Efecto de la Dieta de Eliminación en la Barrera de Moco Intestinal en Lactantes con Alergia a la Proteína de la Leche de Vaca

El estudio incluyó bebés lactantes menores de 26 semanas de edad diagnosticados con APLV no mediada por IgE nueva por un alergólogo, que siguieron una dieta de eliminación y se inscribieron en dos hospitales designados en Turquía. Los lactantes y sus madres sin alergias o enfermedades atópicas, similares en edad y género, formaron el grupo de control. Según el análisis de potencia realizado con G*Power, se necesitaban un total de 32 lactantes para detectar una diferencia de tamaño medio con una tasa de error tipo I del 5% y una potencia del 85%. El estudio comenzó con 20 lactantes con APLV y 18 lactantes sanos. Tras incumplimientos dietéticos y retiradas, el estudio concluyó con 17 lactantes en cada grupo.

Los datos se recogieron en dos momentos: al inicio y al final del estudio. En cada momento, se administraron encuestas presenciales a las madres, se obtuvieron registros alimentarios de tres días tanto para las madres como para los lactantes, y se recogieron las mediciones antropométricas de los lactantes, las puntuaciones de síntomas relacionados con la proteína de leche de vaca (CoMiSS) y muestras de heces.

Las madres del grupo de casos recibieron formación detallada sobre dietas de eliminación de proteína de leche de vaca (PLV) y alimentación complementaria, y se les suplementó con 1000 mg/día de calcio. El grupo de control recibió solo orientación sobre alimentación complementaria. Se realizaron seguimientos mensuales para supervisar el cumplimiento. La dieta de eliminación en el grupo de casos fue prescrita y supervisada por un dietista, con reintroducción siguiendo el protocolo de "escalera de la leche" tras una media de 1,9±0,79 meses. En el grupo de control, las evaluaciones finales se realizaron tres meses después de la línea base. Al finalizar el estudio, se repitieron todas las mediciones iniciales y se recogió una segunda muestra de heces.

El peso corporal (kg), la longitud (cm) y el perímetro cefálico (cm) de los lactantes fueron medidos por un médico utilizando una báscula estandarizada, un infantómetro y una cinta métrica no elástica, de acuerdo con el método recomendado por la Organización Mundial de la Salud. Las mediciones antropométricas [longitud para la edad (LFA), peso para la edad (WFA), peso para la longitud (WFL) y perímetro cefálico para la edad (HCFA)] se evaluaron utilizando el software WHO ANTHRO según puntuaciones Z (puntuación Z=valor del paciente-valor medio/desviación estándar).

Se recogieron registros alimentarios de tres días (dos días laborables, un día de fin de semana) de las madres y los lactantes. Los registros de las madres se utilizaron para evaluar la adherencia a la dieta de eliminación, y se excluyó a los participantes que consumieron lácteos durante la dieta. Los tamaños de las porciones se estimaron utilizando un libro de imágenes de tamaños de porciones. Los consumos diarios de energía y nutrientes se analizaron utilizando el software BeBiS (versión 9.0). Los consumos de los lactantes se evaluaron frente a los valores de referencia de Ingesta Adecuada (IA) de las Ingestas Dietéticas de Referencia (IDR). La ingesta de leche materna se estimó utilizando el método ALSPAC: 100 mL para tomas >10 minutos y 50 mL para tomas <5 minutos, con valores de referencia de 780 mL/día para 0-6 meses y 600 mL/día para 7-12 meses.

Los síntomas clínicos de los lactantes se evaluaron utilizando CoMiSS. CoMiSS es un sistema de puntuación que evalúa el llanto, la regurgitación, el tipo de heces (escala de heces de Bristol), y los síntomas cutáneos y respiratorios, con una puntuación total que oscila entre 0 y 33.

Las muestras de heces se recogieron en un recipiente con una cuchara al inicio y al final del estudio para asegurar que se obtenía una cantidad adecuada (≥50 mg). Las muestras se almacenaron a -80°C para prevenir la pérdida de bioactividad y la contaminación. Los análisis de MUC2 e sIgA se realizaron utilizando el método de inmunoensayo enzimático tipo sándwich con kits ELISA de MUC2 Humano y sIgA Humano mediante el método de ensayo por inmunoabsorción ligado a enzimas (ELISA). El kit ELISA de MUC2 Humano tiene una sensibilidad de 0,57 ng/mL y un rango de medición de 1,57-100 ng/mL. El kit ELISA de sIgA Humano tiene una sensibilidad de 0,098 µg/mL y un rango de medición de 0,312-20 µg/mL. Según el protocolo de análisis, las muestras y los estándares se añadieron por duplicado a los pocillos de microtitulación. Luego, se aplicaron anticuerpo específico conjugado con biotina y conjugado avidina-HRP. Tras el desarrollo del color con el sustrato TMB, la reacción se detuvo con una solución de parada que contenía ácido sulfúrico. La absorbancia se midió a una longitud de onda de 450±10 nm. Las concentraciones se calcularon luego utilizando una curva estándar basada en los valores de densidad óptica obtenidos.