Расстройство аутистического спектра (РАС) Нейроразвивающее расстройство с проблемами социального поведения, проблемами общения, дисфункцией ЖКТ. Исследование представляет мультимодальные вмешательства, нацеленные на эти пути, с использованием cSVF, сохраненных МСК, ФМТ и модификации диеты. Рассматриваются роль аутоиммунитета, проблем оси кишечник-мозг и другие проблемы. (GARM-Autism)

Этот уточненный протокол объединяет последние данные о мультимодальном вмешательстве — аутологичном cSVF, криоконсервированных аутологичных МСК, ФМТ и структурированной кетогенной программе — для лечения РАС у подростков и взрослых.

1. Краткое описание протокола

   Название:

   Рандомизированное контролируемое исследование фазы 1-2 по оценке безопасности и эффективности мультимодальной терапии (аутологичный cSVF + криоконсервированные аутологичные МСК, трансплантация фекальной микробиоты, кетогенная программа сброса и обучение ОТ/ФТ) у подростков и взрослых с расстройством аутистического спектра (многоуровневая оценка РАС)

   Спонсор: Blacktie. Главный исследователь: Роберт В. Александр, доктор медицины, FICS. Фаза исследования: I/II. Исследовательские центры: 1-3 клинических прикладных исследовательских лаборатории/академических центра с опытом в области РАС, обработки и использования стволовых клеток, а также консультанты по гастроэнтерологии/ПМД для проведения ФМТ по месту жительства пациента.

   Соответствие:

   Надзор NIH и IRB. Информированное согласие для всех участников.

   ________________________________________

2. Обоснование и предпосылки. Расстройство аутистического спектра (РАС) — это нейроразвитие с основными нарушениями социальной коммуникации и поведения, часто сопровождающимися желудочно-кишечной (ЖК) и метаболической дисфункцией. Появляющиеся данные подтверждают роль нейровоспаления (включая аутоиммунные компоненты), нарушения оси кишечник-мозг и метаболической дисрегуляции в патофизиологии РАС. Мультимодальные вмешательства, направленные на эти пути, с использованием аутологичного cSVF, криоконсервированных МСК, ФМТ и диетической модуляции, могут дать синергетические преимущества для подростков и взрослых с РАС.

   ________________________________________

3. Цели и конечные точки

   Основная цель:

   • Оценить безопасность и переносимость мультимодальных вмешательств по сравнению с текущим стандартом лечения (SOC) для поддерживающей терапии.

   Вторичные цели:

   • Оценить изменения в основных симптомах РАС, функции ЖКТ, поведенческих и социальных результатах, а также качестве жизни.

   Конечные точки:

   • Частота нежелательных явлений (НЯ) и серьезных нежелательных явлений (СНЯ)
   • Изменение в валидированных шкалах симптомов РАС и ЖКТ (CARS, VABS-II, GSRS, SRS, ABC)
   • Изменения в разнообразии микробиома и метаболических биомаркерах
   • Оценка выполнения и оценка качества жизни

4. Дизайн исследования и методология

   • Дизайн: Многодисциплинарное, открытое, контролируемое, параллельное (1:1:1), отслеживаемое по использованным клеткам и биологическим препаратам, открытое, включая отслеживание диеты/ОТ-ФТ
   • Размер выборки: 50 участников (возраст 10-90 лет, диагноз РАС по DSM-5)
   • Рандомизация: Стратификация по возрасту, полу и исходным симптомам ЖКТ, социализации
   • Промежуточный анализ: Анализ бесперспективности при 50% наборе

5. Группа исследования

   Критерии включения:

   • Возраст 10-90 лет, диагноз РАС по DSM-5
   • Стабильный режим приема текущих лекарств (если они принимались на момент отбора)
   • С сопутствующими симптомами ЖКТ или без них

   Критерии исключения:

   • Недавний прием антибиотиков/пробиотиков
   • Тяжелое заболевание ЖКТ или недоедание
   • Недавняя серьезная операция
   • Другие медицинские/хирургические проблемы, исключающие лечение по протоколу, включая ограничения спектра в отношении переносимости или соблюдения режима лечения пациентом

6. Протоколы вмешательства 6.1 Аутологичная клеточная стромально-васкулярная фракция (cSVF)

