Autism Spectrum Disorder (ASD) Neurodevelopmental Disorder With Issues Social Behavior, Communication Issues, GI Dysfunction. Study is Multimodal Interventions Targeting These Pathways With cSVF, Stored MSCs, FMT and Diet Modification. Role of Autoimmunity, Gut-brain Issues, & Issues Examined. (GARM-Autism)

Denne raffinerede protokol integrerer den nyeste evidens for en multimodal intervention – autolog cSVF, kryopræserverede autologe MSC'er, FMT og et struktureret ketogent protokolprogram – til behandling af ASF hos unge og voksne.

1. Protokolresumé

   Titel:

   Et fase 1-2 randomiseret kontrolleret forsøg til evaluering af sikkerhed og effekt af multimodal terapi (autolog cSVF + kryopræserverede autologe MSC'er, fækal mikrobiota-transplantation, ketogent program-reset og ergo/fysioterapi) hos unge og voksne med autismespektrumforstyrrelse (ASF-Multi-level scoring)

   Sponsor: Blacktie Hovedforsker: Robert W. Alexander, MD, FICS Forsøgsfase: Fase I/II Forsøgscentre: 1-3 Klinisk anvendte forskningslaboratorier/akademiske centre med ekspertise i ASF, stamcellebehandling og -anvendelse samt gastroenenterologi/PMD-konsulenter tilgængelige for FMT i patientens lokalområde

   Overholdelse:

   NIH- og IRB-tilsyn Informeret samtykke for alle deltagere

   ________________________________________

2. Baggrund og rational Autismespektrumforstyrrelse (ASF) er en neuropsykologisk tilstand med kernemæssige mangler i social kommunikation og adfærd, ofte ledsaget af gastrointestinal (GI) og metabolisk dysfunktion. Ny evidens understøtter rollen af neuroinflammation (herunder autoimmune komponenter), forstyrrelse af tarm-hjerne-aksen og metabolisk dysregulering i ASF's patofysiologi. Multimodale interventioner rettet mod disse veje – ved brug af autolog cSVF, kryopræserverede MSC'er, FMT og kostmodulering – kan tilbyde synergistiske fordele for unge og voksne med ASF.

   ________________________________________

3. Mål og endepunkter

   Primært mål:

   • Evaluere sikkerhed og tolerabilitet af de multimodale interventioner sammenlignet med nuværende standardbehandling (SOC) for støttende terapi.

   Sekundære mål:

   • Vurdere ændringer i ASF-kernesymptomer, GI-funktion, adfærdsmæssige og sociale resultater og livskvalitet.

   Endepunkter:

   • Forekomst af bivirkninger (AE) og alvorlige bivirkninger (SAE)
   • Ændring i validerede ASF- og GI-symptom skalaer (CARS, VABS-II, GSRS, SRS, ABC)
   • Mikrobiom mangfoldighed og metaboliske biomarkørændringer
   • Vurderet præstation og livskvalitetsevalueringer

4. Forsøgsdesign og metode

   • Design: Multidisciplinært, åbent mærket, kontrolleret, parallelgruppe (1:1:1), sporet for anvendte celle- og biologiske produkter, åbent, inklusive sporing af diæt/ergo-fysioterapi
   • Stikprøvestørrelse: 50 deltagere (aldersspænd 10-90, DSM-5 ASF-diagnose)
   • Randomisering: Stratificeret efter alder, køn og baseline GI-symptomer, socialisering
   • Interimsanalyse: Futilitetsanalyse ved 50% tilmelding

5. Forsøgspopulation

   Inklusionskriterier:

   • Alder 10-90 år, DSM-5 ASF-diagnose
   • Stabil på nuværende medicin (hvis sådan behandlet på tidspunktet for udvælgelse)
   • Med/uden samtidige GI-symptomer

   Eksklusionskriterier:

   • Nylig antibiotika/probiotika
   • Alvorlig GI-sygdom eller underernæring
   • Nylig større operation
   • Andre medicinske/kirurgiske problemer, der udelukker behandling med protokollen; herunder spektrumbegrænsninger for patientens tolerance eller overholdelse.

