Autismikirjon häiriö (ASD) Neurokehityksellinen häiriö, johon liittyy sosiaalisen käyttäytymisen ongelmia, kommunikaatio-ongelmia, ruoansulatuskanavan toimintahäiriö. Tutkimuksessa on multimodaalisia interventioita, jotka kohdistuvat näihin reitteihin cSVF:llä, varastoiduilla MSC:illä, FMT:llä ja ruokavalion muokkauksella. Tutkitaan autoimmuniteetin, suolisto-aivo -ongelmien ja ongelmien roolia. (GARM-Autism)

Tämä tarkennettu protokolla yhdistää uusimman näytön multimodaalisesta interventiosta – autologinen cSVF, kryosäilötyt autologiset MSCs, FMT ja strukturoitu ketogeeninen ohjelma – nuorten ja aikuisten autismikirjon häiriön (ASD) hoitoon.

1. Protokollan yhteenveto

   Otsikko:

   Monikymmenpotilaiden satunnaistettu, kontrolloitu vaiheen 1-2 tutkimus, jossa arvioidaan multimodaalisen hoidon (autologinen cSVF + kryosäilötyt autologiset MSCs, ulosteen mikrobiotan siirto, ketogeeninen ohjelma ja toimintaterapia/fysioterapia) turvallisuutta ja tehoa nuorilla ja aikuisilla, joilla on autismikirjon häiriö (ASD-monitasoinen pisteytys)

   Sponsori: Blacktie Päätutkija: Robert W. Alexander, MD, FICS Tutkimusvaihe: Vaihe I/II Tutkimuskeskukset: 1-3 kliinistä soveltavaa tutkimuslaboratoriota/akateemista keskusta, joilla on asiantuntemusta ASD:stä, kantasolujen käsittelystä ja käytöstä, sekä gastroenterologian/PMD-konsultit saatavilla FMT:tä varten potilaan lähialueella

   Vaatimustenmukaisuus:

   NIH:n ja IRB:n valvonta tietoon perustuva suostumus kaikilta osallistujilta

   ________________________________________

2. Tausta ja perusteet Autismikirjon häiriö (ASD) on hermoston kehityshäiriö, johon liittyy keskeisiä puutteita sosiaalisessa viestinnässä ja käyttäytymisessä, usein myös maha-suolikanavan (GI) ja aineenvaihdunnan häiriöitä.
   Uusin näyttö tukee neuroinflammation (mukaan lukien autoimmuunikomponentit), suoli-aivo-akselin häiriön ja aineenvaihdunnan säätelyhäiriön roolia ASD:n patofysiologiassa.
   Näihin reitteihin kohdistuvat multimodaaliset interventiot – autologinen cSVF, kryosäilötyt MSCs, FMT ja ruokavalion muokkaus – voivat tarjota synergistisiä hyötyjä nuorille ja aikuisille, joilla on ASD.

   ________________________________________

3. Tavoitteet ja päätetapahtumat

   Ensisijainen tavoite:

   • Arvioida multimodaalisten interventioiden turvallisuutta ja siedettävyyttä verrattuna nykyiseen tavanomaiseen hoitoon (SOC) tukihoidossa.

   Toissijaiset tavoitteet:

   • Arvioida muutoksia ASD:n ydinoireissa, GI-toiminnassa, käyttäytymis- ja sosiaalisissa tuloksissa sekä elämänlaadussa.

   Päätetapahtumat:

   • Haittavaikutusten (AE) ja vakavien haittavaikutusten (SAE) ilmaantuvuus
   • Muutos validoiduissa ASD- ja GI-oireasteikoissa (CARS, VABS-II, GSRS, SRS, ABC)
   • Mikrobiomin monimuotoisuuden ja metabolisten biomarkkereiden muutokset
   • Arvioitu suorituskyky ja elämänlaatuarvioinnit

