Chiffre d'affaires des lipoprotéines sur les régimes à faible et à haut portefeuille d'AGMI

Tous les sujets subiront deux traitements parallèles en 2 phases. Lors d'un traitement, les sujets seront placés sur un régime pauvre en graisses pendant un mois (régime de rodage témoin), puis pendant le deuxième mois, ils continueront le régime pauvre en graisses (c'est-à-dire low-MUFA) avec l'ajout des composants du portefeuille. L'ordre de ces deux phases ne sera pas aléatoire. L'autre traitement sera similaire à celui ci-dessus, sauf que le régime de base de la phase de portefeuille sera riche en graisses monoinsaturées (riches en MUFA). Les sujets seront affectés au hasard à l'un ou l'autre des traitements. Les régimes seront métaboliquement contrôlés et tous les aliments seront fournis à intervalles hebdomadaires.

Les sujets viendront après un jeûne nocturne de 12h au centre de modification des facteurs de risque de l'hôpital St. Michael's ou du département des sciences nutritionnelles de l'Université de Toronto immédiatement avant le début de chaque phase de traitement et à intervalles hebdomadaires au cours de chaque période d'étude. Avant le début de l'étude, les sujets recevront des instructions sur les détails du protocole alimentaire de l'étude. Il leur sera également demandé de maintenir un niveau constant d'activité physique tout au long de l'étude. Lors de toutes les visites, le poids corporel (en kg) sera obtenu en vêtements d'intérieur, sans chaussures, et la tension artérielle sera prise deux fois dans le bras dominant après que les sujets aient été assis pendant au moins 20 minutes. La taille (en cm) sera enregistrée lors de la première visite. Tout au long de la période d'étude, les sujets maintiendront le régime alimentaire prescrit lors de leur visite initiale. À chaque autre visite de chaque phase de traitement, les sujets fourniront un échantillon de sang à jeun. Les tests cinétiques du métabolisme des lipoprotéines seront effectués au cours de la 4ème et de la 8ème semaine de l'étude. Au départ et au cours de la dernière semaine de chaque phase d'étude, une collecte d'urine de 24 h et une collecte d'hydrogène respiratoire de 12 h seront effectuées.

La mesure de la cinétique in vivo de l'apolipoprotéine sera réalisée à l'aide d'une infusion amorcée-constante de [D3]L-leucine. Ce protocole permet la détermination de la cinétique de toutes les apolipoprotéines simultanément. Les études cinétiques seront menées dans un état alimenté en permanence où les participants reçoivent 1/30e de leurs besoins énergétiques quotidiens toutes les demi-heures pendant toute la durée du test (15 heures). Ces méthodes sont décrites en détail dans les publications précédentes de notre groupe. En bref, à 7h du matin le matin de l'étude, après un jeûne nocturne de 12 heures, les participants seront admis à l'unité d'investigation clinique de l'Hôpital général de Toronto et deux cathéters intraveineux (IV) seront insérés, un dans chaque veine de l'avant-bras. Un IV sera pour la perfusion de l'isotope stable décrit ci-dessous et un pour le prélèvement d'échantillons de sang. Après avoir atteint un état d'équilibre (3h après les petits repas toutes les demi-heures), les sujets recevront d'abord une injection bolus de 10 µmol/kg de poids corporel de [D3]L-leucine ([D3]L-leucine 98 %, C/ D/N Isotopes) dissous dans du sérum physiologique (0,9 % de NaCl) puis une perfusion constante de 10 µmol/kg/h de [D3]L-leucine pendant 12 heures via une ligne intraveineuse insérée dans une veine de l'avant-bras gauche. Des prélèvements sanguins seront effectués à intervalles réguliers (0, 1/2, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 11, 12h). Toutes les sous-fractions de lipoprotéines seront séparées par ultracentrifugation séquentielle et ensuite congelées à -80 oC jusqu'à ce qu'elles soient traitées pour analyse.