Porucha autistického spektra (ASD) Neurovývojová porucha s problémy sociálního chování, komunikačními problémy, gastrointestinální dysfunkcí. Studie je multimodální intervence zaměřená na tyto dráhy pomocí cSVF, skladovaných MSC, FMT a úpravy stravy. Role autoimunity, střevně-mozkových problémů a problémů je zkoumána. (GARM-Autism)

Tento vylepšený protokol integruje nejnovější důkazy pro multimodální intervenci – autologní cSVF, kryoprezervované autologní MSC, FMT a strukturovaný ketogenní protokol – pro léčbu adolescentů a dospělých s PAS.

1. Shrnutí protokolu

   Název:

   Randomizovaná kontrolovaná studie fáze 1–2 hodnotící bezpečnost a účinnost multimodální terapie (autologní cSVF + kryoprezervované autologní MSC, fekální mikrobiální transplantace, ketogenní program Reset a trénink OT/PT) u adolescentů a dospělých s poruchou autistického spektra (víceúrovňové skórování PAS)

   Sponzor: Blacktie Hlavní řešitel: Robert W. Alexander, MD, FICS Fáze studie: Fáze I/II Studijní centra: 1–3 klinická aplikovaná výzkumná laboratoře/akademická centra s odborností v PAS, zpracování a využití kmenových buněk, plus konzultanti gastroenterologie/PMD k dispozici pro FMT v lokalitě pacienta

   Soulad:

   Dohled NIH a IRB Informovaný souhlas všech účastníků

   ________________________________________

2. Popis pozadí a odůvodnění Porucha autistického spektra (PAS) je neurovývojové onemocnění s klíčovými deficity v sociální komunikaci a chování, často doprovázené gastrointestinální (GI) a metabolickou dysfunkcí. Nové důkazy podporují roli neurozánětu (včetně autoimunitních složek), narušení osy střevo-mozek a metabolické dysregulace v patofyziologii PAS. Multimodální intervence zaměřené na tyto cesty – s použitím autologního cSVF, kryoprezervovaných MSC, FMT a dietní modulace – mohou nabídnout synergické výhody pro adolescenty a dospělé s PAS.

   ________________________________________

3. Cíle a ukazatele

   Primární cíl:

   • Vyhodnotit bezpečnost a snášenlivost multimodálních intervencí ve srovnání se současným standardem péče (SOC) pro podpůrnou terapii.

   Sekundární cíle:

   • Posoudit změny v klíčových symptomech PAS, GI funkci, behaviorálních a sociálních výsledcích a kvalitě života.

   Ukazatele:

   • Výskyt nežádoucích účinků (AE) a závažných nežádoucích účinků (SAE)
   • Změna ve validovaných škálách symptomů PAS a GI (CARS, VABS-II, GSRS, SRS, ABC)
   • Změny diverzity mikrobiomu a metabolických biomarkerů
   • Hodnocení výkonnosti a hodnocení kvality života

4. Design a metodika studie

   • Design: Multidisciplinární, otevřená, kontrolovaná, paralelní skupina (1:1:1), sledování použitých buněk a biologických látek, otevřená, včetně sledování diety/OT-PT
   • Velikost vzorku: 50 účastníků (věkové rozmezí 10–90 let, diagnóza PAS podle DSM-5)
   • Randomizace: Stratifikovaná podle věku, pohlaví a výchozích GI symptomů a socializace
   • Průběžná analýza: Analýza marnosti při 50% zařazení

5. Studijní populace

   Kritéria pro zařazení:

   • Věk 10–90 let, diagnóza PAS podle DSM-5
   • Stabilní na současné medikaci (pokud je léčena v době výběru)
   • S/bez komorbidních GI symptomů

   Kritéria pro vyloučení:

   • Nedávná antibiotika/probiotika
   • Závažné GI onemocnění nebo podvýživa
   • Nedávný velký chirurgický zákrok
   • Jiné zdravotní/chirurgické problémy, které brání léčbě podle protokolu; včetně omezení spektra pro snášenlivost nebo dodržování pacientem.