4. Tutkimuksen suunnittelu ja menetelmät

   • Suunnittelu: Monitieteinen, avoin, kontrolloitu, rinnakkaisryhmä (1:1:1), seurattu solujen ja biologisten valmisteiden käytön mukaan, avoin, mukaan lukien ruokavalion/OT-FT:n seuranta
   • Otoskoko: 50 osallistujaa (ikähaarukka 10-90 vuotta, DSM-5 ASD-diagnoosi)
   • Randomisointi: Ositettu iän, sukupuolen ja lähtötason GI-oireiden ja sosiaalisuuden mukaan
   • Väliaikainen analyysi: Hyödyllisyysanalyysi 50 %:n potilaiden rekrytoinnissa

5. Tutkimuspopulaatio

   Sisäänottokriteerit:

   • Ikä 10-90 vuotta, DSM-5 ASD-diagnoosi
   • Vakaa käytössä olevat lääkkeet (jos hoidossa valinnan hetkellä)
   • Lisä-GI-oireiden kanssa tai ilman

   Poissulkukriteerit:

   • Äskettäinen antibioottien/probioottien käyttö
   • Vaikea GI-sairaus tai aliravitsemus
   • Äskettäinen suuri leikkaus
   • Muut lääketieteelliset/kirurgiset ongelmat, jotka estävät protokollan mukaisen hoidon; mukaan lukien kirjon rajoitukset potilaan toleranssille tai noudattamiselle.

6. Interventioprotokollat 6.1 Autologinen soluvasteen stroomafraktio (cSVF)

   • Keräys: Pieni tilavuus lipoaspiraattia steriilillä mikrokanuunalla kerättäessä pientä aggregaattia tSVF:tä – paikallispuudutuksessa tai lisäanestesiassa potilaan sietokyvyn mukaan.
   • Käsittely: Entsymaattinen hajotus cSVF:lle ja solujen eristys/konsentraatio cSVF:n heterogeenisistä soluryhmistä (kollagenaasin, sentrifugoinnin avulla ja mahdollinen osoittamaton solukarakterisointi (CD34+, CD90+, CD105+))
   • Annos: ≥ 10 x 10^6 – 5 × 10^7 solua annostellaan tavallisen suolaliuoksen IV-infuusiona
   • Antotapa: Laskimoon (IV) linjassa olevan steriilin 150 µm:n suodattimen kautta
   • Käytä led-punaista valoaltistusta cSVF:lle koko annostelun ajan
   • Tavallinen American Cell Technology (ACT) -protokollan mukainen keräys, testaus ja yön yli -toimitus keräyspäivänä kryosäilytysprotokollaa varten autologisten mesenkymaalisten kantasolujen (MSCs karakterisoituna yllä) säilyttämiseksi tulevaa väliantokertaa varten
   • Turvallisuus: Seurataan infuusioreaktioita, infektioita ja tromboembolisia tapahtumia] 6.2 Kryosäilötyt autologiset MSCs
   • Lähde: Autologinen mikrokanuunalla kerätty tSVF tai luuydin (BMAC)
   • Kryosäilytys: Hidas jäädytys (-1 °C/min -80 °C:een, sitten nestetyppi), 10 % DMSO, kliinistä laatua olevia liuoksia.
     ACT-standardin mukainen ja valvottu säilytys FDA:n vaatimusten mukaan
   • Elinkykyisyys: ≥70 % sulatuksen jälkeen, vahvistettu ORFLO-virtaussytometrialla
   • Annos: 1-30 × 10^6 solua steriilissä suolaliuoksessa (tasapainotettu) IV-infuusiona minimissään
   • Antotapa: Perifeerinen IV-reitti linjassa olevalla 150 µm:n suodattimella ja punavalaoterapialla
   • Laadunvalvonta: Pintamarkkerianalyysi, stabiilisuus, [endotoksiini, karyotyyppi tallennettu FDA-sertifioidussa solupankkilaboratoriossa – ACT] 6.3 Ulosteen mikrobiotan siirto (FMT)
   • Luovuttajaseulonta: Patogeeni-, lois- ja virusseulonta; FDA:n GMP-käsittely
   • Valmistus: Standardisoitu, jäädytetty ihmiskehon suolistomikrobiota, toimitettu kuivajäällä
   • Esikäsittely: 14 päivää suun kautta otettavaa vankomysiiniä, suolen puhdistus (MoviPrep), mahahapon esto (Prilosec)
   • Annos: Suuri aloitusannos (suun kautta / peräsuoleen), jota seuraa päivittäinen ylläpito suun kautta 7-8 viikon ajan
   • Seuranta: GI- ja käyttäytymisoireet (GSRS, CARS, SRS, VABS-II)14-17] 6.4 Ketogeeninen / lihansyöjäruokavalio (Carnivore RESET -ohjelma)
   • Ruokavalio: Korkea rasva, vähähiilihydraattinen, eläinperäinen perus uudelleenkäynnistys; makroravinteiden suhteet ketoosia aiheuttavaan tilaan (osoittaa rasvanpolttoa ja insuliiniresistenssin vähenemistä).
   • Lähtötilanteen verikokeet: Paastoverensokeri, paastoinsuliinitaso, hemoglobiini A1c, lipidiprofiili, paastoketonit, CBC, CRP ja muut asianmukaiset testit
   • Seuranta: Ruokavalion lokit, veren ketonit, ravitsemusarvioinnit vähintään neljännesvuosittain
   • Tuki: PMC, gastroenterologi jne. palveluntarjoajan tai ravitsemusterapeutin seuranta lähellä potilaan kotia
   • Veritasoja toistetut testaukset 90-180 päivän kuluttua
   • Turvallisuus: Seurataan aineenvaihdunnan häiriöitä, GI-haittavaikutuksia 6.5 Toimintaterapia (OT) / fysioterapia (PT)
   • Ohjelma: Vakiomuotoiset toimintaterapia- ja fysioterapiamoduulit
   • Kielellinen, sosiaalistumis- ja koulutustoimintojen jatko
   • Tiheys: 2-3 istuntoa/viikko, yksilölliset tavoitteet (voidaan seurata kotona)

