Effet du régime d'élimination sur la barrière de mucus intestinal chez les nourrissons allergiques aux protéines de lait de vache

L'étude a inclus des bébés allaités de moins de 26 semaines diagnostiqués avec une nouvelle APLV non médiée par les IgE par un allergologue, ayant suivi un régime d'éviction et s'étant rendus dans deux hôpitaux désignés en Turquie. Les nourrissons et leurs mères sans allergies ni maladies atopiques, d'âge et de sexe similaires, constituaient le groupe témoin. Selon l'analyse de puissance réalisée avec G*Power, un total de 32 nourrissons était nécessaire pour détecter une différence de taille moyenne avec un taux d'erreur de type I de 5 % et une puissance de 85 %. L'étude a débuté avec 20 nourrissons atteints d'APLV et 18 nourrissons en bonne santé. Suite à des non-conformités alimentaires et des retraits, l'étude s'est conclue avec 17 nourrissons dans chaque groupe.

Les données ont été collectées à deux moments : au début et à la fin de l'étude. À chaque moment, des enquêtes en face-à-face ont été menées auprès des mères, des registres alimentaires de trois jours ont été obtenus pour les mères et les nourrissons, et les mesures anthropométriques des nourrissons, les scores de symptômes liés aux protéines de lait de vache (CoMiSS) et des échantillons de selles ont été collectés.

Les mères du groupe cas ont reçu une formation détaillée sur les régimes d'éviction des protéines de lait de vache (PLV) et l'alimentation complémentaire et ont été supplémentées avec 1000 mg/jour de calcium. Le groupe témoin a reçu uniquement des conseils sur l'alimentation complémentaire. Des suivis mensuels ont été effectués pour surveiller la conformité. Le régime d'éviction dans le groupe cas a été prescrit et supervisé par un diététicien, avec une réintroduction suivant le protocole de « l'échelle du lait » après une moyenne de 1,9±0,79 mois. Dans le groupe témoin, les évaluations finales ont été réalisées trois mois après la ligne de base. À la fin de l'étude, toutes les mesures initiales ont été répétées et un deuxième échantillon de selles a été collecté.

Le poids corporel (kg), la longueur (cm) et le périmètre crânien (cm) des nourrissons ont été mesurés par un médecin à l'aide d'une balance standardisée, d'un infantomètre et d'un mètre ruban non extensible, conformément à la méthode recommandée par l'Organisation mondiale de la santé. Les mesures anthropométriques [longueur pour l'âge (LFA), poids pour l'âge (WFA), poids pour la longueur (WFL) et périmètre crânien pour l'âge (HCFA)] ont été évaluées à l'aide du logiciel WHO ANTHRO selon les scores Z (z-score=valeur du patient-valeur moyenne/écart type).

Des registres alimentaires de trois jours (deux jours de semaine, un jour de week-end) ont été collectés auprès des mères et des nourrissons. Les registres des mères ont été utilisés pour évaluer l'adhésion au régime d'éviction, et les participantes consommant des produits laitiers pendant le régime ont été exclues. Les tailles des portions ont été estimées à l'aide d'un livre d'images des tailles de portions. Les apports quotidiens en énergie et en nutriments ont été analysés à l'aide du logiciel BeBiS (version 9.0). Les apports des nourrissons ont été évalués par rapport aux valeurs de référence d'apport adéquat (AI) des apports nutritionnels de référence (DRI). La consommation de lait maternel a été estimée à l'aide de la méthode ALSPAC : 100 mL pour les tétées >10 minutes et 50 mL pour les tétées <5 minutes, avec des valeurs de référence de 780 mL/jour pour 0-6 mois et 600 mL/jour pour 7-12 mois.

Les symptômes cliniques des nourrissons ont été évalués à l'aide de CoMiSS. CoMiSS est un système de notation qui évalue les pleurs, les régurgitations, le type de selles (échelle de Bristol), les symptômes cutanés et respiratoires, avec un score total allant de 0 à 33.

Des échantillons de selles ont été collectés dans un contenant avec une cuillère au début et à la fin de l'étude pour garantir une quantité adéquate (≥50 mg). Les échantillons ont été stockés à -80 °C pour éviter la perte de bioactivité et la contamination. Les analyses de MUC2 et de sIgA ont été réalisées à l'aide de la méthode immuno-enzymatique sandwich avec les kits ELISA Humain MUC2 et Humain sIgA via la méthode de dosage immuno-enzymatique (ELISA). Le kit ELISA Humain MUC2 a une sensibilité de 0,57 ng/mL et une plage de mesure de 1,57-100 ng/mL. Le kit ELISA Humain sIgA a une sensibilité de 0,098 µg/mL et une plage de mesure de 0,312-20 µg/mL. Selon le protocole d'analyse, les échantillons et les standards ont été ajoutés en double dans les puits de microplaque. Ensuite, l'anticorps spécifique conjugué à la biotine et le conjugué avidine-HRP ont été appliqués. Après le développement de la couleur avec le substrat TMB, la réaction a été arrêtée avec une solution d'arrêt contenant de l'acide sulfurique. L'absorbance a été mesurée à une longueur d'onde de 450±10 nm. Les concentrations ont ensuite été calculées à l'aide d'une courbe standard basée sur les valeurs de densité optique obtenues.