomozók
- Kutatásvezető: Pere Mir Pardo, PhD, Igenomix
- Kutatásvezető: Carmen Rubio Lluesa, PhD, Igenomix
Tanulmányi rekorddátumok
Tanulmány főbb dátumok
Tanulmány kezdete (Tényleges)
Elsődleges befejezés (Becsült)
A tanulmány befejezése (Becsült)
Tanulmányi regisztráció dátumai
Először benyújtva
Először nyújtották be, amely megfelel a minőségbiztosítási kritériumoknak
Első közzététel (Tényleges)
Tanulmányi rekordok frissítései
Utolsó frissítés közzétéve (Tényleges)
Az utolsó frissítés elküldve, amely megfelel a minőségbiztosítási kritériumoknak
Utolsó ellenőrzés
Több információ
A tanulmányhoz kapcsolódó kifejezések
Kulcsszavak
További vonatkozó MeSH feltételek
Egyéb vizsgálati azonosító számok
- EJC-SAFE-24-02
Terv az egyéni résztvevői adatokhoz (IPD)
Tervezi megosztani az egyéni résztvevői adatokat (IPD)?
Gyógyszer- és eszközinformációk, tanulmányi dokumentumok
Egy amerikai FDA által szabályozott gyógyszerkészítményt tanulmányoz
Egy amerikai FDA által szabályozott eszközterméket tanulmányoz
Ezt az információt közvetlenül a clinicaltrials.gov webhelyről szereztük be, változtatás nélkül. Ha bármilyen kérése van vizsgálati adatainak módosítására, eltávolítására vagy frissítésére, kérjük, írjon a következő címre: register@clinicaltrials.gov. Amint a változás bevezetésre kerül a clinicaltrials.gov oldalon, ez a webhelyünkön is automatikusan frissül. .