Изучение ненормально оплодотворенных эмбрионов (SAFE)
Проспективное обсервационное исследование морфокинетики и плоиды бластоцист с аномальным оплодотворением (1pn, 2,1pn и 3pn) для определения начала изменений оплодотворения
Цель этого наблюдательного исследования состоит в том, чтобы определить частоту диплоидии гаплоидных и триплоидных эмбрионов из циклов оплодотворения in vitro (ЭКО). Основные вопросы, на которые он стремится ответить:
- Можно ли использовать молекулярное генетическое удобрение аномально оплодотворенных эмбрионов для расширения возможностей для пар, подвергающихся вспомогательным репродукции?
- Присутствует ли потеря хромосом или усиление в аномально оплодотворенных эмбрионах преимущественно материнскими по происхождению?
Для этой цели мы будем оценивать морфокинетику и плоидность около 300 эмбрионов с различными типами аномальных пронуклеарных паттернов (1pn, 2,1pn и 3pn), которые достигают стадии бластоцисты. Когда это возможно, эмбрионы с не диплоидным хромосомным комплементом также будут оцениваться для определения происхождения (материнского или отцовского) хромосомного набора, который был потерян или получен.
Субъекты исследования будут следовать за их ранее запланированным лечением ЭКО/ICSI, и для участия не потребуется никаких дополнительных посещений/вмешательств.
Обзор исследования
Статус
Условия
Подробное описание
Хромосомы - это клеточные структуры, содержащие большую часть генетической информации живого организма. Гаметы (ооциты и сперматозоиа) содержат только один набор из 23 хромосом в структурах, известных как пронуклеи (PN). После оплодотворения 23 хромосомы из ооцита и 23 хромосомы из спермы объединяются, образуя 2pn Zygote, которая содержит в общей сложности 46 хромосом.
В лабораториях вспомогательного воспроизведения (АРТ) эмбриологи могут определять морфологическую оценку, был ли процесс оплодотворения нормальным (2PN) или аномальным (0pn, 1pn или> 2pn). Для обработки искусства, только успешно оплодотворяемый ооцит (2 пн.), Который развивается на стадии бластоцисты, может подходить для переноса эмбрионов. Тем не менее, предыдущие исследования показали, что некоторые эмбрионы из ооцитов с аномальным оплодотворением могут обладать нормальным содержанием хромосом и могут использоваться в искусстве, когда эмбрионы от нормального оплодотворения недоступны.
Существуют методы генетического анализа, чтобы определить не только то, что эмбрион является эуплоидом (содержит нормальное количество хромосом), но и для оценки того, является ли он гаплоидным, диплоидным или триплоидным (1pn, 2,1pn и 3pn соответственно). Эти методы могут применяться к «спасению» эмбрионов с аномальным оплодотворением, которые в настоящее время отбрасываются. Этот подход может быть полезным для пациентов с ЭКО с ограниченным количеством доступных жизнеспособных эмбрионов (уменьшенные случаи резерва яичника, усовершенствованный материнский возраст, плохая реакция на стимуляцию яичников и т. Д.).
Нынешнее проспективное и наблюдательное исследование было одобрено Комитетом по этике компетентной исследования, и каждому потенциальному участнику будет предложено подписать информированное согласие исследования.
300 эмбрионов, которые будут частью исследования, будут набраны в лаборатории сотрудничества в день оплодотворения после выполнения обычных процедур ЭКО. Следуя этим же обычным процедурам, биологические образцы от обоих родителей также будут храниться для выполнения генетического анализа, чтобы определить происхождение хромосомных аномалий. Биопсия будет взята из выбранных эмбрионов, когда они достигнут стадии бластоцисты для генетического анализа, который позволит обнаружить, действительно ли есть какая -либо хромосомная аномалия. Все эмбрионы, не подтвержденные как хромосомно нормальные, будут оттаиваются, промыты и культивированы для второй биопсии, чтобы подтвердить их предыдущий диагноз и происхождение хромосомных аномалий. Для этого нового анализа, в дополнение к биопсиям, будут собираться и хранить отдельные образцы культуральных среде отталкиваемых бластоцисты. Образцы будут отправлены в Igenomix для генетических исследований и дальнейшего анализа данных.
Ожидаемая продолжительность исследования составляет 18 месяцев. Эмбрионы будут включены в участвующий центр в течение приблизительно 13 месяцев. Участие участников в исследовании просто связано с моментом подписи формы согласия. Исключительно, эмбрионы от аномального оплодотворения, которые были проинформированы как хромосомно нормальные после того, как первая биопсия может быть рассмотрено для передачи, при условии, что нет других эмбрионов. Если пациент решит продолжить передачу, ее клиническое наблюдение будет частью исследования до достижения продолжающейся беременности (12 недель гестата). После этого ее участие в исследовании закончится, но ее врач продолжит контролировать беременность до родов, если это применимо, в соответствии со стандартной клинической практикой.