6. Intervenční protokoly 6.1 Autologní buněčná stromální vaskulární frakce (cSVF)

   • Odběr: Malý objem lipoaspirátu sterilní mikrokanylou – při lokální nebo doplňkové anestezii podle schopnosti pacienta tolerovat.
   • Zpracování: Enzymatické trávení pro cSVF a izolaci/koncentraci buněk heterogenních skupin v rámci cSVF (pomocí kolagenázy, centrifugace a případné charakterizace nedesignovaných buněk (CD34+, CD90+, CD105+)
   • Dávkování: =/> 10 x 10^6 – 5 × 10^7 buněk podaných standardní IV infuzí fyziologického roztoku
   • Podání: Intravenózní (IV) cesta s in-line sterilní filtrací 150 µm
   • Aplikované LED červené světlo vystavené cSVF po celou dobu podání
   • Standardní protokol American Cell Technology (ACT) odběru, testování a nočního převozu v den odběru pro kryoprezervační protokol pro uchování autologních mezenchymálních kmenových buněk (MSC charakterizovaných výše) pro budoucí intervalové podání
   • Bezpečnost: Monitorování infuzních reakcí, infekce a tromboembolických příhod] 6.2 Kryoprezervované autologní MSC
   • Zdroj: Autologní mikrokanylou odebraná tSVF nebo kostní dřeň (BMAC)
   • Kryoprezervace: Pomalé zmrazování (-1 °C/min na -80 °C, poté tekutý dusík), 10% DMSO, klinicky čisté roztoky. ACT standard a monitorované skladování dle požadavků FDA
   • Vitalita: ≥ 70 % po rozmrazení, potvrzeno průtokovou cytometrií ORFLO
   • Dávkování: 1–30 × 10^6 buněk v minimu sterilního fyziologického roztoku (vyváženého) IV infuzí
   • Podání: Periferní IV cesta s in-line filtrací 150 µm a terapií červeným světlem
   • Kontrola kvality: Analýza povrchových markerů, sterilita, [endotoxin, karyotyp na záznamu v laboratoři buněčného bankovnictví certifikované FDA – ACT] 6.3 Fekální mikrobiální transplantace (FMT)
   • Testování dárce: Screening patogenů, parazitů a virů; zpracování dle GMP FDA
   • Příprava: Standardizovaná, zmražená lidská střevní mikrobiota, dodávaná na suchém ledu
   • Předléčení: 14 dní perorální vankomycin, očista střev (MoviPrep), potlačení kyselosti (Prilosec)
   • Dávkování: Vysoká počáteční dávka (perorální/rektální), následovaná denní perorální udržovací dávkou po dobu 7–8 týdnů
   • Monitorování: GI a behaviorální symptomy (GSRS, CARS, SRS, VABS-II)14-17]] 6.4 Ketogenní/masná dieta (Carnivore RESET Program)
   • Dieta: Vysokotučná, nízkosacharidová, na mase založená reset; poměr makroživin k navození stavu ketózy (ukazatel spalování tuků a snížení inzulínové rezistence).
   • Základní krevní testy: Lačná glykémie, lačný inzulín, glykovaný hemoglobin A1c, lipidový profil, lačné ketolátky, krevní obraz, CRP a další vhodné testy
   • Monitorování: Dietní záznamy, krevní ketolátky, nutriční hodnocení minimálně čtvrtletně
   • Podpora: PMC, gastroenterolog atd. poskytovatel nebo dietolog, kontroly dodržování v blízkosti domova pacienta
   • Opakování krevních testů po 90–180 dnech
   • Bezpečnost: Monitorování metabolických poruch, GI vedlejších účinků 6.5 OT/PT trénink
   • Program: Standardizované moduly pracovní a fyzikální terapie
   • Pokračování verbálních, socializačních a vzdělávacích snah
   • Frekvence: 2–3 sezení týdně, individualizované cíle (může být monitorováno doma)

7. Plán monitorování bezpečnosti

   • Sledování nežádoucích účinků: Nepřetržité, s rychlým hlášením SAE
   • Infuzní reakce: Monitorování před a po infuzi autologních cSVF/MSC
   • Bezpečnost diety: Pravidelné metabolické a nutriční hodnocení a sledování
   • Bezpečnost FMT: Vyloučení vysoce rizikových účastníků, pečlivé sledování infekce

8. Měření výsledků a hodnocení biomarkerů Domain Assessment Tools/Markers ASD Symptoms CARS, SRS, ABC, VABS-II; observační chování, změny socializace, komunikační schopnosti, GI Symptoms Bristol Stool Scale; testování řízení střevní bakteriální flóry Metabolic Blood glucose, ketones, vitamin B6, dopamine Inflammation Fecal calprotectin, serum IgA, ESR/CRP Safety AE/SAE logs, laboratory monitoring

   ________________________________________

9. Plán statistické analýzy

   • Primární analýza: Bezpečnost (AE/SAE) podle poskytovatele intervence
   • Sekundární analýza: Změna škál symptomů a biomarkerů (ANCOVA, smíšené modely)
   • Průběžná analýza: Marnost a bezpečnost při kontrole 50% zařazení

10. Regulační a etické aspekty

    • Předložení klinické studie FDA/NIH: Pro schválení studie použití cSVF, MSC a FMT
    • Schválení IRB: Schválení NIH/FDA nebo ekvivalentní uznávanou IRB komisí (GARM International Review Board)
    • Informovaný souhlas: Všichni účastníci/zákonní zástupci
    • Ochrana dat: Správa dat v souladu s HIPAA