Eliminaatioruokavalion vaikutus suoliston limakalvon esteeseen imeväisillä, joilla on lehmänmaitoallergia

Tutkimukseen sisällytettiin alle 26 viikon ikäisiä rintaruokittuja vauvoja, joille allergologi oli diagnosoinut uuden ei-IgE-välitteisen CMPA:n, joilla oli eliminointiruokavalio ja jotka hakeutuivat kahdelle Turkissa määritellylle sairaalalle. Vastaavanikäiset ja sukupuoleltaan samanlaiset imeväiset ja heidän äitinsä ilman allergioita tai atooppisia sairauksia olivat kontrolliryhmässä. G*Power-ohjelmalla suoritetun tehoanalyysin mukaan tarvittiin yhteensä 32 imeväistä keskikokoisen eron havaitsemiseksi 5 %:n tyyppi I virheellä ja 85 %:n testivoimalla. Tutkimus alkoi 20 CMPA-diagnosoitulla imeväisellä ja 18 terveellä imeväisellä. Ruokavalion noudattamatta jättämisen ja keskeytysten jälkeen tutkimus päättyi 17 imeväiseen kummassakin ryhmässä.

Tiedot kerättiin kahdessa aikapisteessä: tutkimuksen alussa ja lopussa. Kussakin pisteessä äideille annettiin kasvokkain kyselyt, molemmilta äideiltä ja imeväisiltä saatiin kolmen päivän ruokapäiväkirjat, ja imeväisten antropometriset mittaukset, lehmänmaitoproteiiniin liittyvät oirepisteet (CoMiSS) ja ulostenäytteet kerättiin.

Tapaustutkimusryhmän äidit saivat yksityiskohtaista koulutusta lehmänmaitoproteiinin (CMP) eliminointiruokavaliosta ja täydentävästä ruokinnasta, ja heille annettiin 1000 mg/päivä kalsiumlisäravinnetta. Kontrolliryhmä sai vain täydentävän ruokinnan ohjeistuksen. Kuukausittaisia seurantoja suoritettiin noudattamisen valvomiseksi. Tapaustutkimusryhmän eliminointiruokavalio määrättiin ja valvoitiin ravitsemusterapeutin toimesta, ja uudelleenkäyttö noudatti "maitoportaikko"-menetelmää keskimäärin 1,9±0,79 kuukauden jälkeen. Kontrolliryhmässä lopulliset arvioinnit suoritettiin kolme kuukautta lähtöarvon jälkeen. Tutkimuksen päättyessä kaikki alkuperäiset mittaukset toistettiin, ja toinen ulostenäyte kerättiin.

Imeväisten kehonpaino (kg), pituus (cm) ja pääympärys (cm) mitattiin lääkärin toimesta standardoidulla vaa'alla, imeväismittarilla ja venymättömällä mittanauhalla Maailman terveysjärjestön suositteleman menetelmän mukaisesti. Antropometriset mittaukset [pituus-iän mukaan (LFA), paino-iän mukaan (WFA), paino-pituuden mukaan (WFL) ja pääympärys-iän mukaan (HCFA)] arvioitiin WHO ANTHRO -ohjelmistolla Z-pisteiden mukaan (z-piste=potilaan arvo - keskiarvo / keskihajonta).

Kolmen päivän ruokapäiväkirjat (kaksi arkipäivää, yksi viikonloppupäivä) kerättiin äideiltä ja imeväisiltä. Äitien päiväkirjoja käytettiin eliminointiruokavalion noudattamisen arviointiin, ja osallistujat, jotka nauttivat maitotuotteita ruokavalion aikana, suljettiin pois. Annoskoot arvioitiin annoskokokuvakirjan avulla. Päivittäinen energian ja ravintoaineiden saanti analysoitiin BeBiS-ohjelmistolla (versio 9.0). Imeväisten saannit arvioitiin riittävän saannin (AI) viitearvoja vastaan ravitsemussuosituksista (DRI). Äidinmaidon saanti arvioitiin ALSPAC-menetelmällä: 100 ml yli 10 minuutin imetyksille ja 50 ml alle 5 minuutin imetyksille, viitearvoina 780 ml/päivä 0-6 kuukauden iässä ja 600 ml/päivä 7-12 kuukauden iässä.

Imeväisten kliinisiä oireita arvioitiin CoMiSS:llä. CoMiSS on pisteytysjärjestelmä, joka arvioi itkua, ruokailun jälkeen tapahtuvaa ruoan palautumista, ulostetyyppiä (Bristolin ulostemittakaava), ihon ja hengitystieoireita, kokonaispistemäärä vaihdellen 0-33.

Ulostenäytteet kerättiin lusikalla varustettuun astiaan tutkimuksen alussa ja lopussa varmistaen riittävän määrän (≥50 mg) saanti. Näytteet säilytettiin -80 °C:ssa estämään bioaktiivisuuden menetystä ja saastumista. MUC2- ja sIgA-analyysit suoritettiin käyttämällä sandwich-entsyymi-immunomääritysmenetelmää Human MUC2- ja Human sIgA ELISA -sarjoilla entsyymiliitosta-analyysin (ELISA) menetelmän kautta. Human MUC2 ELISA -sarjan herkkyys on 0,57 ng/ml ja mittausalue 1,57-100 ng/ml. Human sIgA ELISA -sarjan herkkyys on 0,098 µg/ml ja mittausalue 0,312-20 µg/ml. Analyysimenetelmän mukaisesti näytteet ja standardit lisättiin kahdessa kopiossa mikrotiittikuoppiin. Sitten biotiinilla konjugoitua spesifiä vasta-ainetta ja avidiini-HRP-konjugaattia lisättiin. Kun väri kehittyi TMB-substraatilla, reaktio pysäytettiin pysäytysliuoksella, joka sisälsi rikkihappoa. Absorboitumista mitattiin 450±10 nm aallonpituudella. Pitoisuudet laskettiin sitten saatujen optisen tiheyden arvojen perusteella standardikäyrän avulla.