Тип исследования
Регистрация (Оцененный)
Контакты и местонахождение
Контакты исследования
- Имя: Carlos A Gomez De La Cruz, BSc MSc
- Номер телефона: +34963905310
- Электронная почта: carlos.gomez@igenomix.com
Места учебы
-
-
Valencia
-
Valencia, Valencia, Испания, 46015
- Рекрутинг
- Equipo Médico Crespo Valencia
-
Контакт:
- Jose Teruel López, BSc MSc
- Номер телефона: +34 961 042 557
- Электронная почта: jteruel@juanacrespo.es
-
Главный следователь:
- María Escribá Suarez, BSc MSc
-
Главный следователь:
- Marina Benavent Martínez, BSc MSc
-
-
Критерии участия
Критерии приемлемости
Возраст, подходящий для обучения
- Взрослый
Принимает здоровых добровольцев
Метод выборки
Исследуемая популяция
Описание
Критерии включения:
- АРТ пациентов, которые подписывают информированное согласие исследования.
- Возраст: ооциты от женщин ≤ 49 лет и спермы от мужчин ≤ 60 лет. Пожертвование гамет разрешено.
- ≥1 бластоцисты из ооцитов с аномальной пронуклеарной паттерной (1pn, 2,1pn и/или 3pn) и с присутствием 2 полярных тел (PB), культивированы в инкубаторе по времени.
Критерии исключения:
- Критерии исключения не были рассмотрены для этого исследования.
Учебный план
Как устроено исследование?
Детали дизайна
Когорты и вмешательства
Группа / когорта |
Вмешательство/лечение |
|---|---|
|
Бластоцисты из аномально оплодотворенных ооцитов во время вспомогательного воспроизведения
Во время обычных процедур ICSI/ЭКО в лаборатории эмбриолог, наблюдающий оплодотворение, будет идентифицировать эмбрионы с аномальной пронуклеарной паттерной и предварительно выбрать их для исследования. Эти эмбрионы будут культивированы в инкубаторе по времени после стандартной лабораторной практики. Все записанные морфокинетические параметры, наряду с соответствующими изображениями, будут задокументированы. Каждый эмбрион будет контролироваться, его качество развития оценивается и записан, чтобы определить, достигает ли он на стадии бластоцисты. Если это так, исследователи свяжутся с пациентом, чтобы попросить согласие на включение этих эмбрионов в исследование. Эмбрионы с аномальным пронуклеарным паттерном, которые не могут достичь стадии бластоцисты из -за блокировки развития, будут отброшены. Никакие лекарства или медицинские устройства не будут использоваться. |
При оплодотворении, после обычной процедуры ICSI/IVF, образцы из клеток кумулюса (полученные во время обычного процесса денудации ооцитов) и избыточные спермы, присутствующие в семенной плазме. Эти образцы будут храниться заморожены при -20 ° C, пока они не отправятся в Igenomix. Там они будут использоваться для проведения генетического анализа, необходимого для достижения целей исследования, при условии, что пациент соглашается на участие. Если пациент в конечном итоге решит не участвовать, эти образцы будут уничтожены. Родителям может быть предложено предоставить образец слюны для той же цели в тех случаях, когда получение образцов во время оплодотворения было невозможно или если собранные образцы были непригодны для обработки в лаборатории. Образец слюны может быть собрана в клинике во время одного из запланированных посещений репродуктивного лечения или, альтернативно, родителями дома с использованием комплекта, предоставленного клиникой.
На третий день развития будет выполнена вспомогательная вылупление для облегчения биопсии на стадии бластоциста.
Каждый эмбрион будет биопс в лаборатории с использованием обычных методов биопсии трофэктодермы (TE) в день +5, +6 или +7 развития, в зависимости от того, когда они достигают соответствующей стадии бластоциста.
После биопсии бластоциста будет остерезвирована после клинического рутинного протокола и хранить до тех пор, пока не будут доступны генетические результаты.
Образцы биопсии будут размещены в трубке ПЦР, помеченной соответствующим кодом, специфичным для исследования, и храниться в холодной стойке при 4 ° C, а затем перенесены в морозильник при -20 ° C.
Наконец, образцы будут отправлены в Igenomix для предамплантационного генетического тестирования на анеуплоидию.
После получения результатов PGT-A любой эмбрион, не являющийся генетически подтвержденным как эуплоид и без аномалий плуиды, будет оттаивается, промывается и культивирована для ребиопсии. Дополнительный анализ с использованием методов секвенирования следующего поколения (NGS) будет выполнен для подтверждения диагноза и определения происхождения аномалий. Для этого дополнительного анализа, в дополнение к новой биопсии, отдельная культуральная среда каждого эмбриона будет аспирирована после инкубационного периода от 8 до 24 часов. Собранная среда будет размещена в трубках ПЦР и хранится в морозильной камере при -20 ° C, прежде чем будет отправлен в лабораторию. Независимо от результата этого дополнительного анализа, ни одна бластоциста не будет рассматриваться для клинических целей. |
Что измеряет исследование?