7. Turvallisuuden seurantasuunnitelma

   • Haittavaikutusten seuranta: Jatkuvaa, ja SAE-tapauksista raportoidaan viipymättä
   • Infuusioreaktiot: Ennen ja jälkeen infuusion seuranta autologisten cSVF/MSCs:ien kohdalla
   • Ruokavalion turvallisuus: Säännölliset metabolia- ja ravitsemusarvioinnit ja seuranta
   • FMT-turvallisuus: Suuren riskin osallistujien poissuljenta, tarkka infektion seuranta

8. Lopputulosmitat ja biomarkkeriarvioinnit Toimialue Arviointivälineet/markkerit ASD-oireet CARS, SRS, ABC, VABS-II; havainnointikäyttäytyminen, sosiaalistumisen muutokset, kommunikointikyvyt, GI-oireet Bristol Stool -asteikko; suolen floora bakteeritestausta Aineenvaihdunta Verensokeri, ketonit, B6-vitamiini, dopamiini Tulehdus Kalaise kvalprotekiiini, seerumin IgA, ESR/CRP Turvallisuus AE-/SAE- lomakkeet, laboratorioseuranta

   ________________________________________

9. Tilastollinen analyysisuunnitelma

   • Ensisijainen analyysi: Turvallisuus (AE/SAE) intervention tarjoajan mukaan
   • Toissijainen analyysi: Muutos oireasteikkossa ja biomarkkereissa (ANCOVA, sekamallit)
   • Väliaikainen analyysi: Hyödyllisyys ja turvallisuus 50 %:n rekrytoinnin tarkastuspisteessä

10. Sääntelyyn ja etiikkaan liittyvät näkökohdat

    • FDA/NIH -kliinisen tutkimuksen hakemus: käytön hyväksynnälle cSVF , MSCs ja FMT
    • IRB-hyväksyntä: NIH/FDA -hyväksyntä tai vastaava tunnustettu IRB-lautakunta (GARM International Review Board)
    • Tietoon perustuva suostumus: Kaikilta osallistujilta/huoltajilta
    • Tietosuoja: HIPAA-yhteensopiva tietojenhallinta