Transtorno do Espectro Autista (TEA) Transtorno do Neurodesenvolvimento Com Problemas de Comportamento Social, Problemas de Comunicação, Disfunção GI. O estudo é Intervenções Multimodais que Visam essas Vias com cSVF, MSCs Armazenadas, FMT e Modificação Dietética. Papel da Autoimunidade, Problemas Intestino-cérebro e Problemas Examinados. (GARM-Autism)

Este protocolo refinado integra as evidências mais recentes para uma intervenção multimodal - cSVF autólogo, MSCs autólogas criopreservadas, FMT e um programa cetogénico estruturado - para o tratamento da PEA em adolescentes e adultos.

1. Resumo do Protocolo

   Título:

   Um Ensaio Clínico Randomizado de Fase 1-2 Avaliando a Segurança e Eficácia da Terapia Multimodal (cSVF Autólogo + MSCs Autólogas Criopreservadas, Transplante de Microbiota Fecal, Programa de Reeducação Cetogénica e Treino TO/TF) em Adolescentes e Adultos com Perturbação do Espectro do Autismo (Avaliação Multinível da PEA)

   Patrocinador: Blacktie Investigador Principal: Robert W. Alexander, MD, FICS Fase do Estudo: Fase I/II Centros de Estudo: 1-3 Laboratórios de Investigação Clínica Aplicada/centros académicos com experiência em PEA, processamento e utilização de células estaminais, além de consultores de gastroenterologia/PMD disponíveis para FMT na localização do paciente

   Conformidade:

   Supervisão do NIH e do IRB Consentimento informado para todos os participantes

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2. Contexto e Justificação A perturbação do espectro do autismo (PEA) é uma condição do neurodesenvolvimento com défices centrais na comunicação social e comportamento, frequentemente acompanhada de disfunção gastrointestinal (GI) e metabólica. Evidências emergentes suportam o papel da neuroinflamação (incluindo componentes autoimunes), disrupção do eixo intestino-cérebro e desregulação metabólica na fisiopatologia da PEA. Intervenções multimodais dirigidas a estas vias - utilizando cSVF autólogo, MSCs criopreservadas, FMT e modulação dietética - podem oferecer benefícios sinérgicos para adolescentes e adultos com PEA.

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3. Objetivos e Critérios de Avaliação

   Objetivo Primário:

   • Avaliar a segurança e tolerabilidade das intervenções multimodais em comparação com o padrão de cuidados atual (SOC) para terapia de suporte.

   Objetivos Secundários:

   • Avaliar alterações nos sintomas centrais da PEA, função GI, resultados comportamentais e sociais, e qualidade de vida.

   Critérios de Avaliação:

   • Incidência de eventos adversos (EAs) e eventos adversos graves (EAGs)
   • Alteração em escalas validadas de sintomas de PEA e GI (CARS, VABS-II, GSRS, SRS, ABC)
   • Diversidade do microbioma e alterações em biomarcadores metabólicos
   • Avaliações de desempenho e qualidade de vida

4. Desenho e Metodologia do Estudo

   • Desenho: Multidisciplinar, aberto, controlado, grupos paralelos (1:1:1), monitorizado para células e produtos biológicos utilizados, rótulo aberto, incluindo registo de dieta/TO-TF
   • Tamanho da Amostra: 50 participantes (idades 10-90 anos, diagnóstico de PEA pelo DSM-5)
   • Randomização: Estratificada por idade, sexo e sintomas GI e socialização de base
   • Análise Interina: Análise de futilidade aos 50% do recrutamento

5. População do Estudo

   Critérios de Inclusão:

   • Idade 10-90 anos, diagnóstico de PEA pelo DSM-5
   • Estável com medicação atual (se tratado no momento da seleção)
   • Com ou sem sintomas GI comórbidos

   Critérios de Exclusão:

   • Antibióticos/probióticos recentes
   • Doença GI grave ou má nutrição
   • Cirurgia major recente
   • Outras questões médicas/cirúrgicas que impeçam o tratamento com o protocolo; incluindo limitações do espetro para tolerância ou cumprimento do paciente.