Первичные показатели результатов
Мера результата |
Мера Описание |
Временное ограничение |
|---|---|---|
|
Уровень диплоидии у гаплоидных эмбрионов от ЭКО/ICSI
Временное ограничение: 3 месяца
|
Количество 2pn бластоцисты из аномально оплодотворенных ооцитов (1pn)
|
3 месяца
|
|
Уровень диплоидии у трилоидных эмбрионов от ЭКО/ICSI
Временное ограничение: 3 месяца
|
Количество 2pn бластоцисты из аномально оплодотворенных ооцитов (2,1 вечера и 3 пн.
|
3 месяца
|
Вторичные показатели результатов
Мера результата |
Мера Описание |
Временное ограничение |
|---|---|---|
|
Происхождение хромосомных нарушений у эмбрионов с не диплоидным содержанием хромосом
Временное ограничение: 6 месяцев
|
Чтобы определить происхождение (материнское или отцовское) хромосомного набора, который был потерян или получил.
|
6 месяцев
|
|
Уровень беременности эмбрионов эуплоидов от аномального оплодотворения
Временное ограничение: Через 2 недели после переноса эмбриона
|
Количество пациентов с положительным уровнем сыворотки хорионического гонадотропина (βHCG> 25 MIU/мл) на перенос эмбриона.
Бета-ХГЧ будет измерена на 12 ± 2 после переноса эмбриона.
|
Через 2 недели после переноса эмбриона
|
|
Скорость имплантации эмбрионов эуплоидов из аномального оплодотворения
Временное ограничение: До 4 недель после перевода эмбриона
|
Количество гестационных мешков, наблюдаемых с помощью ультразвука влагалища, деленное на количество перенесенных эмбрионов.
|
До 4 недель после перевода эмбриона
|
|
Биохимическая частота беременности эмбрионов эуплоидов от аномального оплодотворения
Временное ограничение: Через 4 недели после переноса эмбриона с эмбрионами эуплоидов от аномального оплодотворения
|
Количество беременностей, диагностированных только с помощью обнаружения β-HCG без гестационного мешка, визуализированного ультразвуком влагалища, на количество беременностей.
|
Через 4 недели после переноса эмбриона с эмбрионами эуплоидов от аномального оплодотворения
|
|
Эктопическая скорость беременности эмбрионов эуплоидов от аномального оплодотворения
Временное ограничение: Через 4-5 недель после переноса эмбриона
|
Количество беременностей за пределами полости матки, диагностируемое ультразвуком, хирургической визуализацией или гистопатологией, на количество беременностей.
|
Через 4-5 недель после переноса эмбриона
|
|
Клиническая выкидыша эмбрионов эмбрионов эуплоидов от аномального оплодотворения
Временное ограничение: До 12 недель геста
|
Количество спонтанных потерь беременности до 12 недели, при которой ранее наблюдалось гестационный мешок/S на количество беременностей.
|
До 12 недель геста
|
|
Продолжающаяся скорость беременности эмбрионов эуплоидов от аномального оплодотворения
Временное ограничение: За 12 недель геста
|
Количество беременностей до 12 недель гестации (по крайней мере, один плод с диагностированным диагнозом сердцебиения), достигнутое на каждую перенос эмбриона.
|
За 12 недель геста
|
|
Скорость добровольного прекращения эмбрионов эуплоидов от аномального оплодотворения
Временное ограничение: До 12 недель геста
|
Количество добровольных терминаций до 12 недели на количество беременностей.
|
До 12 недель геста
|
Соавторы и исследователи
Спонсор
Следователи
- Главный следователь: Pere Mir Pardo, PhD, Igenomix
- Главный следователь: Carmen Rubio Lluesa, PhD, Igenomix
Даты записи исследования
Изучение основных дат
Начало исследования (Действительный)
Первичное завершение (Оцененный)
Завершение исследования (Оцененный)
Даты регистрации исследования
Первый отправленный
Впервые представлено, что соответствует критериям контроля качества
Первый опубликованный (Действительный)
Обновления учебных записей
Последнее опубликованное обновление (Действительный)
Последнее отправленное обновление, отвечающее критериям контроля качества
Последняя проверка
Дополнительная информация
Термины, связанные с этим исследованием
Ключевые слова
Дополнительные соответствующие термины MeSH
Другие идентификационные номера исследования
- EJC-SAFE-24-02
Планирование данных отдельных участников (IPD)
Планируете делиться данными об отдельных участниках (IPD)?
Информация о лекарствах и устройствах, исследовательские документы
Изучает лекарственный продукт, регулируемый FDA США.
Изучает продукт устройства, регулируемый Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США.
Эта информация была получена непосредственно с веб-сайта clinicaltrials.gov без каких-либо изменений. Если у вас есть запросы на изменение, удаление или обновление сведений об исследовании, обращайтесь по адресу register@clinicaltrials.gov. Как только изменение будет реализовано на clinicaltrials.gov, оно будет автоматически обновлено и на нашем веб-сайте. .