   • Сбор: Небольшой объем липоаспирата с помощью стерильной микроканюли для получения небольшого агрегата tSVF - под местной или дополнительной анестезией, в зависимости от переносимости пациента.
   • Обработка: Ферментативное переваривание для cSVF и выделение/концентрация клеток гетерогенных групп внутри cSVF (с помощью коллагеназы, центрифугирования и возможной характеристики недесигнированных клеток (CD34+, CD90+, CD105+))
   • Дозировка: ≥ 10 x 10^6 - 5 × 10^7 клеток, вводимых внутривенно со стандартным физиологическим раствором
   • Введение: Внутривенное (IV) с линейной стерильной фильтрацией 150 мкм
   • Применение светодиодного красного света на протяжении всего введения cSVF
   • Стандартный протокол American Cell Technology (ACT) забора, тестирования и ночной доставки в день забора для протокола криоконсервации для хранения аутологичных мезенхимальных стволовых клеток (МСК, охарактеризованных выше) для будущего интервального введения
   • Безопасность: Мониторинг инфузионных реакций, инфекций и тромбоэмболических событий] 6.2 Криоконсервированные аутологичные МСК
   • Источник: Аутологичный tSVF, полученный с помощью микроканюли, или костный мозг (BMAC)
   • Криоконсервация: Медленное замораживание (-1°C/мин до -80°C, затем жидкий азот), 10% DMSO, клинические растворы. Стандартный и контролируемый ACT протокол хранения в соответствии с требованиями FDA
   • Жизнеспособность: ≥ 70% после размораживания, подтверждено проточной цитометрией Orflo
   • Дозировка: Минимум 1-30 × 10^6 клеток в стерильном физиологическом растворе для внутривенной инфузии
   • Введение: Периферическая IV с фильтрацией 150 мкм и светодиодной красной терапией
   • Контроль качества: анализ поверхностных маркеров, стерильность, эндотоксин, кариотип записаны в сертифицированной FDA лаборатории хранения клеток ACT] 6.3 Трансплантация фекальной микробиоты (ФМТ)
   • Скрининг донора: скрининг на патогены, паразиты и вирусы; обработка GMP FDA
   • Приготовление: стандартизированная, замороженная микробиота кишечника человека, доставленная на сухом льду
   • Предварительная обработка: 14 дней пероральный ванкомицин, очистка кишечника (MoviPrep), подавление кислотности (Prilosec)
   • Дозировка: Высокая начальная доза (перорально/ректально) с последующим ежедневным пероральным поддерживающим приемом в течение 7-8 недель
   • Мониторинг: Симптомы ЖКТ и поведения (GSRS, CARS, SRS, VABS-II)] 6.4 Кетогенная/карниворная диета (программа Carnivore RESET)
   • Диета: с высоким содержанием жиров, низким содержанием углеводов, животная диета-сброс; макронутриенты для индукции состояния кетоза (указание на сжигание жира и снижение инсулинорезистентности)
   • Базовое тестирование крови: Глюкоза натощак, уровень инсулина натощак, гликозилированный гемоглобин, липидный профиль, кетоны натощак, общий анализ крови, С-реактивный белок и другие соответствующие тесты
   • Мониторинг: диетические дневники, кетоны крови, оценка питания не реже одного раза в квартал
   • Поддержка: ПМСП, гастроэнтеролог и др. поставщик или диетолог, контроль соблюдения рядом с домом пациента
   • Повторное тестирование крови через 90-180 дней
   • Безопасность: мониторинг метаболических нарушений, побочных эффектов со стороны ЖКТ 6.5 Обучение ОТ/ФТ
   • Программа: стандартизированные модули оккупационной и физической терапии
   • Продолжение вербальных, социализационных и образовательных усилий
   • Частота: 2-3 сеанса в неделю, индивидуальные цели (могут контролироваться на дому)

7. План мониторинга безопасности

   • Мониторинг нежелательных явлений: постоянно, с оперативной отчетностью о СНЯ
   • Реакции на инфузию: мониторинг до и после инфузии для аутологичного cSVF/МСК
   • Безопасность диеты: регулярные метаболические и пищевые оценки и отслеживание
   • Безопасность ФМТ: исключение участников с высоким риском, тщательный мониторинг на предмет инфекций

8. Оценка результатов и биомаркеров Область Инструменты оценки/маркеры Симптомы РАС CARS, SRS, ABC, VABS-II; наблюдательное поведение, изменения социализации, коммуникативные способности Симптомы ЖКТ Бристольская шкала стула; тестирование управления бактериями кишечной флоры Метаболизм глюкоза крови, кетоны, витамин B6, дофамин Воспаление фекальный кальпротектин, сывороточный IgA, СОЭ/СРБ Безопасность регистры НЯ/СНЯ, лабораторный мониторинг

   ________________________________________

9. Статистический план анализа

   • Первичный анализ: безопасность (НЯ/СНЯ) по месту проведения вмешательства
   • Вторичный анализ: изменение шкал симптомов и биомаркеров (ANCOVA, смешанные модели)
   • Промежуточный анализ: бесперспективность и безопасность при 50% наборе

10. Регуляторные и этические вопросы

    • Представление клинического испытания FDA/NIH: для одобрения использования cSVF, МСК и ФМТ
    • Одобрение IRB: одобрение NIH/FDA или другого признанного комитета IRB (GARM International Review Board)
    • Информированное согласие: все участники/опекуны
    • Конфиденциальность данных: управление данными в соответствии с HIPAA