6. Interventionsprotokoller 6.1 Autolog cellulær stromal vaskulær fraktion (cSVF)

   • Indsamling: Lille volumen lipoaspirat via steril mikrokanalhostning af lille aggregat tSVF – under lokal eller supplerende anæstesi som bestemt af patientens evne til at tolerere.
   • Behandling: Enzymatisk fordøjelse til cSVF og cellulær isolering/koncentration af heterogene cellelotioner inden for cSVF (via kollagenase, centrifugering og mulig karakterisering af uudpegede celler (CD34+, CD90+, CD105+)
   • Dosering: =/> 10 x 106 - 5 × 10^7 celler leveret ved standard normal saltvand IV infusion
   • Administration: Intravenøs (IV) vej med in-line steril 150u filtrering
   • Anvendt LED rødt lys eksponering cSVF under hele deployment
   • Standard American Cell Technology (ACT) protokol indsamling, testning og fragt natten over på høstdag for kryopræserveringsprotokol til opbevaring af autologe mesenchymale stamceller (MSC'er karakteriseret som ovenfor) til fremtidig intervallevering
   • Sikkerhed: Overvåget for infusionsreaktioner, infektion og tromboemboliske hændelser] 6.2 Kryopræserverede autologe MSC'er
   • Kilde: Autolog mikrokanal indsamlet tSVF eller knoglemarv (BMAC)
   • Kryopræservering: Langsom frysning (-1°C/min til -80°C, derefter flydende nitrogen), 10% DMSO, klinisk-grad opløsninger. ACT Standard og overvåget opbevaring i henhold til FDA krav
   • Levedygtighed: ≥70% efter optøning, bekræftet af ORFLO Flow Cytometri
   • Dosering: 1-30 × 10^6 celler i steril normal saltvand (balanceret) IV infusion minimum
   • Administration: Perifer IV vej med in-line 150 u micron filtrering og rødt lys terapi
   • Kvalitetskontrol: Overfladmarker analyse, sterilitet, [endotoxin, karyotypi på optegnelse med FDA certificeret cellebankeringslaboratorie- ACT] 6.3 Fækal mikrobiota transplantation (FMT)
   • Donorscreening: Patogen-, parasit- og viruscreening; FDA GMP behandling
   • Forberedelse: Standardiseret, frossen human tarm mikrobiologi, leveret på tøris
   • Før-behandling: 14 dage oral vancomycin, tarmrensning (MoviPrep), syreundertrykkelse (Prilosec)
   • Dosering: Høj startdosis (oral/rektal), efterfulgt af daglig oral vedligeholdelse i 7-8 uger
   • Overvågning: GI og adfærdsmæssige symptomer (GSRS, CARS, SRS, VABS-II)14-17]] 6.4 Ketogen/karnivor diæt (Ketogent reset-program)
   • Diæt: Højt fedtindhold, lavt kulhydratindhold, dyrebaseret reset; makronæringsforhold til at fremkalde en tilstand af ketose (indikerer fedtforbrænding og reduktion af insulinresistens).
   • Baseline blodtest: FBS, fastende insulin niveauer, hæmoglobin A1c, lipidpanel, fastende ketoner, CBC, CRP og andre passende tests
   • Overvågning: Kostlogførte mængder fødeindtag, blodketoner, ernæringsmæssige vurderinger mindst kvartalsvis
   • Støtte: PMC, gastroenterolog mm. Udbyder eller ernæringsekspert, overholdelsestjek tæt på patientens hjem
   • Gentag blodniveauer testet efter 90-180 dage
   • Sikkerhed: Overvåg for metaboliske forstyrrelser, GI-bivirkninger 6.5 Ergo/fysioterapi
   • Program: Standardiserede ergonlighold af aktiviteter i dagligdagen og fysioterapi moduler
   • Fortsættelse af verbal, socialisering og uddannelsesmæssige initiativer
   • Frekvens: 2-3 sessioner/uge, individuelle mål (kan overvåges hjemme)

7. Sikkerhedsovervågningsplan

   • Overvågning af bivirkninger: Kontinuerlig, med øjeblikkelig rapportering af SAE'er
   • Infusionsreaktioner: Præ- og post-infusion overvågning for autolog cSVF/MSC'er
   • Kostsikkerhed: Regelmæssig metabolisk og ernæringsmæssig vurdering og projekt-opfølgning
   • FMT-sikkerhed: Udeluk højrisikodeltagere, tæt overvågning for infektion

8. Resultatmål og biomarkørvurderinger Område Vurderinger/Markører ASF-symptomer CARS, SRS, ABC, VABS-II; observations adfærd, socialisering ændringer, kommunikationsevner, GI-symptomer Bristol Affordable fornøjelsers skala; Ledelsestest af tarmflorabakterier Metabolisk Blod-glukose, ketoner, vitamin B6, dopamin Inflammation Fecal calprotectin, serum IgA, ESR/CRP Sikkerhed AE/SAE-logs, laboratorieovervågning

   ________________________________________

9. Statistisk analyseplan

   • Primær analyse: Sikkerhed (AE'er/SAE'er) efter interventionsudbyder
   • Sekundær analyse: Ændring i symptomskalaer og biomarkører (ANCOVA, blandede modeller)
   • Interimsanalyse: Futilitet og sikkerhed ved 50% tilmeldingskontrol

10. Regulatoriske og etiske overvejelser

    • FDA/NIH klinisk forsøg indsendelse: For forsøgsgodkendelse til brug af cSVF, MSC'er og FMT
    • IRB godkendelse: NIH/FDA godkendelse eller tilsvarende anerkendt IRB bestyrelse (GARM International Review Board)
    • Informeret samtykke: Alle deltagere/værger
    • Databeskyttelse: HIPAA-kompatibel datastyring