Wirkung der Eliminationsdiät auf die intestinale Schleimhautbarriere bei Säuglingen mit Kuhmilchproteinallergie

Die Studie umfasste gestillte Säuglinge unter 26 Wochen, bei denen von einem Allergologen eine neu diagnostizierte nicht-IgE-vermittelte Kuhmilchproteinallergie (CMPA) festgestellt wurde, die eine Eliminationsdiät durchführten und sich in zwei ausgewiesenen Krankenhäusern in der Türkei bewarben. Säuglinge und ihre Mütter ohne Allergien oder atopische Erkrankungen, ähnlich in Alter und Geschlecht, waren in der Kontrollgruppe. Gemäß der mit G*Power durchgeführten Power-Analyse wurden insgesamt 32 Säuglinge benötigt, um einen mittelgroßen Unterschied mit einer 5%igen Fehlerwahrscheinlichkeit Typ I und 85%iger Power zu erkennen. Die Studie begann mit 20 Säuglingen mit CMPA und 18 gesunden Säuglingen. Nach diätetischer Nichteinhaltung und Rückzügen schloss die Studie mit 17 Säuglingen in jeder Gruppe ab.

Daten wurden zu zwei Zeitpunkten erhoben: zu Beginn und am Ende der Studie. Zu jedem Zeitpunkt wurden den Müttern persönliche Befragungen durchgeführt, dreitägige Ernährungsprotokolle für beide Mütter und Säuglinge erfasst sowie anthropometrische Messungen der Säuglinge, Kuhmilchprotein-bezogene Symptom-Scores (CoMiSS) und Stuhlproben gesammelt.

Mütter in der Fallgruppe erhielten eine detaillierte Schulung zu Eliminationsdiäten für Kuhmilchprotein (CMP) und Beikost und wurden mit 1000 mg/Tag Kalzium supplementiert. Die Kontrollgruppe erhielt nur Beikost-Beratung. Monatliche Nachverfolgungen wurden durchgeführt, um die Compliance zu überwachen. Die Eliminationsdiät in der Fallgruppe wurde von einem Ernährungsberater verordnet und überwacht, mit Wiedereinführung nach dem "Milchleiter"-Protokoll nach durchschnittlich 1,9±0,79 Monaten. In der Kontrollgruppe wurden die abschließenden Bewertungen drei Monate nach Baseline durchgeführt. Bei Studienabschluss wurden alle initialen Messungen wiederholt und eine zweite Stuhlprobe gesammelt.

Körpergewicht (kg), Länge (cm) und Kopfumfang (cm) der Säuglinge wurden von einem Arzt mit einer standardisierten Waage, einem Infantometer und einem nicht dehnbaren Maßband gemessen, gemäß der von der Weltgesundheitsorganisation empfohlenen Methode. Anthropometrische Messungen [Länge-für-Alter (LFA), Gewicht-für-Alter (WFA), Gewicht-für-Länge (WFL) und Kopfumfang-für-Alter (HCFA)] wurden mit der WHO ANTHRO Software anhand von Z-Scores bewertet (z-Score = Patientenwert - Mittelwert / Standardabweichung).

Dreitägige Ernährungsprotokolle (zwei Werktage, ein Wochenendtag) wurden von Müttern und Säuglingen erfasst. Die Protokolle der Mütter wurden verwendet, um die Einhaltung der Eliminationsdiät zu bewerten, und Teilnehmer, die während der Diät Milchprodukte konsumierten, wurden ausgeschlossen. Portionsgrößen wurden mit einem Bildband für Portionsgrößen geschätzt. Tägliche Energie- und Nährstoffaufnahmen wurden mit der BeBiS-Software (Version 9.0) analysiert. Die Aufnahmen der Säuglinge wurden anhand der angemessenen Zufuhr (AI)-Referenzwerte aus den Dietary Reference Intakes (DRI) bewertet. Die Muttermilchaufnahme wurde mit der ALSPAC-Methode geschätzt: 100 mL für Stillmahlzeiten >10 Minuten und 50 mL für Stillmahlzeiten <5 Minuten, mit Referenzwerten von 780 mL/Tag für 0-6 Monate und 600 mL/Tag für 7-12 Monate.

Die klinischen Symptome der Säuglinge wurden mit CoMiSS bewertet. CoMiSS ist ein Bewertungssystem, das Schreien, Regurgitation, Stuhltyp (Bristol-Stuhlskala), Haut- und respiratorische Symptome bewertet, mit einer Gesamtpunktzahl von 0 bis 33.

Stuhlproben wurden zu Beginn und am Ende der Studie in einem Behälter mit einem Löffel gesammelt, um eine ausreichende Menge (≥50 mg) zu gewährleisten. Die Proben wurden bei -80°C gelagert, um den Verlust der Bioaktivität und Kontamination zu verhindern. MUC2- und sIgA-Analysen wurden mit der Sandwich-Enzymimmunoassay-Methode mit Human MUC2- und Human sIgA-ELISA-Kits über die Enzym-linked-Immunosorbent-Assay (ELISA)-Methode durchgeführt. Das Human MUC2 ELISA-Kit hat eine Sensitivität von 0,57 ng/mL und einen Messbereich von 1,57-100 ng/mL. Das Human sIgA ELISA-Kit hat eine Sensitivität von 0,098 µg/mL und einen Messbereich von 0,312-20 µg/mL. Gemäß dem Analyseprotokoll wurden Proben und Standards in Doppelbestimmung zu Mikrotiterplatten-Wells hinzugefügt. Dann wurden biotinkonjugierter spezifischer Antikörper und Avidin-HRP-Konjugat appliziert. Nach der Farbentwicklung mit TMB-Substrat wurde die Reaktion mit einer Stopplösung, die Schwefelsäure enthält, gestoppt. Die Absorption wurde bei einer Wellenlänge von 450±10 nm gemessen. Konzentrationen wurden dann unter Verwendung einer Standardkurve basierend auf den erhaltenen optischen Dichtewerten berechnet.