6. Protocolos de Intervenção 6.1 Fração Vascular Estromal Celular Autóloga (cSVF)

   • Recolha: Lipoaspiração de pequeno volume através de recolha com microcânula estéril de pequenos agregados de tSVF - sob anestesia local ou suplementar conforme a capacidade de tolerância do paciente.
   • Processamento: Digestão enzimática para cSVF e isolamento/concentração celular de grupos celulares heterogéneos dentro da cSVF (via colagenase, centrifugação e possível caracterização celular não designada (CD34+, CD90+, CD105+)
   • Dosagem: >/= 10 x 10^6 - 5 × 10^7 células administradas por infusão IV de soro fisiológico normal
   • Administração: Via intravenosa (IV) com filtragem estéril em linha de 150u
   • Exposição a Luz Vermelha LED aplicada à cSVF durante toda a administração
   • Protocolo padrão de recolha, teste e envio noturno da American Cell Technology (ACT) no dia da recolha para protocolo de criopreservação para armazenamento de células estaminais mesenquimatosas autólogas (MSCs caracterizadas como acima) para administração futura
   • Segurança: Monitorizado para reações à infusão, infeção e eventos tromboembólicos] 6.2 MSCs Autólogas Criopreservadas
   • Fonte: tSVF recolhido por microcânula autóloga ou medula óssea (BMAC)
   • Criopreservação: Congelamento lento (-1°C/min até -80°C, depois azoto líquido), 10% DMSO, soluções de grau clínico. Armazenamento padrão e monitorizado da ACT conforme requisito da FDA
   • Viabilidade: ≥ 70% pós-descongelação, confirmada por citometria de fluxo ORFLO
   • Dosagem: 1-30 × 10^6 células em soro fisiológico normal estéril (balanceado) infusão IV mínima
   • Administração: Via IV periférica com filtragem em linha de 150 u micrões e terapia com luz vermelha
   • Controlo de Qualidade: Análise de marcadores de superfície, esterilidade, [endotoxina, cariótipo registado no Laboratório de Banco de Células certificado pela FDA - ACT] 6.3 Transplante de Microbiota Fecal (FMT)
   • Seleção do Dador: Rastreio de patogéneos, parasitas e vírus; processamento GMP da FDA
   • Preparação: Microbiota intestinal humana congelada padronizada, entregue em gelo seco
   • Pré-tratamento: 14 dias de vancomicina oral, limpeza intestinal (MoviPrep), supressão ácida (Prilosec)
   • Dosagem: Dose inicial alta (oral/retal), seguida de manutenção oral diária por 7-8 semanas
   • Monitorização: Sintomas GI e comportamentais (GSRS, CARS, SRS, VABS-II)14-17]] 6.4 Dieta Cetogénica/Carnívora (Programa Carnívoro RESET)
   • Dieta: Reeducação à base de alimentos de origem animal, rica em gordura, baixa em hidratos de carbono; rácios de macronutrientes para induzir um estado de cetose (indicativo de queima de gordura e redução da resistência à insulina).
   • Testes Sanguíneos de Base: Glicemia em Jejum, Níveis de Insulina em Jejum, Hemoglobina A1c, Perfil Lipídico, Cetonas em Jejum, Hemograma Completo, PCR e outros testes apropriados
   • Monitorização: Registos alimentares, cetonas no sangue, avaliações nutricionais pelo menos trimestrais
   • Apoio: Médico de Medicina Geral e Familiar, Gastroenterologista, etc, Prestador de cuidados ou Dietista, verificações de cumprimento perto da residência do paciente
   • Repetição de testes sanguíneos após 90-180 dias
   • Segurança: Monitorizar para alterações metabólicas, efeitos secundários GI 6.5 Treino de Terapia Ocupacional/Fisioterapia (TO/TF)
   • Programa: Módulos padronizados de terapia ocupacional e fisioterapia
   • Continuação de Esforços Verbais, de Socialização e Educacionais
   • Frequência: 2-3 sessões/semana, objetivos individualizados (podem ser monitorizados em casa)

7. Plano de Monitorização de Segurança

   • Monitorização de Eventos Adversos: Contínua, com comunicação imediata de EAGs
   • Reações à Infusão: Monitorização pré e pós-infusão para cSVF/MSCs autólogas
   • Segurança Dietética: Avaliações metabólicas e nutricionais regulares e registo
   • Segurança do FMT: Exclusão de participantes de alto risco, monitorização apertada para infeção

8. Medidas de Resultado e Avaliações de Biomarcadores Domínio Ferramentas de Avaliação/Marcadores Sintomas de PEA CARS, SRS, ABC, VABS-II; observação comportamental, alterações na socialização, capacidades de comunicação, Sintomas GI Escala de Bristol; testes de gestão de bactérias da flora intestinal Metabólico Glucose sanguínea, cetonas, vitamina B6, dopamina Inflamação Calprotectina fecal, IgA sérica, VS/PCR Segurança Registos de EA/EAG, monitorização laboratorial

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9. Plano de Análise Estatística

   • Análise Primária: Segurança (EAs/EAGs) por Prestador de intervenção
   • Análise Secundária: Alteração nas escalas de sintomas e biomarcadores (ANCOVA, modelos mistos)
   • Análise Interina: Futilidade e segurança aos 50% do recrutamento

10. Considerações Regulamentares e Éticas

    • Submissão de Ensaio Clínico ao FDA/NIH: Para aprovação do uso de cSVF, MSCs e FMT
    • Aprovação do IRB: Aprovação do NIH/FDA ou conselho de revisão ética reconhecido equivalente (GARM International Review Board)
    • Consentimento Informado: Todos os participantes/tutores
    • Privacidade dos Dados: Gestão de dados em conformidade com a HIPAA